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Estudo Computacional de Biochip em Fibra ?ptica Baseado na Resson?ncia de Pl?smons de Superf?cie

Vicente, Mauricio 06 May 2017 (has links)
Submitted by Alex Sandro R?go (alex@ifpb.edu.br) on 2017-06-06T12:00:22Z No. of bitstreams: 1 32- Mauricio Vicente - ESTUDO COMPUTACIONAL DE BIOCHIP EM FIBRA ?PTICA BASEADO NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 2764637 bytes, checksum: 32348af8b12e2c07b56a0ffc0014865a (MD5) / Approved for entry into archive by Alex Sandro R?go (alex@ifpb.edu.br) on 2017-06-06T12:04:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 32- Mauricio Vicente - ESTUDO COMPUTACIONAL DE BIOCHIP EM FIBRA ?PTICA BASEADO NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 2764637 bytes, checksum: 32348af8b12e2c07b56a0ffc0014865a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T12:04:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 32- Mauricio Vicente - ESTUDO COMPUTACIONAL DE BIOCHIP EM FIBRA ?PTICA BASEADO NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 2764637 bytes, checksum: 32348af8b12e2c07b56a0ffc0014865a (MD5) Previous issue date: 2017-05-06 / O fen?meno de Resson?ncia de Pl?smons de Superf?cie (RPS) tem sido utilizado para a produ??o de biossensores por apresentar vantagens, como a possibilidade de miniaturiza??o, baixo custo, alta sensibilidade, alta seletividade e velocidade de resposta. Este trabalho tem como objetivo realizar um estudo computacional dos biossensores RPS em fibra ?ptica convencional (s?lica e/ou pol?mero). Neste caso, a casca da fibra ? removida na regi?o sensora, e o n?cleo ? recoberto por uma camada fina de metal, formando o biochip ?ptico. A an?lise computacional ? realizada com o aux?lio do software MATLAB, em que foi implementado o modelo de multicamadas de Fresnel, e o software COMSOL Multiphysics, baseado no m?todo dos elementos finitos, para a modelagem do biochip. O objetivo ? modificar e investigar os par?metros geom?tricos (dimens?es da fibra, espessura da camada met?lica) e eletromagn?ticos (comprimento de onda, ?ndice de refra??o, ?ngulo de incid?ncia, dentre outros) do biochip. Al?m disso, o tipo de metal utilizado ? de fundamental import?ncia, uma vez que sua oxida??o pode implicar na diminui??o do desempenho do biossensor, em contato com o analito (solu??o aquosa). O uso de metais nobres, como Ouro e Prata, na configura??o do biossensor oferece bons resultados, observados por meio dos valores de FWHM e refletividade, tanto para a ocorr?ncia do fen?meno RPS, quanto ao se analisar os par?metros de desempenho do biossensor. An?lises foram realizadas utilizando os modos de interroga??o angular e espectral. Por fim, tamb?m s?o consideradas configura??es de biochip com camadas de grafeno dispostas nas interfaces metal-fibra e metal-analito, com o fito de estudar a possibilidade de aumento da transmissividade do campo el?trico evanescente. Os resultados das an?lises s?o mostrados e discutidos.
