Um sistema de análises químicas por injeção em fluxo foi desenvolvido e aplicado à determinação espectrofotométrica de baixas concentrações de sulfato em águas de chuva. O método explora a reação de deslocamento entre o ânion sulfato e o complexo dimetilsulfonazo (III) de bário, Ba-DMSA, com consequente formação do sal pouco solúvel BaSO4. A solução com o complexo Ba-DMSA apresenta alta absortividade molar a 656 nm, e uma diminuição pronunciada na absorbância ocorre na presença de sulfato. Desta forma, o sinal analítico é registrado como pico invertido proporcional à concentração de sulfato na amostra. A presença de altas concentrações de dimetilsulfóxido, DMSO, no reagente favorece a intensidade do sinal analítico, por coordenar as moléculas de água, melhorando a sensibilidade do método. A utilização do tensoativo dodecilsulfato de sódio, SDS, determina também uma melhoria considerável na sensibilidade analítica, pois sua presença no ambiente reacional altera as condições de supersaturação. A sensibilidade e seletividade do procedimento são melhoradas incluindo-se uma etapa de troca iônica em linha, com resina aniônica Dowex 1-X8, para concentração do sulfato e separação dos íons interferentes em potencial. O sistema proposto é robusto e fornece resultados precisos (d.p.r. < 0,01) com frequência analítica de 30 determinações por hora. O consumo de DMSA é de 0,17 \'mü\'mol por determinação. A curva analítica se apresenta linear até 2,0 mg L-1 SO42- e os limites de detecção e de quantificação foram estimados em 0,01 mg L-1 SO42- e 0,04 mg L-1 SO42-. / A flow injection system was developed and applied to the spectrophotometric determination of low concentrations of sulphate in rain waters. The method exploits the displacement reaction involving the sulphate anion and the barium dimethylsulfonazo (III) complex, Ba-DMSA, with consequent formation of the slightly soluble BaSO4 salt. As the Ba-DMSA solution is characterized by a high molar absorptivity at 656 nm, a pronounced absorbance lessening is observed in the presence of sulphate. The analytical signal is then recorded as an inverted peak proportional to the sulphate content in the sample. Presence of dimethylsulphoxide, DMSO, at high concentrations in the reaction medium leads to an enhancement of the analytical signals, coordinating water molecules, thus improving the sensitivity of the method. Addition of the surfactant sodium dodecylsulphate, SDS, results also in a pronounced improvement in sensitivity, as its presence in the reaction medium alters the supersaturation conditions. The sensitivity and selectivity of the method were improved by including an in-line ion exchange mini-column with the anionic resin Dowex 1-X8 into the manifold, for sulphate concentration and separation from potential interfering ions. The proposed system is robust and provides accurate results (R.S.D. <0.01) at an analytical frequency of 30 determinations per hour. About 0.17 \'mü\'mol DMSA are consumed per determination. The analytical curve is linear up to 2.0 mg L-1 SO42- and the detection and quantification limits were estimated as 0.01 mg L-1 SO42- and 0.04 mg L-1 SO42-.

