Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Rosane Ribeiro Figueiredo Alves / Banca: Luciane Alarcão Dias Melício / Resumo: Eventos inflamatórios na interface mateno-fetal estão pronunciados em gestações complicadas por prematuridade e a corioamnionite é reconhecida como a principal causa de morbimortalidade perinatal. As membranas corioamnióticas desempenham papel fundamental na imunidade inata local e inibem o crescimento de micro-organismos, em parte, pela expressão de β defensinas humanas (HBDs). Essas moléculas são antimicrobianos naturais que apresentam atividade antibatcteriana, antifúngica e antiviral e são produzidas por células epiteliais. Quantificar a expressão gênica e avaliar a imunolocalização de HBD-1, HBD-2 e HBD-3 em membranas corioamnióticas de gestações complicadas por prematuridade. Trata-se de um estudo prospectivo e transversal. Fragmentos das membranas corioamnióticas foram coletadas de gestantes atendidas no Serviço de Obstetrícia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP, Botucatu, São Paulo, Brasil. O grupo estudo foi constituído por 25 membranas corioamnióticas de gestantes em Trabalho de Parto Prematuro na presença ou não de Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo que tiveram parto prematuro como desfecho gestacional. Como grupo controle, 27 membranas corioamnióticas de gestações de termo em trabalho de parto foram analisadas. Fragmentos das membranas corioamnióticas foram fixadas em formalina a 10%, embebidas em parafina e seccionadas para análise da imunolocalização de HBD-1, HBD-2 e HBD-3 pela técnica de imunoistoquímica. Outros fragmentos das membranas corioamnióticas foram congelados em nitrogênio líquido e submetidos à extração do RNA total para posterior quantificação da expressão de RNAm de HBD-1, HBD-2 e HBD-3 empregando-se a técnica de PCR em tempo real utilizando o sistema TaqMan Gene Expression Assays (Applied Biosystems). Os resultados obtidos no estudo foram submetidos aos testes z e de Mann Whitney. O software empregado ... / Abstract: Inflammatory events can be pronounced in the maternal-fetal interface in pregnancies complicated by prematurity and chorioamnionitis is a major cause of perinatal morbidity and mortality. The chorioamniotic membranes play fundamental role in the local innate immunity and inhibit the microorganisms growth, partly by the expression of human β defensins (HBDs). These molecules are natural antimicrobials that present antibacterial, antifungal and antiviral activities and are produced by epithelial cells. To quantify the expression and to evaluate the immunolocalization of HBD-1, HBD-2 and HBD-3 in chorioamniotic membranes from pregnancies complicated by prematurity. This was a prospective controlled study. Fragments of chorioamniotic membranes were collected from pregnant women admitted at the Obstetrics Unit of the Clinical Hospital of the Botucatu Medical School, São Paulo State University, Botucatu, São Paulo, Brazil. The study group consisted of 25 chorioamniotic membranes samples from pregnant women with preterm labor, in the presence or not of Preterm Premature Rupture of Membranes (PPROM), who delivery prematurely. In the control group, 27 chorioamniotic membranes from pregnancies at term in the presence at labor were analysed. Samples of the chorioamniotic membranes were fixed in 10% formalin, embedded in paraffin and sectioned for immunolocalization of HBD-1, HBD-2 and HBD-3 by immunohistochemistry technique. Other chorioamniotic membranes samples were collected in liquid nitrogen and total RNA was extracted to quantify mRNA expression of HBD-1, HBD-2 and HBD-3 using real time quantitative PCR employing the TaqMan Gene Expression Assays (Applied Biosystems). Statistical analyses were performed using z and Mann Whitney tests in SigmaStat Software and the level of significance adopted was of 5%. In relation to demographic and obstetrics data no statistically significant difference concerning maternal ... / Mestre

Introdução: A Doença de Gaucher (DG) é causada pela atividade reduzida da enzima lisossomal glucocerebrosidase, o que leva ao acúmulo de glicocerebrosídeo nas células e a uma estimulação crônica do sistema imune. Células natural killer (NK) possuem um papel importante na resposta imune e sua atividade é alterada na DG. Os receptores KIR (Killer Immunoglobulin-like Receptors) regulam a atividade das células NK através da interação com moléculas de HLA (Human Leukocyte Antigen) de classe I das célulasalvo. Objetivo: Analisar a variabilidade dos genes KIR em uma coorte de pacientes com DG do Sul do Brasil, compará-las a um grupo controle e buscar associações com manifestações clínicas. Metodologia: Trinta e um pacientes com DG tipo I (24 com forma leve, 4 com forma moderada e 3 com forma grave) foram analisados e comparados a 250 controles saudáveis quanto a frequência dos genes HLA e KIR. Resultados/Discussão: Não houve diferença significativa nas frequências de variantes dos genes KIR entre os grupos. O alelo HLA B37 é mais frequente nos pacientes com DG do que no grupo controle (p=0,011). A idade de início dos sintomas mostrou associação com a combinação das variantes KIR2DL2 e KIR2DS2 com seu ligante HLA-C1 (p=0,038). Pacientes que apresentam a variante HLA-C2 parecem apresentar maior susceptibilidade a desenvolver bandas mono ou policlonais na eletroforese de proteínas (p=0,007, OR=21,3). Foi encontrada associação entre os alelos DR11 (p=0.008) e DR13 (p=0.011) e gravidade da doença. O alelo DR11 parece estar associado a comprometimento neurológico, enquanto o alelo DR13 ao desenvolvimento de osteonecrose. Conclusão: Nossos dados sugerem uma possível associação entre