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Desenvolvimento de um imunosensor para detec??o de anticorpos anti-Trypanosoma cruzi por meio da espectroscopia de resson?ncia de pl?smons de superf?cie

Luz, Jo?o Gabriel Guimar?es January 2014 (has links)
Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:01Z No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-07T12:40:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-07T12:40:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 joao_gabriel_guimares_luz.pdf: 5854830 bytes, checksum: 3b384576c220fecec7431b8c107b9ea1 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / O objetivo desse trabalho foi desenvolver um imunosensor fundamentado em espectroscopia de resson?ncia de pl?smons de superf?cie (SPR) para a detec??o de anticorpos anti-Trypanosoma cruzi por meio da imobiliza??o de ant?genos brutos do parasito em monocamadas auto-organizadas mistas (SAMs) formadas por ?cido 11-mercaptoundecan?ico (11-MUA) e ?cido 3-mercaptopropi?nico (3-MPA). Na sua constru??o, as concentra??es de cada alcanotiol, bem como a propor??o de cada um deles na composi??o das SAMs mistas foram definidas atrav?s de c?lculos de cobertura de superf?cie Posteriormente, o ant?geno em diferentes concentra??es foi imobilizado sobre as SAMs mistas ativadas constru?das em disco de ouro e, a varia??o do ?ngulo de SPR (??SPR) decorrente dessa etapa foi monitorada em tempo real. O imunosensor desenvolvido foi ent?o eletroquimicamente caracterizado por voltametria c?clica (VC) e espectroscopia de imped?ncia eletroqu?mica (EIE) e as respostas do mesmo frente a um pool de soros de indiv?duos infectados e n?o infectados pelo T. cruzi foram avaliadas. Em seguida, foram determinados par?metros para otimiza??o do dispositivo, incluindo tempo de imobiliza??o e concentra??o do ant?geno, bloqueio e regenera??o da superf?cie sensora e tempo envolvido nas an?lises do imunoensaio. Por fim, a dilui??o de trabalho do soro e o ponto de corte do imunosensaio foram escolhidos e os ?ndices de desempenho do mesmo como t?cnica para o imunodiagn?stico da DC foram calculados empregando 171 soros, sendo 99 de indiv?duos infectados pelo T. cruzi, 30 de n?o infectados e 42 portadores de outras infec??es. Os maiores valores de foram encontrados para a concentra??o 1.0 mmol L-1 de 11-MUA e 3-MPA e para as SAMs mistas formadas na propor??o de 1:10. A imobiliza??o dos ant?genos foi conduzida com ?xito, de modo que houve linearidade entre a concentra??o utilizada e o ??SPR. Por VC e EIE, foi demonstrado que a liga??o covalente das prote?nas aumentou a resist?ncia ? transfer?ncia eletr?nica quando comparado com o comportamento da sonda eletroqu?mica sobre as SAMs mistas. Ademais, o imunosensor se mostrou, semelhante ao ELISA, capaz de detectar anticorpos anti-T. cruzi em amostras de soros dilu?das at? 1280 vezes. J? em rela??o aos soros negativos, o dispositivo detectou ??SPR significativas apenas at? a dilui??o 1:160, o que demonstrou razo?vel capacidade do m?todo em distinguir indiv?duos infectados de n?o infectados. Dentre os par?metros anal?ticos avaliados ficou definido o tempo de imobiliza??o e a concentra??o do ant?geno em 20 minutos e 30 ?g mL-1, o bloqueio da superf?cie por 10 minutos com solu??o de BSA 1.0%, a regenera??o pela inje??o de SDS 1.0% e o tempo de avalia??o da resposta do dispositivo em 20 minutos. A dilui??o do soro em 1:320 e o ponto de corte a 17.2 m? foram os crit?rios metodol?gicos definidos para o imunosensaio. Os ?ndices de desempenho calculados determinaram um excelente potencial do imunosensor no diagn?stico sorol?gico da doen?a de Chagas, com valores de sensibilidade de 100%, especificidade de 97.2%, valor preditivo positivo igual a 98%, valor preditivo negativo de 100% e acur?cia global estimada em 99.6%. O n?mero de rea??es cruzadas em soros de indiv?duos com leishmaniose visceral foi menor no m?todo proposto (1/7) do que no ELISA (6/7). A partir dos resultados ? poss?vel afirmar que foi desenvolvido