A dissertação se situa no campo de pesquisa de métodos não invasivos de análise clínica, mais especificamente, de prognóstico da gravidade de insuficiência cardíaca, IC, com base em bioindicador presente no ar exalado por pacientes, em estudo no IncorHCFMUSP. O bioindicador mais relevante encontrado por GC-MS foi a acetona (propanona). Para a coleta do ar exalado desenvolveu-se dispositivo que compreende frasco borbulhador (impinger) com difusor, contendo 5 mL de água, imerso em banho de gelo e acoplado a saco plástico para definição de volume amostrado (7,6 L). A preservação de amostras deu-se por congelamento a -80ºC. Para a determinação do analito, escolheu-se método espectrofotométrico (474 nm) baseado na reação da acetona com salicilaldeído em meio básico, apresentando limite de detecção de 0,3 mg/L em fase líquida e 0,3 &#181;g/L em ar exalado. Foram realizados estudos de eficiência de coleta por geração de atmosfera controlada. Resultados iniciais obtidos com amostras coletadas de pacientes portadores de IC pelos colaboradores do Incor indicam a potencialidade do bioindicador e dos equipamentos e métodos desenvolvidos para acetona nesta dissertação. / The dissertation fits in the research field of noninvasive clinical analysis, more specifically, the prognosis of the severity of heart failure, HF, based on a biomarker found in the air exhaled by patients, in a study at InCor-HCFMUSP. The most relevant biomarker found by GC-MS was acetone (propanone). For the breath collection a device was developed which comprises a scrubber flask (impinger) with diffuser, containing 5 mL of water, immersed in an ice bath and attached to a plastic bag for delimitation of the sample volume (7,6 L). For the determination of acetone a spectrometric method (474 nm) was chosen based on a reaction of acetone with salicylaldehyde in alkaline medium, with detection limits of 0,3 mg/L in liquid phase and 0,3 &#181;g/L in breath. Preliminary studies made with samples collected from HF patients by the co-workers from InCor indicate the potential of the identified biomarker and the suitability of the equipment and methods developed in this dissertation for its analysis.

Neste trabalho, é proposto o desenvolvimento de instrumentação e procedimentos analíticos automáticos empregando fotometria em fase sólida para determinação de zinco em produtos farmacêuticos e água. Para implementação do procedimento analítico, todo o sistema foi acoplado a um computador através de uma interface eletrônica. Um software escrito em linguagem QuickBASIC 4.5 permite que o computador efetue o controle da adição das soluções da amostra e do eluente e faça aquisição de dados. O sistema de detecção é constituído de uma cela de fluxo contendo, um LED e um fotodiodo. A geometria da cela de fluxo possibilitava variar o comprimento do caminho óptico. O procedimento para determinação do zinco foi baseado na retenção do analito na fase sólida (TAN-C18), previamente inserida na cela de fluxo, seguido de uma etapa de eluição. Com os parâmetros analíticos otimizados obteve-se resposta linear na faixa de 0,05 a 0,85 mg L-1 (R=0,995), limite detecção de 9,3 \'mü\'g L-1, coeficiente de variação de 1,4% (n=10) e frequência de amostragem de 36 det h-1. O módulo de análise foi aplicado em amostras de produtos farmacêuticos e a exatidão dos resultados foi averiguada comparando com os resultados obtidos por espectrometria de emissão óptica com plasma acoplado indutivamente ICP-OES. Aplicando-se tratamento estatístico apropriado, observou-se que não havia diferença significativa ao nível de confiança de 95 %. Estes resultados comprovam a viabilidade do emprego de fotômetro de LED em fotometria em fase sólida / In this work, it is propose the instrumentation and automatic analytic procedures development using solid phase spectrophotometry for determination of zinc in pharmaceutical preparations and water. For analytic procedure implementation, the whole system was coupled to a computer through an electronic interface. A written software in language QuickBASIC 4.5 allows the computer makes the sample solutions addition control and of eluent and do data acquisition. The detection system is constituted of a flow cell contend, a LED and a photodiode. The flow cell geometry enabled vary the length of the optical path. The procedure for zinc determination was going based in analyte retention in the solid phase (TAN-C18), previously