variantes dos genes KIR e HLA e a DG. Devem ser estudadas em outras coortes de pacientes já que parecem ser um fator modificador de fenótipo. / Background: Gaucher disease (GD) is caused by the reduced activity of a lysosomal enzyme glucocerebrosidase, which leads to the accumulation of glucocerebroside in the cells and a chronic stimulation of the immune system. Natural Killer (NK) cells play an important role in the immune response, and their activity is impaired in GD. Killer immunoglobulin-like receptors (KIR) regulate the activity of NK cells through an interaction with specific human leukocyte antigen (HLA) class I molecules on target cells. Objectives: To analyze the variability of KIR genes in a Southern Brazilian sample of GD patients, to compare it with controls, and to look for associations with clinical manifestations. Methodology: Thirty one GD type I patients (24 mild, 4 moderate, and 3 severe) were analyzed and compared to 250 healthy controls regarding the frequency of HLA and KIR genes. Results/Discussion: There was no significative difference in the frequencies of KIR gene variants between the groups. The HLA B37 allele is more frequent in patients with GD than in control group (p=0.011). The age of onset of symptoms was associated with KIR2DL2 and KIR2DS2 combination with the ligand HLA-C1 (p=0.038). Patients who have the HLA-C2 variant appear to have more mono/polyclonal bands in protein electrophoresis (p=0.007, OR=21.3). An association between the DR11 (p=0.008) and DR13 (p=0.011) alleles and disease severity was found. The DR11 allele appears to be associated with neurological impairment, while the DR13 allele to the development of osteonecrosis. Conclusion: Our data suggest a possible association between KIR genes and HLA genes and GD. They should be studied in other cohorts of GD patients as they seem to be a phenotype modifying factor.

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2007 / Bibliografia: f. 63-84 / A lectina KM+, purificada de sementes de Artocarpus integrifolia, induz migração de neutrófilos de maneira depende do domínio de reconhecimento de carboidratos e por haptotaxia, sendo esta mediada por interação da lectina com seu glicoligante na superfíci / The lectin KM+, purified from seeds of Artocarpus integrifolia, induces haptotatic neutrophil migration dependent on the CRD, which is mediated by the interaction of the lectin with its glycoligand on the neutrophil surface and in the extracellular matrix

O sistema imunológico é formado por um conjunto de células e moléculas envolvidas primariamente na defesa do organismo contra agentes infecciosos. Neste sentido, destaca-se a ação das proteínas codificadas pela região do MHC-I, as quais são responsáveis pela apresentação de pequenos peptídeos (normalmente entre 8 e 12 aminoácidos), gerados a partir da via de processamento endógeno, para Receptores de Células T (TCRs) citotóxicas. As bases moleculares subjacentes à apresentação de peptídeos no contexto das moléculas de MHC-I ainda não foram totalmente esclarecidas, principalmente em função da complexidade inerente a esse processo biológico. Sabe-se, no entanto, que padrões moleculares presentes na área de interação do pMHC-I com o TCR, bem como a estabilidade dos complexos pMHC-I na superfície celular, são fatores determinantes para a imunogenicidade de diferentes complexos. Com o nascimento e desenvolvimento da bioinformática, uma grande evolução foi observada na área, especialmente no que tange ao estudo de sequências lineares de genes e proteínas. Entretanto, o estudo a nível estrutural ainda é lento, especialmente devido ao limitado número de estruturas tridimensionais resolvidas experimentalmente e à falta de modelos acurados. Assim sendo, esta tese se propôs a automatizar e otimizar uma ferramenta de modelagem de complexos pMHC-I (técnica D1-EM-D2) e, posteriormente, criar uma protocolo para avaliar a estabilidade in silico de complexos pMHC-I, com foco na interação entre epitopo e MHC-I. Como resultado, criamos uma nova ferramenta, a qual chamamos DockTope, validada sobre um conjunto mais amplo de dados experimentais (135 estruturas em relação às 46 estruturas do estudo anterior). Esta ferramenta permite que qualquer usuário modele seu próprio pMHC-I, através de uma interface web acessível. Ainda, um estudo via dinâmica molecular realizado com base nos complexos pMHC-I modelados a partir do DockTope nos permitiu inferir algumas das variáveis envolvidas na estabilização dos complexos. Os resultados apresentados aqui contemplam várias áreas de conhecimento da área biológica, favorecendo o desenvolvimento de vacinas mais racionalizadas e alavancando o conhecimento e a compreensão de eventos imunológicos. / The immunologic system is constituted by a group of cells and molecules involved mainly in the organism defense against infectious agents. In this way, the action of proteins encoded by the MHC-I region should be highlighted, since they are responsible for the presentation to T Cell Receptors (TCRs) of small peptides (normally 8 to 12 amino acids in length) generated by the endogenous processing pathway. The molecular bases underlying the presentation of peptides in the context of MHC-I molecules are not fully understood, especially because the complexity inherent to this process. However, it is known that molecular patterns presented in the TCR-interaction surface of each pMHC-I, as well as complex stability on cellular surface, are pivotal factors to determine immunogenicity. The bioinformatics development brings together a great evolution in the field, especially in respect to the analysis of genes and proteins sequences. Yet, the structural