com ?xito um imunosensor sens?vel, espec?fico, r?pido, simples e de f?cil execu??o para o diagn?stico sorol?gico da doen?a de Chagas. / Disserta??o (Metrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT The aim of the present study was to describe the development of an unpublished SPR-based immunosensor for detection of anti-T. cruzi antibodies in human serum through the covalently immobilized T. cruzi antigen on a mixed SAM of 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA) and 3-mercaptopropionic acid (3-MPA) on a SPR sensor chip. In its construction, the concentrations of each alkanethiol, and the proportion of each in the composition of the mixed SAMs were defined by calculation of surface coverage Subsequently, the antigen at different concentrations was immobilized on the activated mixed SAMs built on gold disc, and the change in the SPR angle (??SPR) resulting from this step was monitored in real time. The imunosensor developed was electrochemically characterized by cyclic voltammetry (CV) and electrochemical impedance spectroscopy (EIS), and the responses of a pool of sera from individuals infected and not infected with T. cruzi were also evaluated. Then, some parameters for the optimization of the device were defined, including immobilization time and antigen concentration, blocking and regeneration of the sensor surface and time involved in the analysis of the immunoassay. Finally, the working dilution of the serum and the cut-off point were chosen and the performance indices of the technique were calculated using 171 sera - 99 individuals infected with T. cruzi, 30 not infected and 42 with other infections. The highest values ??of ? were found for the 1.0 mmol L-1 concentration of 11-MUA and 3-MPA and mixed SAMs formed at 1:10 proportion. The immobilization of antigens was conducted successfully, so there was linearity between the concentration used and ??SPR. For VC and EIS has been demonstrated that covalent attachment of the protein increased the electron transfer resistance when compared with the behavior of the electrochemical probe on the mixed SAMs. Furthermore, imunosensor showed, similarity to ELISA, capable of detecting anti-T. cruzi in sera diluted up 1280 times. In relation to the negative sera, the device detected significant ??SPR only until dilution 1:160, which demonstrated the ability of the method to distinguish infected from uninfected individuals. The following analytical parameters were defined: time of immobilization and antigen concentration at 20 minutes and 30 mg mL-1, blocking surface for 10 minutes with 1.0% BSA solution, regeneration by injection of 1.0% SDS and time evaluation of the response of the device in 20 minutes. The serum dilution at 1:320 and cut-off point at 17.2 m? were the methodological criteria for immunoassay. The performance indices calculated for the imunosensor demonstrated a great potential in serological diagnosis of Chagas' disease, with a sensitivity of 100%, specificity of 97.2%, positive predictive value of 98%, negative predictive value of 100% and global accuracy estimated in 99.6%. The number of cross-reactivity with sera from individuals with visceral leishmaniasis was lower (1/7) than in ELISA (6/7). Based on the results, it is possible to stay that a sensitive, specific, rapid, simple and easy immunosensor was successfully with potential application at serological diagnosis of Chagas disease.
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Estudo e Desenvolvimento de Sensor em Fibra ?ptica Polim?rica Baseada na Resson?ncia de Pl?smons de Superf?cie

Silva, Maria Lais 06 May 2017 (has links)