inserted in the flow cell, followed by an elution stage. With the optimized analytic parameters it btained lineal answer in the band of 0,05 to 0,85 mg L-1 (R=0,995), limit detection of 9,3 \'mü\'g L-1, variation coefficient of 1,4% (n=10) and sampling throughput of 36 det h-1. The analysis module was going applied in pharmaceutical preparations samples and the exactness of the results was going ascertained comparing with the results obtained for inductively coupled plasma optic emission spectrometry of with ICP- its. Applying appropriated statistical treatment, it observed that there wasn\'t significant difference to the reliable level of 95 %. These results prove photometer job viability of LED in photometry in solid phase

As hiperpigmentações da pele são devidas à abundante produção de melanina pelos melanócitos, sejam estes em número normal ou aumentado. Várias formulações cosméticas e medicamentosas têm sido produzidas nas formas de géis e cremes contendo hidroquinona como único princípio ativo, sendo de forma industrializada e manipulada. Conseqüentemente é necessário o desenvolvimento e validação de metodologias analíticas para determinações quantitativas da hidroquinona nos produtos comercializados a fim de ter métodos confiáveis, de baixo custo e de pouco impacto ambiental. Os objetivos da pesquisa foram caracterizar a hidroquinona matéria-prima para garantir seu uso nas formulações farmacêuticas bem como determiná-la quantitativamente em formulações cosméticas e medicamentos nas formas de géis e cremes. As metodologias propostas foram espectrofotometria derivada no UV e cromatografia líquida de alta eficiência. O método espectrofotométrico no UV derivado foi validado utilizando H2SO4 0,1 N como solvente, as leituras foram feitas a 302,0 nm na derivada de primeira ordem. O coeficiente de correlação foi de 0,9999; a média dos teores de hidroquinona nos géis e cremes foi de 101,7 e 97,6% respectivamente e as médias dos desvios padrões relativos de 0,839% para géis e 0,878% para cremes. A determinação pelo método cromatográfico, foi realizada utilizando uma coluna LiChrospher&#174; 100 RP-18 (5 &#181;m), fase móvel constituída por metanolágua (80:20 v/v), vazão de 1,0 mL/min e detecção UV a 289 nm. O coeficiente de correlação foi de 0,9999; a média dos teores de hidroquinona nos géis e cremes foi de 102,2 e 98,4% respectivamente e as médias dos desvios padrões relativos de 0,882% para géis e 1,252% para cremes. Os resultados das precisões e teores de hidroquinona foram tratados estatisticamente (testes de F e t respectivamente), e não se observou diferença significativa nos dois métodos propostos para um nível de confiança de 95%. / The excessive pigmentation of skin is due to abundant production of melanin by melanocytes located in the skin epidermal layers. Several cosmetic and pharmaceutical formulations had been industrialized as well as compounded in pharmacy such as gel and creams containing hydroquinone as a unique active ingredient. The quantitative determination of hydroquinones present in these formulations necessitates validated analytical methods that are reliable, economical and ecologically favorable. The objectives of this research were characterization of hydroquinone raw material to assure its use in pharmaceutical and cosmetic preparations as well as its quantitative determination in gel and cream formulations. A first derivative UV spectrophotometric and a high-performance liquid-chromatographic method are proposed. The UV first derivative spectrophotometric method was validated using H2SO4 0.1 N as solvent and absorptions were taken at 302.0 nm. The linearity data showed a correlation coefficient of 0.9999. The mean hydroquinone content of gels and creams were 101.7 and 97.6% with mean relative standard deviations of 0.839 and 0.878% respectively. The chromatographic method was validated using LiChrospher&#174;, 100 RP-18 (5 &#181;m) column, mobile phase composed of water:methanol (80:20 v/v), at a flow rate of 1.0 mL/min and UV detection at 289 nm. The linearity correlation coefficient was 0.9999. The mean hydroquinone content of gels and creams were 102.2 and 98.4% with mean relative standard deviations of 0.882 and 1.252% respectively. The precisions and hydroquinone content data were statistically analyzed (F and t tests), no significant difference was observed between results obtained by proposed methods at 95% confidence level.