study is still delayed, mainly because we have a limited number of threedimensional structures experimentally resolved and there is a lack of accurate models. In this way, we aimed to automatize and optimize a bioinformatics tool to pMHC-I modeling (D1-EM-D2 approach) and, posteriorly, to create an in silico protocol to evaluate the pMHC-I complex stability, focusing on the interaction between epitope and MHC-I. As a result, we created a new tool, which we called DockTope, validated over a wider group of experimental data (135 structures in respect to the 46 structures previously published). This tool allows any user to model its own pMHC-I complex trough a user-friendly web interface. Also, a molecular dynamics study performed using modeled pMHC-I complexes through DockTope allowed us to infer important variables involved on complex stabilization. The results presented here encompass several knowledge areas, favoring the vaccine development and propelling the knowledge and understanding of immunologic events.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:40:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) luiz_berbert_ioc_mest_2010.pdf: 5652664 bytes, checksum: 7e9002e7c7fc1786ff895512aa437d50 (MD5) Previous issue date: 2014-10-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro,RJ, Brasil / A proteína Príon celular (PrPc) é uma glicoproteína constitutivamente expressa no sistema nervoso, bem como no sistema imune, porém, seu papel fisiológico e em processos infecciosos é pouco compreendido. Dados prévios da literatura sugerem disfunções fisiológicas no sistema imune em modelos murinos transgênicos que superexpressam essa proteína podendo levar os mesmos a um processo de imunodeficiência mediante infecçãos. Para testar essa hipótese, este projeto tem o objetivo de avaliar o impacto da infecção experimental pelo T. cruzi em camundongos que superexpressam (TG20) ou não expressam PrPc (KO), analisando parâmetros de infecção correlacionados com a infiltração linfocitária no tecido cardíaco. Nossos resultados demonstram que a superexpressão de PrPc em camundongos gera inicialmente susceptibilidade do modelo à infecção se comparado ao grupo que não expressa a proteína, conforme observado nas taxas de sobrevida e parasitemia A presença de células T, B, bem como células CD11b+ de infiltrado inflamatório é numericamente maior no grupo TG20, porém, esse evento não parece estar relacionado diretamente com alterações observadas no baço e linfonodos desses animais durane cinética de infecção; em relação à expressão de moléculas de ativação linfócitos nestes modelos, observamos aumento das mesmas nas subpopulações linfocitárias do grupo TG20. Nos timo dos modelos TG20 foram observadas alterações fenotípicas, bem como aumento de espressão de laminina e fibronectina e seus receptores nos timócitos. Os dados deste trabalho demonstram que Prpc tem um grande impacto na fisiologiada infecção pelo T. cruzi no modelo murino que superexpressa essa proteína, correlacionando esse evento a uma imunodeficiência previamente observada no mesmo modelo não infectado / Cellular Príon Protein (PrP c ) is a glycoprotein constitutively expressed in nervous an d immune systems, but its physiological role is not well und erstood. Previous data suggest that murine models which overexpress PrP c show physiological disfunctions that could be related with a possible immunodeficiency, which might lead to poor immune response against infections. To support this hypothesis, this project has the aim to evaluate the impact of experimental T. cruzi infection in mice that overexpress or do not express PrP c , correlating infection parameters to lymphocyte infilt ration on heart tissue. Our results demonstrated that PrP c overexpression in mice leads to animal susceptibility during acute infection when compared to KO group, comp aring survival and parasitemia rates on these groups. Inflammatory infiltrate cells such as T and B lymphocytes, as well as CD11b + cells are present in higher numbers in TG20 model, but it seems to be not correlated with spleen and lymph nodes alteractions duri ng infection kinectics; activation molecules are highly express in TG20 periferical lympho cytes. TG20 mouse thymus showed phenotypic alteractions, as well as higher expressio n of laminin and fibronectin and its receptors in thymocytes, which could be possibily re lated to immature thymocyte exportation and their presence in heart tissue. Those data suggest thar PrP c has an important impact during T. cruzi infection in murine model that overexpress PrP c , correlating these alteractions to previous immunodeficien cy in non infected TG20 murine models

Made available in DSpace on 2016-03-18T12:16:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 cecilia_vieira_ioc_dout_2015.pdf: 5478933 bytes, checksum: 82e22f21a3f655c7a35e09359316e42f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Rhodnius prolixus é um dos principais insetos vetores de Trypanosoma cruzi e de Trypanosoma rangeli na América Latina. A produção de peptídeos antimicrobianos (AMPs) no trato digestivo ou corpo gorduroso do inseto é vital para evitar a proliferação de microrganismos patogênicos além de manter a homeostasia da microbiota nativa. O presente trabalho focou na modulação da imunidade humoral do intestino médio de R. prolixus desafiados oralmente com a bactéria Gram-positiva Staphylococcus aureus e Gram-negativa Escherichia coli, além de seus tripanosomatídeos naturais T. rangeli e T. cruzi, considerando a influência do desenvolvimento dos parasitas sobre a microbiota intestinal. Em condições normais, a região anterior do intestino médio houve maior abundância