Submitted by Alex Sandro R?go (alex@ifpb.edu.br) on 2017-06-06T12:11:49Z No. of bitstreams: 1 33- Maria La?s F?lix da Silva - ESTUDO E DESENVOLVIMENTO DE SENSOR EM FIBRA ?PTICA POLIM?RICA BASEADO NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 1171314 bytes, checksum: 71f7ec19abb6963312d0d672f587dfcb (MD5) / Approved for entry into archive by Alex Sandro R?go (alex@ifpb.edu.br) on 2017-06-06T12:14:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 33- Maria La?s F?lix da Silva - ESTUDO E DESENVOLVIMENTO DE SENSOR EM FIBRA ?PTICA POLIM?RICA BASEADO NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 1171314 bytes, checksum: 71f7ec19abb6963312d0d672f587dfcb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T12:14:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 33- Maria La?s F?lix da Silva - ESTUDO E DESENVOLVIMENTO DE SENSOR EM FIBRA ?PTICA POLIM?RICA BASEADO NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 1171314 bytes, checksum: 71f7ec19abb6963312d0d672f587dfcb (MD5) Previous issue date: 2017-05-06 / O presente trabalho tem como intuito estudar e desenvolver um sensor em fibra ?ptica polim?rica multimodo, baseado no fen?meno de Resson?ncia de Pl?smons de Superf?cie (Surface Plasmon Resonance, SPR). Esse fen?meno vem ganhando cada vez mais destaque devido ? elevada sensibilidade a pequenas varia??es de ?ndice de refra??o do meio externo. O interesse na utiliza??o de fibra ?ptica polim?rica como substrato deve-se ? possibilidade da redu??o de tamanho e peso, f?cil manuseio no que diz respeito ? remo??o da casca, realizada por meio de um procedimento simples, em que a fibra ? imersa em uma solu??o qu?mica, sem envolver processos mais complexos que poderiam aumentar o custo do sensor, al?m do acesso remoto. A configura??o utilizada ? o modelo de Krestchmann, baseado na Reflex?o Total Atenuada, constitu?do por tr?s camadas: um substrato ?ptico, uma camada met?lica com elevada condutividade e um analito com ?ndice de refra??o a ser identificado. A resposta do sensor ?ptico SPR neste trabalho usar? os modos de interroga??o espectral e angular, com os pontos de opera??o do sensor (comprimento de onda e ?ngulo de resson?ncia, respectivamente) determinados computacionalmente. Para a fabrica??o do sensor, uma caracteriza??o num?rica ? realizada com o intuito de investigar a espessura do filme fino e o ponto de opera??o do sensor para a detec??o do analito de interesse. O modelo utilizado ? composto por tr?s camadas: pol?mero (camada 1), Ouro (camada 2) e ?gua destilada (camada 3). Na prepara??o da regi?o sensora, ser? mostrado que a casca da fibra ?ptica deve ser removida quimicamente, e depositada em seu lugar uma camada fina de metal (Ouro), utilizando uma m?quina de pulveriza??o cat?dica. A carateriza??o experimental no modo de interroga??o angular apresenta concord?ncia com os resultados te?ricos, assim como os resultados experimentais obtidos para o modo de interroga??o espectral. Com base nas investiga??es realizadas ao longo do trabalho, ? poss?vel prever um futuro promissor na utiliza??o das fibras ?pticas como substrato de sensores ?pticos SPR
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CARACTERIZA??O DE FIBRAS ?PTICAS MICROESTRUTURADAS PARA APLICA??O EM SENSORES BASEADOS NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE

Santiago, M?rcia Fernanda da Silva 26 February 2018 (has links)
Submitted by Programa de P?s-Gradua??o Engenharia El?trica (ppgee@ifpb.edu.br) on 2018-04-17T14:34:49Z No. of bitstreams: 1 42- M?rcia Fernanda da Silva Santiago - CARACTERIZA??O DE FIBRAS ?PTICAS MICROESTRUTURADAS PARA APLICA??O EM SENSORES BASEADOS NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 3830493 bytes, checksum: 0d5677af2fa2da844b06326e563cefca (MD5) / Approved for entry into archive by Programa de P?s-Gradua??o Engenharia El?trica (ppgee@ifpb.edu.br) on 2018-04-17T16:58:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 42- M?rcia Fernanda da Silva Santiago - CARACTERIZA??O DE FIBRAS ?PTICAS MICROESTRUTURADAS PARA APLICA??O EM SENSORES BASEADOS NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 3830493 bytes, checksum: 0d5677af2fa2da844b06326e563cefca (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-17T16:58:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 42- M?rcia Fernanda da Silva Santiago - CARACTERIZA??O DE FIBRAS ?PTICAS