Os \"peelings\" químicos são formulações esfoliantes utilizadas na terapêutica de queratoses actínicas, rugas, discromias pigmentares, acne vulgar e rosácea. A solução de Jessner (SJ) é amplamente usada como agente em peelings químicos. Na presente pesquisa foram empregadas formulações farmacêuticas de SJ como amostras para a determinação quantitativa simultânea das substâncias ativas. A solução alcoólica é composta de resorcinol (14%), ácido salicílico (14%) e ácido láctico (14%). Duas amostras de gel são compostas de resorcinol (30%) e ácido salicílico (20%), respectivamente. Foram desenvolvidos e validados métodos espectrofotométricos na primeira e segunda derivada no UV para a quantificação de ácido salicílico e resorcinol, respectivamente na SJ, utilizando etanol como branco e foram desenvolvidos métodos espectrofotométricos na primeira derivada no UV para a quantificação de resorcinol e ácido salicílico nas amostras em gel, utilizando ácido sulfúrico 0,1 N como branco. Quando o etanol foi utilizado como branco, as curvas de calibração foram lineares em uma faixa de concentração de 22,0 a 34,0 &#181;g/mL (resorcinol) e de 12,0 a 24,0 &#181;g/mL (ácidos salicílico), para os métodos na segunda e primeira derivada no UV (usando etanol como branco), ambos com coeficientes de correlação de 0,9999. Quando o ácido sulfúrico 0,1N foi utilizado como branco, as curvas de calibração foram lineares em uma faixa de concentração de 18,0 a 42,0 &#181;g/mL (resorcinol) e de 8,0 a 32,0 &#181;g/mL (ácido salicílico), para o método na primeira derivada no UV com coeficientes de correlação de 0,9999 e 0,9998 respectivamente. Os resultados nas amostras alcoólicas de SJ (amostras A e B) foram 104,4% de resorcinol (DPR 0,83%) e 103,2% de ácido salicílico (DPR 0,68%) enquanto que nas amostras em gel (amostras E e F) foram 101,9% de resorcinol (DPR 0,34%) e as amostras em gel C e D, 100,7% de ácido salicílico (DPR 0,28%). / Chemical peelings are exfoliating formulations used in the treatment of actinic keratosis, wrinkles, dyschromies, acne vulgaris and rosacea acne.The Jessner Solution (JS) sample is widely used as chemical peeling agent. In this research we selected a JS pharmaceutical preparation for simultaneous quantitative determination of the active components. The alcoholic solution sample is composed of resorcinol (14%), salicylic acid (14%) and lactic acid (14%); two gel samples are composed of resorcinol (30%) and salicylic acid (20%), respectively. First and second derivative UV spectrophotometric methods were developed and validated for quantitative determination of salicylic acid and resorcinol, respectively. In JS alcoholic solution, ethanol was used as background. A first derivative UV spectrophotometric method was developed for quantitative determination of resorcinol and salicylic acid in gel samples using 0.1N sulfuric acid as background. Calibration curves were linear within a concentration range from 22.0 to 34.0 &#181;g/mL (resorcinol) and from 12.0 to 24.0 &#181;g/mL (salicylic acid), for second and first derivative UV spectrophotometric method (ethanol as background) with a correlation coefficients of 0.9999 and 0.9999, respectively. Calibration curves were linear within a concentration range from 18,0 to 42,0 &#181;g/mL (resorcinol) and from 8.0 to 32.0 &#181;g/mL (salicylic acid), for first derivative UV spectrophotometric method (0.1N sulfuric acid as background) with correlation coefficients of 0.9999 and 0.9998, respectively. The alcoholic samples of JS (sample A and B) presented 104.4% of resorcinol (RSD 0.83%) and 103.2% of salicylic acid (RSD 0.68%) while the gel samples (sample E and F) presented 101.9% of resorcinol (RSD 0.34%) and gel sample C and D, 100.7% of salicylic acid (RSD 0.28%).