de transcritos de genes de lisozimas (lis) e defensinas (def), enquanto na posterior, do gene da prolixicina (prol). Insetos alimentados com bactérias Gramnegativas apresentaram maior quantidade de transcritos de defC e prol, enquanto a ingestão de bactérias Gram-positivas induziu a expressão de defA e defB no intestino médio A infecção por T. rangeli cepa Macias diminuiu a atividade fenoloxidásica, os níveis de expressão de lisozimas e prolixicina, ao mesmo tempo em que induziu aumento de atividade antibacteriana e dos níveis de defensina C no tubo digestivo do inseto, também modificando a composição de bactérias nativas. Além disso, foi verificado que as diferentes cepas de T. cruzi Dm 28c e Y modulam a resposta imune e a microbiota no intestino médio de R. prolixus de forma variável. T. cruzi Dm 28c induziu um aumento na expressão de genes de defensina C e uma diminuição da expressão de genes de prolixicina, reduzindo drasticamente a população bacteriana cultivável. Em contraste, T. cruzi Y não foi capaz de induzir a expressão de AMPs no intestino médio nem de reduzir consideravelmente a microbiota neste mesmo órgão. Nossos resultados sugerem que R. prolixus em resposta a ingestão de microrganismos, modula diferencialmente a expressão de AMPs pelas células epiteliais do intestino que acarreta a redução da microbiota e um favorecimento do desenvolvimento de T. rangeli e T. cruzi, dependendo do genótipo do parasita / Rhodnius prolixus is a major vector of Trypanosoma rangeli and Trypanosoma cruzi , in Latin America. T he production of antimicrobial peptides (AMPs) in the midgut of the insect is vital to control possible infection, and to maintain the microbiota already present in the digestive tract. This work focuses on the modulation of the humoral im mune responses of the midgut of R. prolixus orally challenged with Gram positive and Gram negative bacteria as well with T. rangeli Macias strain, T. cruzi Dm 28c and Y strain, considering the influence of the parasite s on the intestinal microbiota . Our re sults showed that the anterior midgut contents of control insects contain a higher inducible antibacterial activity and AMPs transcript abundance than those of the posterior midgut. Insects orally fed with Gram - negative bacteria presented higher amount of defC and prol transcripts, while the ingestion of Gram - positive induced defA and defB expression in the midgut. T. rangeli Macias strain successfully colonized R. prolixus midgut through a decreasing in PO activities , prolixicin and lysozyme levels, while at the same time in duc ed an increase in antibacterial activity and upregulated defC levels in the insect anterior midgut. T. rangeli infection also diminishes the amount of cultivable gut bacteria as well modif ied the composition of indigenous microo rganisms. Furthermore, different T. cruzi strains present distinct profile s of immune system and microbiota modulation in R. prolixus midgut, where T. cruzi Dm 28c was able to induce an increase in defensin C genes and a depression in prolixicin genes, whi le drastically reduce the cultivable bacteria population. In the other hand T. cruzi Y was not competent to induce AMPs expression in the gut or considerably reduce the microbiota in the anterior midgut. Our findings suggest that R. prolixus modulates AMP gene expression upon ingestion of bacteria and tripanosomatids with patterns that are distinct and dependent upon the species of the invading pathogen. Besides, t he trypanosome ability to induce immune peptides in epithelial cells seems to favor its development in the insect digestive tract by decreasing intestinal microbiota , depending on the parasite genotype

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2015-03-03T18:47:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese Raquel Spinassé Dettogni.pdf: 5713143 bytes, checksum: d3f2b3f709010dbeeda5966f199c8bcd (MD5) / Approved for entry into archive by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-03-05T20:55:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese Raquel Spinassé Dettogni.pdf: 5713143 bytes, checksum: d3f2b3f709010dbeeda5966f199c8bcd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T20:55:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese Raquel Spinassé Dettogni.pdf: 5713143 bytes, checksum: d3f2b3f709010dbeeda5966f199c8bcd (MD5) Previous issue date: 2015-03-03 / CAPES, FAPES / Diferenças na susceptibilidade do hospedeiro à infecção, na gravidade e na permanência do quadro clínico da doença podem ser atribuídas, em parte, às variações da resposta imune. Estas variações são associadas a polimorfismos de nucleotídeo único (do inglês: single nucleotide polymorphisms - SNPs). Como estudo prévio, foi realizada a caracterização da população geral do Espírito Santo (ES) - Brasil e de uma subpopulação do estado, de origem Pomerana, quanto aos SNPs -131 H/R, -336 A/G, TaqI, -308 A/G, -590 C/T, -174 G/C e +874 A/T nos genes FcγRIIa, CD209, VDR, TNFα, IL-4, IL-6 e INF-γ, respectivamente. Cem indivíduos da Grande Vitória representaram a população geral do ES e 59 indivíduos de Santa Maria de Jetibá representaram a população de origem Pomerana. Como a fase aguda da dengue é bem caracterizada, este estudo objetivou ampliar o conhecimento da fase de convalescença. Noventa e seis indivíduos diagnosticados com dengue sintomática no final de 2012 e início de 2013, no ES, foram acompanhados por 60 dias a partir do início dos sintomas por meio do preenchimento de um questionário clínico e epidemiológico em quatro entrevistas. A persistência de 37 sintomas clínicos da dengue foi avaliada. Para analisar a influência da genética do sistema imunológico