MICROESTRUTURADAS PARA APLICA??O EM SENSORES BASEADOS NA RESSON?NCIA DE PL?SMONS DE SUPERF?CIE.pdf: 3830493 bytes, checksum: 0d5677af2fa2da844b06326e563cefca (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Capes / A preocupa??o com sa?de p?blica ? um fator relevante na hist?ria da humanidade, epidemias de doen?as causadas por v?rus e bact?rias podem provocar impactos socioecon?micos, nas ?reas atingidas por elas. Essa preocupa??o tem impulsionado a pesquisa e o desenvolvimento de dispositivos que sejam capazes de prevenir e detectar patologias auxiliando no tratamento. Ao longo dos anos t?m sido propostas e desenvolvidas diversas plataformas de sensoriamento visando a detec??o e an?lise de subst?ncias qu?micas e biol?gicas que podem caracterizar algumas patologias espec?ficas na ?rea de sa?de. A constru??o dessas plataformas sensoras resultam de estudos multidisciplinares que agregam diferentes ?reas de estudo, como engenharia e medicina resultando em diversas configura??es de sensores e biossensores. A obten??o de sensoriamento pode ser realizada a partir de algumas abordagens, dentre as quais destaca-se o efeito de resson?ncia de pl?smons de superf?cie (Surface Plasmon Resonance - SPR) que, aliado ? tecnologia das fibras ?pticas, tem possibilitado a constru??o de biochips ?pticos que integram o sistema de sensoriamento. As fibras ?pticas apresentam algumas vantagens de utiliza??o em compara??o com os biochips tradicionais baseados em prisma, tais como, dimens?es reduzidas e imunidade ?s interfer?ncias eletromagn?ticas, uma caracter?stica inerente ?s fibras ?pticas. Dentre as fibras, um tipo especial tem sido utilizado na constru??o de biochips SPR para an?lise de intera??es biomoleculares, as chamadas fibras ?pticas microestruturadas (Microstructured Optical Fibers ? MOFs). Estas fibras possuem caracter?sticas geom?tricas que permitem o controle e/ou a manipula??o da propaga??o luz. Altera??es na geometria destas fibras podem causar varia??es na propaga??o da luz, tornandoas interessantes a aplica??es que exploram a intera??o entre elas, biomol?culas e filmes finos met?licos. Este trabalho apresenta um modelo te?rico de biochip ?ptico constru?do a partir de fibras ?pticas microestruturadas em que a resson?ncia de pl?smons de superf?cie ? utilizada como forma de detec??o. O desempenho das configura??es propostas neste estudo ? comparado ao desempenho de configura??es obtidas a partir de fibras microestruturadas comerciais. Tamb?m s?o apresentados os resultados experimentais da metodologia de obten??o do perfil em ?D? utilizado como m?todo de detec??o externa a partir do lixamento da fibra.
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Desenvolvimento de um imunosensor pela t?cnica de resson?ncia de pl?smons de superf?cie para detec??o em tempo real de anticorpos anti - leishmania infantum / Development of an Immunosensor by the Surface Plasmon Resonance technique for real-time detection of anti-Leishmania infantum antibodies

Souto, D?nio Emanuel Pires 21 February 2012 (has links)
Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-19T13:03:29Z No. of bitstreams: 5 denio.pdf: 1745055 bytes, checksum: 531bb76e60dd34c17e7c27620ce5b5c0 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2110 bytes, checksum: b4c884761e4c6c296ab2179d378436d4 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-20T10:55:25Z (GMT) No. of bitstreams: 5 denio.pdf: 1745055 bytes, checksum: 531bb76e60dd34c17e7c27620ce5b5c0 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2110 bytes, checksum: b4c884761e4c6c296ab2179d378436d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T10:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 5 denio.pdf: 1745055 bytes, checksum: 531bb76e60dd34c17e7c27620ce5b5c0 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2110 bytes, checksum: b4c884761e4c6c296ab2179d378436d4 (MD5) Previous issue date: 2013-02-21 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / Neste trabalho, foi realizado o desenvolvimento