Acidez, sulfato e cloreto são constantemente relacionados ao potencial corrosivo do etanol hidratado combustível (EHC), pois mesmo em baixas concentrações podem induzir processos que danificam dutos de transporte e peças dos veículos. Em vista dessa problemática, as agências reguladoras estabeleceram limites máximos para estes constituintes a serem determinados por titulação, no caso da acidez, e por cromatografia de íons para cloreto e sulfato. Os procedimentos propostos no presente trabalho tiveram como objetivo apresentar alternativas de baixo custo, instrumentação simples, pouca influência do analista (automação das etapas) e baixa geração de efluentes. Para a avaliação da acidez, foi construído um titulador automático, explorando um algoritmo de procura binária em um sistema de análises químicas em fluxo baseado em multicomutação. Sob condições otimizadas, o sistema foi capaz de titular amostras de etanol diluídas a 50% (v/v), gerando cerca de 11,5 mL de efluente por determinação, com coeficiente de variação < 1,0% e frequência de análises > 10 h-1. Além disso, o sistema não necessitou de calibração, fazendo com que todas as etapas fossem realizadas automaticamente. Para as determinações de sulfato e de cloreto, foram montados módulos de análises baseados em fluxo-batelada com detecção espectrofotométrica. Os analitos foram determinados sem etapas de preparo de amostra. Para realizar a determinação indireta do sulfato, foi empregada a reação de deslocamento dos íons bário do complexo dimetilsulfonazo III de bário (DMS-Ba+), promovido pelos íons sulfato; para a determinação de cloreto, foi explorado o efeito dos íons cloreto na fotogeração (UV) de nanopartículas de prata (Ag-NPs). Para sulfato e cloreto, as faixas lineares de resposta, limites de detecção (95%) e coeficientes de variação foram: 0,1 - 1,5 mg L-1 e 0,05 - 0,8 mg L-1; 48 e 12 µg L-1 e 1,0% e 2,2%, respectivamente. Na determinação de sulfato e cloreto, as frequências de análises foram de 35 e 30 h-1, respectivamente; com geração de efluentes < 5 mL por determinação em ambos os procedimentos. Todos os procedimentos desenvolvidos atendem aos limites estabelecidos pela agência reguladora brasileira, e os resultados obtidos foram comparados com os procedimentos oficiais, não havendo diferença significativa entre métodos, ao nível de 95% de probabilidade / Acidity, sulfate and chloride are often related to the hydrous ethanol fuel (HEF) corrosive potential, as even at low concentrations they may induce processes deleterious to transportation ducts and vehycle components. Thus, the regulatory agencies established maximum limits for these constituents to be determined by titration in the case of acidity and by chromatography of ions for chloride and sulfate. The procedures herein proposed aimed at to present alternatives of low cost, simple instrumentation, little influence of the analyst (automation of the stages) and low generation of effluents. For acidity evaluation, an automatic titrator exploiting a binary search algorithm in a analytical flow system based on multicommutation was built up. Under optimized conditions, the system was able of titrating ethanol samples diluted to 50% (v/v), generating about 11.5 mL of effluent per determination, with coefficient of variation <1.0% and sample throughput > 10 h-1. Moreover, the flow system did not require calibration, and all steps were automatically performed. For sulfate and chloride determinations, flow-batch analytical systems with spectrophotometric detection were set up, allowing the analytes to be determined without sample preparation steps. For the indirect determination of sulfate, the reaction of displacement of the barium ions from its dimethylsulfonazo III complex (DMS-Ba+) promoted by the sulfate ions was used; for the determination of chloride, the effect of this analyte on the photo-generation (UV) of silver nanoparticles (Ag-NPs) was exploited. For sulfate and chloride, linear response ranges, detection limits (95% confidence level) and coefficients of variation were: 0.1 - 1.5 and 0.05 - 0.8 mg L-1; 48 and 12 ?g L-1, and 1.0 and 2.2%, respectively. In the sulfate and chloride determinations, the analytical frequency were 35 and 30 h-1, respectively, with effluents generation of < 5 mL per determination for both procedures. The developed procedures meet the limits established by the Brazilian regulatory agency, and results obtained were compared with the official procedures, and no significant differences between methods at the 95% probability level were found