do hospedeiro na persistência de sintomas clínicos da dengue na fase de convalescença, foi determinada a associação entre os sete SNPs, para os quais a população do ES foi caracterizada, e a persistência de sintomas. O DNA genômico dos participantes do estudo foi extraído do sangue periférico e a genotipagem dos SNPs foi realizada por reação em cadeia da polimerase - polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição (do inglês: polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism - PCR-RFLP) As frequências genotípicas de todos os SNPs encontraram-se em equilíbrio de Hardy-Weinberg (do inglês: Hardy-Weinberg equilibrium - HWE), com exceção do SNP no gene IL-6. Não houve diferença estatisticamente significante nas frequências genotípicas dos SNPs nos genes FcγRIIa, CD209, VDR, TNF-α e IL-4 entre as duas populações. Diferença estatisticamente significante foi encontrada entre as duas populações nas distribuições genotípicas dos SNPs nos genes IL-6 (p = 0,03) e INF-γ (p = 0,007). Trinta e sessenta dias após o início dos sintomas, 38,5% e 11,5% dos indivíduos com dengue sintomática reportaram ter pelo menos um sintoma clínico da dengue, respectivamente. Dos sintomas analisados, os mais persistentes foram os relacionados à síndrome da fadiga como mialgia, artralgia, astenia e mal-estar, sendo a mialgia o mais frequente. A persistência de sintomas em 30 dias foi associada ao gênero feminino (p = 0,044) e a persistência de sintomas constitucionais foi associada à dengue secundária (p = 0,041). O SNP no gene FcγRIIa, foi associado à persistência de sintomas em 30 dias, no subgrupo de indivíduos com dengue secundária (p = 0,046), sendo a presença do alelo H associada à não persistência de sintomas (p = 0,014). A presença do alelo A do SNP no gene TNF-α foi associada à não persistência de sintomas no subgrupo de indivíduos com dengue secundária (p = 0,025), sendo o genótipo GG associado à persistência de sintomas neurológicos, psicológicos e comportamentais em 30 dias (p = 0,038). A presença do alelo C do SNP no gene IL-6 foi associado à persistência de sintomas dermatológicos em 30 dias (p = 0,005). O perfil genético desses SNPs pode favorecer o estabelecimento de marcadores imunogenéticos associados à fase convalescente da infecção pelo vírus da dengue (do inglês: dengue virus - DENV). / Differences in host susceptibility to infection, in the severity and permanence of the clinical picture of disease can be attributed, in part, to variations in the immune response. These variations are associated with single nucleotide polymorphisms (SNPs). As a previous study, the characterization of the general population of the Espírito Santo (ES)-Brazil and of a subpopulation of the state, of pomeranian origin, was performed as the SNPs -131 H/R, -336 A/G, TaqI, -308 A/G, -590 T/C, -174 G/C and +874 A/T in FcγRIIa, CD209, VDR, TNF-α, IL-4, IL-6 and IFN-γ genes, respectively. One hundred individuals of the Grande Vitória represented the general population of ES and 59 individuals of Santa Maria de Jetibá represented the population of Pomeranian origin. As the acute phase of dengue is well characterized, this study aimed to expand the knowledge of the phase of convalescence. Ninety-six individuals diagnosed with symptomatic dengue in late 2012 and early 2013, in ES, were followed for 60 days from the onset of symptoms by completing a clinical and epidemiological questionnaire in four interviews. The persistence of 37 clinical symptoms of dengue was assessed. To analyze the influence of the genetics of the host immune system in the persistence of clinical symptoms of dengue in the convalescent phase, the association between seven SNPs, for which the population of ES was characterized, and the persistence of symptoms was determined. Genomic DNA of study participants was extracted from peripheral blood and genotyping of SNPs was performed by polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). The genotype frequencies of all SNPs were found in Hardy-Weinberg equilibrium (HWE), except for the SNP in the IL-6 gene. There was no statistically significant difference in genotype frequencies of SNPs in FcγRIIa, CD209, VDR, TNF-α and IL-4 genes between the two populations. A statistically significant difference was found between the two populations in the genotypic distributions of SNPs in IL-6 (p = 0.03) and INF-γ (p = 0.007) genes. Thirty and sixty days after the onset of symptoms, 38.5% and 11.5% of symptomatic patients with dengue reported having at least one clinical symptom of dengue, respectively. Symptoms among, the most persistent were related to fatigue syndrome as myalgia, arthralgia, asthenia and malaise, myalgia being the most frequent. The persistence of symptoms at 30 days was associated with female gender (p = 0.044) and persistent constitutional symptoms was associated with secondary dengue (p = 0.041). FcγRIIa gene SNP, was associated with persistent symptoms at 30 days in the subgroup of patients with secondary dengue (p = 0.046), and presence of the H allele was associated with non-persistence of symptoms (p = 0.014). The presence of the A allele in the TNF-α gene SNP was associated with non-persistence of symptoms in the subgroup of patients with secondary dengue (p = 0.025), with the GG genotype associated with persistent neurological, psychological and behavioral symptoms in 30 days (p = 0.038). The presence of the C allele in the IL-6 gene SNP was associated with persistent dermatological symptoms at 30 days (p = 0.005). Genetic profiling of these SNPs may favor the establishment of immunogenetic markers associated with the convalescent infection phase by the dengue virus (DENV).