de um imunosensor para detec??o de anticorpos anti-Leishmania infantum. O princ?pio de transdu??o foi a Resson?ncia de Pl?smons de Superf?cie (SPR) e o sensor foi produzido atrav?s da imobiliza??o covalente de ant?genos sol?veis de Leishmania infantum sobre Monocamada Auto-Organizada (SAM) do ?cido 11-Mercaptoundecan?ico (11-MUA) ativado pela mistura contendo 100,0 mmol.L-1 de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) e 150 mmol.L-1 de N-hidroxisuccinimida (NHS). Atrav?s das t?cnicas de Voltametria C?clica e Redu??o Dessortiva por Voltametria de Pulso Diferencial o processo de forma??o da SAM foi otimizado. Sob condi??es otimizadas, 1,0 mmol.L-1 da solu??o etan?lica de 11-MUA e 24 horas foram suficientes para a forma??o de uma SAM est?vel sobre a superf?cie de ouro. Para obten??o de informa??es complementares da SAM, foram realizados c?lculos da Cobertura de Superf?cie, Constante Diel?trica e Espessura do tiol adsorvido no substrato de ouro. Ap?s esta etapa, a adi??o de ant?genos sol?veis de L. infantum sobre a SAM foi acompanhada por SPR. As t?cnicas de Voltametria C?clica e Espectroscopia de Imped?ncia Eletroqu?mica foram usadas para caracterizar a imobiliza??o do ant?geno. Ap?s constru??o do imunosensor, foram adicionados em sua superf?cie soros caninos positivos para Leishmaniose Visceral, evidenciando varia??o significativa no ?ngulo de SPR, mostrando excelente sensibilidade da t?cnica para detec??o da intera??o ant?geno-anticorpo. Por outro lado, a adi??o dos soros negativos n?o foi acompanhada com resposta significativa, concluindo-se tamb?m que o imunosensor apresentou boa especificidade contra anticorpos anti-L. infatum. Portanto, neste trabalho foi desenvolvido com sucesso um sensor empregando SPR para detec??o em tempo real de anticorpos anti-L. infatum, apresentando grande perspectiva como sistema de sensoriamento da Leishmaniose Visceral em ?reas end?micas. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Qu?mica, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2012. / ABSTRACT In this work, the development of an immunosensor for detection of anti-Leishmania infantum antibodies was performed. The principle of transduction used was the Surface Plasmon Resonance (SPR) and the sensor was constructed by covalent immobilization of soluble antigens of Leishmania infantum on self-assembled monolayers (SAMs) of 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA) which was activated by the mixture 100.0 mmol.L-1 1-ethyl-3 (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) and 150 mmol.L-1 N-hidroxisuccinimide (NHS). Cyclic Voltammetry and Dessortive Reduction by Differential Pulse Voltammetry techniques were employed in monitoring of SAM formation. Under optimized conditions, 1.0 mmol.L-1 of the 11-MUA in ethanolic solution and 24 hours were sufficient for the formation of a stable SAM on the gold surface. To obtain further information about the SAM, the Surface Coverage, Dielectric Constant and Thickness of the thiol film adsorbed on gold substrate were performed. After this step, the addition of soluble antigens?of L.?infantum?on the?SAM?was monitored?by SPR. Cyclic Voltammetry and Electrochemical Impedance Spectroscopy techniques were employed in characterization of antigen immobilization. After construction of immunosensor, positive canine serum for Visceral Leishmaniasis were added on its surface showing significant variation in the SPR angle, indicating excellent sensitivity of the technique for?antigen-antibody interaction detection. On the other hand, the addition of negative serum was not accompanied with a significant response, demonstrating that the immunosensor shows excellent specificity against anti-L infantum antibodies. Therefore, this work shows a successfully development of a SPR sensor for anti-L. infatum antibodies detection in real time, showing a great perspective as a sensing system of Visceral Leishmaniasis in endemic regions.

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