O presente trabalho apresenta o desenvolvimento de um método de obtenção e a caracterização de filtros ópticos de interferência de banda passante variável que, constituídos por refletores dielétricos multicamadas de filmes finos intercalados por cavidades de Fabry- Perot não planares com espessuras linearmente variáveis, apresentam a propriedade do deslocamento linear da transmitância máxima espectral em função da posição, isto é, um Filtro de Interferência Variável (FIV). Este método apresenta novas e abrangentes possibilidades de confecção de filtros ópticos de interferência variável: lineares ou em outras formas desejadas, de comprimento de onda de corte variável (passa baixa ou alta) e filtros de densidade neutra variável, através da deposição de metais. A primeira etapa do trabalho foi o projeto e a construção de um filtro óptico convencional, de um comprimento de onda central, com camadas homogêneas. A etapa seguinte foi, com base na teoria espectrométrica, promover a variação das espessuras das camadas em um perfil inclinado e linear. Para tanto, de acordo com os requisitos de projeto, foram feitas adaptações em uma evaporadora por e-Beam (elétron-Beam), acrescentando um obliturador mecânico especialmente projetado, ajustando parâmetros de técnicas de deposição e caracterizando o perfil inclinado de um filme depositado para ajustar o obliturador. E, ao final destas etapas, foi projetado e construído o FIV especificado. Também é descrita uma possível aplicação do FIV: um dispositivo multicanal espectral para análise ambiental, e, dentre muitas, outras podem ser mencionadas: sistemas Lab-on-Chip, biosensores, detectores chip-sized, espectrometria de fluorescência on-chip, detectores de deslocamento de comprimento de onda, sistemas de interrogação e etc. / This work presents the development of a method to obtain and characterize a variable interference optical bandpass filter, made up of a number of thin films forming dielectrical reflectors intercalated by non flat Fabry-Perot cavities whose thickness variates linearly. These filters present the propriety of a linear variation in the maximum spectral transmittance as a function of the position in the filter, for this reason this is called Variable Interference Filter (VIF). This method allows of manufacturing linear interference filters or any other function disered, with variable cut wavelength (low or high pass) and variable neutral density filters by means of metallic depositions. The first step in this work was to design and built a conventional filter, with homogeneous layers and a fixed central wavelength. The following step was, using spectrometric theory basis, introduce the variation in the thickness of the layers in a linear inclined outline. Accordingly with the design requirements, it was made some adaptations in an e-beam evaporator (electron-beam), adding a mechanical obliterator adjusted with series of depositions and characterizations of a single layers in order to find a linearly inclined outline. In the end of this step it was designed and built the specified VIF. It is also described a possible application of this VIF: a multichannel spectral device for environmental analysis. Between many applications, others can be cited, such as: Lab-on-Chip systems, biosensors chip-sized detectors, on-chip fluorescence spectrometry, shift wavelength detectors, interrogation systems, etc.