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:30:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-16. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:34:25Z : No. of bitstreams: 1 000858031_20170806.pdf: 108222 bytes, checksum: d30d53d86f7661757a061670f3b2cb98 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-08-07T14:09:13Z: 000858031_20170806.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-08-07T14:10:16Z : No. of bitstreams: 1 000858031.pdf: 980973 bytes, checksum: b395a844998ca8066d04420b0f82824a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A cárie precoce da infância (CPI) é ainda um grave problema de saúde pública no mundo, principalmente em países em desenvolvimento. Estudos têm sugerido a associação da ingestão frequente de carboidratos fermentáveis como a sacarose, altas contagens de microrganismos cariogênicos e maior vulnerabilidade imunológica da criança na etiologia da CPI. O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos microbiológicos e imunológicos associados ao desenvolvimento da cárie precoce da infância. Crianças com idade entre 36 e 60 meses foram selecionadas e divididas em três grupos: LC - livres de cárie, CPI e CPI-S (CPI-severa). Questionário sobre os aspectos socioeconômico-culturais, hábitos de higiene bucal e diários de dieta foram respondidos pelos responsáveis. Foram coletadas amostras de saliva e biofilme dental das crianças e processadas para subsequentes avaliações laboratoriais. Em seguida, os níveis de IgA salivar total e contra GbpB de S. mutans foram determinados por ELISA e Western blot, respectivamente, as concentrações salivares dos peptídeos catiônicos antimicrobianos (PCAM): defensinas hBD-2 e hBD-3, catelicidina LL-37 e histatina 5 (HTN-5) por ELISA e a presença e os níveis salivares de Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus spp., Bifidobacterium spp. e Scardovia wiggsiae por qRT-PCR, sendo que estes dados foram correlacionados com os níveis salivares e no biofilme dental de estreptococos mutans (SM) e Lactobacillus spp. por meio de cultivo em meios específicos. Os resultados mostraram que as crianças com CPI-S apresentaram menor renda familiar quando comparadas às crianças LC ou CPI. Contudo, a ingestão de açúcar não diferiu entre os grupos. O grupo CPI-S apresentou maior contagem de SM na saliva/biofilme em relação aos grupos LC e CPI. Houve uma correlação positiva... / Early childhood caries (ECC) is still a serious public health problem worldwide, especially in developing countries. Studies have been suggested the association among frequent intake of fermentable carbohydrates such as sucrose, high cariogenic microorganism's counts and child's immune vulnerability in the etiology of ECC. The objective of this study was to evaluate the microbiological and immunological factors for the development of early childhood caries. 36 to 60 monthold children were selected and distributed into three groups: caries free (CF), ECC and S-ECC (severe-ECC). Questionnaires about socio-economic-cultural data, oral hygiene habits and food-frequency diary were completed by the parents. Saliva and dental biofilm were collected from children and processed for subsequent laboratorial tests. The following analyses were determined: total IgA and IgA response against S. mutans GbpB by ELISA and Western blot, respectively; salivary concentrations of antimicrobial peptides (AMPs): defensins hBD-2 and hBD-3, cathelicidin LL-37 and histatin 5 (HTN-5) by ELISA; salivary detection and quantification of Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Lactobacillus spp., Bifidobacterium spp. and Scardovia wiggsiae by qRT-PCR, and these data were correlated with mutans streptococci (MS) and Lactobacillus spp. levels by culture in specific medium. Results showed that S-ECC children had reduced family income compared to ECC and CF. However, sugar intake did not differ among the groups. S-ECC group had higher MS count than CF/ECC groups. Positive correlations between salivary IgA response against GbpB and MS counts were found when the entire population was evaluated. When children with high mutans streptococci counts were compared, S-ECC group showed a significant decrease in IgA antibody levels against GbpB compared... / FAPESP: 12/19235-5

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, Programa de Pós-Graduação em Nutrição Humana, 2010. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-06T14:34:39Z No. of bitstreams: 1 2010_FabianaPeçanhaValadares.pdf: 4326045 bytes, checksum: 73ad4f116f75fb9da052f9fd122e8685 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-06T15:58:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_FabianaPeçanhaValadares.pdf: 4326045 bytes, checksum: 73ad4f116f75fb9da052f9fd122e8685 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-06T15:58:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_FabianaPeçanhaValadares.pdf: 4326045 bytes, checksum: 73ad4f116f75fb9da052f9fd122e8685 (MD5) Previous issue date: 2017-10-06 / Os fungos Agaricus sylvaticus têm sido utilizados como suplemento dietético em pacientes com câncer devido às suas propriedades nutricionais, farmacológicas e medicinais. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da suplementação dietética com Agaricus sylvaticus nos parâmetros imunológicos. hematológicos nutricionais e as repercussões no sistema digestivo de pacientes com câncer de mama. O estudo constitui um ensaio clínico randomizado. duplocego e placebo-controlado. A amostra foi constituída de 46 mulheres, em estádios, II e III. alocados em de acordo com o número de ciclos de quimioterapia e tipo de suplementação: com Agaricus sylvaticus (2.1 g/dia) e placebo, durante o período de três e seis meses. Foram realizadas até seis avaliações de hemograma completo ao longo do tratamento, além da avaliação nutricional e clínica. Os resultados foram analisados pelos programas Microsoft Excel 2003 e R - versão 2.11.1 e, foram considerados significativos para um valor de p < 0,05. As alterações gastrointestinais foram avaliadas através de formulário-padrão e anamnese dirigida, cujos resultados foram analisados de forma descritiva, utilizando os programas Microsoft Excel 2003 e Epi Info 2004 para Windows, versão 3.3.2. O estudo foi realizado no Hospital de Base do Distrito Federal e o protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Secretaria de Estado de Saúde do Distrito Federal. No grupo de pacientes suplementados com Agaricus sylvaticus. observou-se, aumento significativo de hemoglobina, hematócrito. hemácias. e contagem de leucócitos, neutrófilos, linfócitos, contagem total de linfócitos, além de aumento do apetite e redução da constipação, diarréia, náuseas e vómitos, fatos não observados no grupo placebo. Os resultados sugerem que a suplementação com fungos Agaricus sylvaticus é capaz de promover benefícios nos sistemas hematológico, imunológico e digestivo, logo. na qualidade de vida de pacientes com câncer de mama. / Agaricus sylvaticus fungi have been used as a dietary supplement in cancer patients due to their nutritional properties, pharmacological and medicinal. The aim of this study was to evaluate the effects of dietary supplementation with Agaricus sylvaticus in immunological parameters, haematological and nutritional effects on the digestive system of patients with breast cancer. The study is a randomized, double-blind, placebo-controlled study. The sample consisted of 46 women in stages II and III. allocated in accordance with the number of cycles of chemotherapy and type of supplementation: with Agaricus sylvaticus (2.1 g / day) or placebo during the three and six months. Six evaluations were made up of complete blood count during treatment, as well as nutritional assessment and clinical research. The results were analyzed by Microsoft Excel 2003 and R - version 2.11.1, and were considered significant for a value of p < 0.05. Gastrointestinal changes were evaluated using the standard form and anamnesis, results were analyzed descriptively, using Microsoft Excel 2003 and Epi Info 2004 for Windows, version 3.3.2. The study was conducted at the Hospital of the Federal District and the protocol was approv ed by the Ethics in Research of the Ministry7 of Health of Distrito Federal. In patients supplemented with Agaricus sylvaticus, it was observed significant increase in hemoglobin, hematocrit, hemoglobin, and leukocyte count, neutrophils, lymphocytes, total lymphocyte count, and increased appetite and reduction of constipation, diarrhea, nausea and vomiting, events not observed in the placebo group. The results suggest that supplementation with Agaricus sylvaticus is able to promote benefits systems hematological, immune and digestive systems, so the quality of life of patients with breast cancer.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, Programa de Pós-Graduação em Nutrição Humana, 2015. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2016-03-17T15:00:06Z No. of bitstreams: 1 2015_ElemarciaMartinsdaSilvaPaixao_Parcial.pdf: 112540 bytes, checksum: 87fb6cce64a369bd60d0cc0ba9a06146 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-03-17T15:24:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_ElemarciaMartinsdaSilvaPaixao_Parcial.pdf: 112540 bytes, checksum: 87fb6cce64a369bd60d0cc0ba9a06146 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-17T15:24:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_ElemarciaMartinsdaSilvaPaixao_Parcial.pdf: 112540 bytes, checksum: 87fb6cce64a369bd60d0cc0ba9a06146 (MD5) / Introdução: Há evidências de que pacientes com câncer de mama apresentam alteração da função imune, o que pode favorecer a progressão do câncer. A inflamação crônica está envolvida em todos os estágios de carcinogênese. Estudos tem demonstrado que ácidos graxos poliinsaturados n-3 eicosapentaenóico (EPA) e docosahexaenóico (DHA) apresentam propriedades imunomoduladoras e antiinflamatórias, sendo utilizados na prevenção e tratamento de diferentes patologias, incluindo o câncer. Neste contexto, este estudo teve como objetivo investigar o efeito da suplementação com óleo de peixe, em pacientes recém diagnosticadas com câncer de mama, nas subpopulações de linfócitos, citocinas pró-inflamatórias, proteína C-reativa e Prostaglandina E2. Metodologia: Estudo de intervenção, randomizado, placebo controlado, duplo-cego, conduzido em pacientes com diagnóstico de câncer de mama, distribuídas em dois grupos (grupo óleo de peixe – GO e grupo placebo – GP). As pacientes do GO receberam diariamente 2 g de concentrado de óleo de peixe contendo 1,8g de ácidos graxos n-3. O grupo placebo recebeu 2 g/dia de óleo mineral com igual aparência do óleo de peixe. Todas as pacientes foram suplementadas por 4 semanas durante o período anterior ao tratamento cirúrgico. Antes e ao final da suplementação, foram coletados dados de antropometria, composição corporal, consumo dietético e amostras sanguíneas para fenotipagem de linfócitos, exames laboratoriais (glicemia de jejum, albumina sérica, perfil lipídico), análise do perfil de ácidos graxos séricos e marcadores inflamatórios (IL-1β, IL-6, TNF-α, proteína C-reativa e prostaglandina E2). A análise estatística foi realizada utilizando testes paramétricos e não paramétricos para comparar os resultados dos dois grupos. Resultados: O GO foi constituído de 18 pacientes e o GP 19. No início do estudo não foram observadas diferenças significativas entre os grupos quanto aos parâmetros socioeconômicos, antropométricos e clinicopatológicos. A maioria das pacientes apresentou carcinoma ductal infiltrante e 55,6% e 57,9% do GO e GP, respectivamente, apresentaram tumor HER2 negativo. Após a intervenção, no grupo óleo de peixe houve aumento significativo da quantidade de EPA (p=0,004), DHA (p=0,007) e total de ácidos graxos n3 (p=0,004) no fosfolipídio plasmático. Observou-se redução da razão n6/n3 (p=0,002). No GO observou-se manutenção tanto da percentagem de linfócitos T CD4+ no sangue periférico como dos níveis séricos da proteína C-reativa, enquanto no GP houve redução da percentagem de linfócitos T CD4+ no sangue periférico e aumento da proteína C-reativa. Não houve mudanças significativas nos níveis séricos das citocinas pró-inflamatórias e da prostaglandina E2. Conclusão: A suplementação de 1,8g de ácidos graxos n-3 em pacientes recém diagnosticadas com câncer de mama, durante 4 semanas promoveu mudança significativa na composição dos ácidos graxos plasmáticos, manteve a percentagem das células T CD4+ e os níveis séricos de PCR, sugestivo da sua ação benéfica no sistema imunológico. / Introduction: There is evidence that breast cancer patients have impaired immune function, which can promote cancer progression. Chronic inflammation is involved in all stages of carcinogenesis. Studies have shown that n-3 polyunsaturated fatty acids eicosapentaenoic (EPA) and docosahexaenoic (DHA) acids have immunomodulatory and anti-inflammatory properties and are useful in the prevention and treatment of various diseases, including cancer. In this context, this study aimed to investigate in patients with newly diagnosed breast cancer the effects of fish oil supplementation in lymphocytes subpopulation, proinflammatory cytokines, C-reactive protein (CRP) and prostaglandin E2. Methodology: A randomized, placebo controlled, double-blind clinical trial was conducted in patients diagnosed with breast cancer, divided into two groups (fish oil group - GO and placebo group - GP). The GO patients received 2 g/ day of fish oil concentrate containing 1.8g of n-3 fatty acids. The placebo group received 2 g/ day of mineral oil with similar appearance to fish oil. All patients were supplemented for four weeks during the period prior to surgical treatment. Before and at the end of supplementation, we collected anthropometric, body composition and dietary intake data and blood samples for lymphocyte phenotyping, laboratory tests (fasting glucose, serum albumin, lipid profile), serum fatty acids analysis and inflammatory markers (IL-1β, IL-6, TNF-α, CRP and prostaglandin E2). Statistical analysis was performed using parametric and non-parametric tests to compare the results of both groups. Results: GO consisted of 18 patients and the GP 19. At baseline no significant differences were observed between the groups in terms of socioeconomic, anthropometric and clinicopathological parameters. Most of the patients had infiltrating ductal carcinoma and 55.6% and 57.9% of GO and GP, respectively, had negative HER2 tumor. After the intervention there was a significant increase in the amount of EPA (p=0.004), DHA (p=0.007) and the total of n3 fatty acids (p=0.004) in plasma phospholipid of the GO patients. There was a reduction in the n6/ n3 ratio (p=0.002). In GP patients there was a reduction in the percentage of peripheral blood CD4+ T lymphocytes counts and increased plasma C-reactive protein concentration. In GO patients the proportion of peripheral blood CD4 + T lymphocytes and serum of CRP levels were maintained. There were no significant changes in serum levels of proinflammatory cytokines and prostaglandin E2. Conclusion: Supplementation of treatment naïve breast cancer patients with 1.8 g/ day of n-3 fatty acids for 4 weeks caused a significant change in the composition of plasma fatty acids, kept the frequency of CD4+ T cells and serum CRP, suggestive of a beneficial effect of the supplement on patient’s immune system.