Métodos espectrofotométricos em condições estacionária e em fluxo para determinação de Zn(II) foram desenvolvidos com base na formação do complexo de Zn(II) com di-2-piridil cetona saliciloilhidrazona (DPKSH), em meio de etanol-água 50% (V/V) e pH 4,5. Os complexos de Zn(II) com DPKSH foram caracterizados utilizando diferentes técnicas e as respectivas constantes de formação (&#946;l 1,07x105 e &#946;2 1,05x1010) e absortividades molares, em 376 nm, (&#949;l 1,1x104 e &#949;2 4,5x104) determinadas. Os parâmetros para o método em condição estacionária foram otimizados e, a seguir, construiu-se a respectiva curva analítica. Obteve-se uma faixa de linearidade (lei de Beer) de (0,0293 a 2,01)x10-5mol. L-1, absortividade molar média (em 376 nm, em meio de etanol-água 50% (V/V) e pH 4,5) de 4,83x104 mol-1.L.cm-1 e limite de detecção igual a 1,24x10-7 mol.L-1 (8,11 &#181;g.L-1). Avaliou-se a interferência de 43 íons. Alguns destes que apresentaram interferência positiva são comuns em preparações farmacêuticas e amostras biológicas, porém tal interferência pode ser facilmente eliminada. Aplicou-se o método desenvolvido à preparações farmacêuticas e amostras biológicas. Comparando-se os resultados com a técnica de absorção atômica com chama, obteve-se grande concordância. O método espectrofotométrico em fluxo foi desenvolvido a partir de alguns parâmetros previamente estudados e estabelecidos. Construiu-se a curva analítica e obteve-se uma faixa de linearidade de (0,332 a 7,04)x 10-5 mol.L-1 e limite de detecção 7,46x10-7 mol.L-1 (48,8 &#181;g.L-1). Aplicou-se o método em preparações farmacêuticas e comparando-se os resultados com a técnica de absorção atômica com chama observou-se grande concordância. Com a finalidade de aplicar o método em fluxo a amostras biológicas, foi acoplada ao sistema uma coluna com resina de troca iônica no lugar da alça de amostragem. Após avaliar alguns parâmetros, construiu-se a curva analítica que apresentou uma faixa de linearidade de (0,126 a 3,15)x10-5 mol.L-1 e limite de detecção 2,12x10-7 mol.L-1 (13,9 &#181;g.L-1). / Spectrophotometric methods in stationary and flow conditions were developed for Zn(II) determination based on the complex formation of Zn(II) with di-2-pyridyl ketone salicyloylhydrazona (DPKSH), in ethanol-water 50% (V/V) medium and pH 4.5. The complexes Zn(II)/DPKSH were characterized by several methods and the respective formation constants (&#946;1 1.07x105 and &#946;2 1.05x1010) and molar absorptivities, in 376 nm, (&#949;1 1.1x104 and &#949;2 4.5x104) were determinated. Parameters for the stationary method were optimized and, the analytical curve was obtained. A linear behavior (Beer\'s law) was verified in the range (0.0293 and 2.01)x10-5mol.L-1, the medium molar absorptivity (in 376 nm, ethanol-water 50% (V/V) medium and pH 4.5) and the detection limit are 4.83x104 mol-1.L.cm-1 and 1.24x10-7 mol.L-1 (8.11 ppb), respectively. The interference of 43 ions was evaluated. Some of them that showed present a positive interference are commom in pharmaceutical formulations and biological samples, but such interference could be easily eliminated. The developed method was applied to pharmaceutical formulations and biological samples. The results complied well with atomic absorption (flame atomization) technique. A spectrophotometric method in flow was developed upon some previously established parameters. The analytical curve was determined and a linear range was verified between (0.332 to 7.04)x10-5 mol.L-1, and the detection limit 7.46x10-7 mol.L-1 ( 48.8 &#181;g.L-1). This method was applied to pharmaceutical formulations and the results showed a good agreement with atomic absorption (flame atomization) technique. Aiming at employing the flow method to biological samples an ion-exchange resin column was adapted substituting the sampling handle. After evaluating some parameters the analytical curve was determined and it displayed a linear range of (0.126 to 3.15)x10-5 mol.L-1, and detection limit 2.12x10-7 mol.L-1 (13.9 &#181;g.L-1).

Made available in DSpace on 2017-07-21T18:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Janio Santos.pdf: 2918457 bytes, checksum: 102357b433cd6ca1bff688e4810640bc (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Rooibos (Aspalathus linearis) is a leguminous shrub of African origin, which attention has been dedicated to its most important technological product: Aqueous extract (tea).Rooibos tea has a complex chemical composition with various quantities phenolic compoundsin addition to high levels of aspalathin, a dihydrochalcone found only in rooibos. Therefore, the objective of this study is to evaluate the effects of time and temperature of extraction the phenolic compounds and functional in vitro properties of aqueous extracts of fermented organic Aspalathus linearis. Initially been prepared by an aqueous 22 extracts seven experiment design red rooibos for evaluation of the linear and combined effects of temperature and extraction time. By means of spectrophotometric methods primarily extracts were evaluated for the effect of time and temperature of extraction the content of phenolic compounds, flavonoids, flavonols, hydrolyzable condensed tannins and ortho-phenolic antioxidant activity against the DPPH and ABTS radical, reducing capability iron and reducing total capacity. Posteriorly it was performed for identification and quantification phenolic compounds 19 by high-performance liquid chromatography. The third step was to evaluate the inhibitory activity of α-amylase and α-glucosidase in vitro and hemolytic profile of aqueous extracts of rooibos red in human erythrocytes. The principal component analysis (PCA) was used to associate the chemical composition, antioxidant activity, reducing capacity, and inhibition of enzymes (α-amylase and α-glucosidase). In a general way the extract that was subjected to the extraction process in the higher temperature of the design (85 °C) showed the highest levels of total phenolics, flavonoids, flavonols, hydrolyzable condensed tannins and ortho-phenolic and antioxidant activity against the DPPH and ABTS, as the reducing capacity of iron and reducing total capacity, with little influence of time.The antioxidant activity and reducing capacity of rooibos extracts were shown to be correlated with the content of phenolic compounds, flavonoids, flavonols and ortho-diphenols. The quercetin contents, isoquercitrin, and rutin and were correlated with ABTS, DPPH, FRAP and total capacity reduction.Thus, we can say that such compounds are in vitro directly linked functionality presented by the aqueous extract of rooibos. In relation the antimicrobial activity of the extracts at concentrations from 7.81 to 1000 mg L-1 were not been effective in inhibiting the growth of tested microorganisms.As regards the inhibitory activity of α-amylase and α-glucosidase in general, all analyzed samples showed similar values extract to inhibit 50% of enzyme activity (IC50).The tea extract at 80 °C for 10 min was used for hemolysis test in which it was observed that there was beneficial interaction with the erythrocytes, reducing the occurrence of erythrocyte hemolysis in the cell.Is possible to observe a decrease in haemolytic activity with increased concentration of rooibos extract, this characteristic indicates that inhibition of plasma hemoglobin release is dependent on the concentration of rooibos extract contained in the medium. However, overall, the extraction temperature is the mainpositive factor that influences these variables in organic red rooibos. / Rooibos (Aspalathus linearis) é um arbusto leguminoso de origem africana, cuja atenção tem sido voltada ao seu produtotecnológico mais importante: Extrato aquoso (chá).O chá de rooibos apresenta uma composição química complexa com quantidades de vários compostos fenólicos, além de níveis elevados de aspalatina, uma dihidrocalcona encontrada apenas em rooibos. De tal modo o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do tempo e temperatura na extração dos compostos fenólicos e propriedades funcionais in vitro de extratos aquosos de Aspalathus linearis orgânicofermentado. Inicialmente foram preparados por meio de um delineamento de experimento 22 sete extratos aquosos de rooibos vermelho para avaliação dos efeitos lineares e combinados da temperatura e tempo de extração. Por meio de métodos espectrofotométricos primeiramente os extratos foram avaliados quanto ao efeito do tempo e da temperatura de extração no teor de compostos fenólicos totais, flavonoides, flavonóis, taninos condensados hidrolisáveis e orto-difenólicos, atividade antioxidante frente aos radicais DPPH e ABTS, capacidade redutora do ferro e capacidade redutora total. Posteriormente à identificação e quantificação de 19 compostos fenólicos foram realizadas por meio de cromatografia liquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (LC-ESI-MS/MS). O terceiro passo foi avaliar atividade inibitória das enzimas α-amilase e α-glucosidasein vitro e o perfil hemolítico dos extratos aquosos de rooibos vermelho em eritrócitos humanos. A análise de componentes principais (PCA) foi usada para associar a composição química, atividade antioxidante, capacidade redutora, e inibição das enzimas (α-amilase e α-glucosidase). De modo geral o extrato que foi submetido ao processo de extração na maior temperatura do delineamento (85 °C) apresentou os maiores teores de compostos fenólicos totais, flavonoidestotai, flavonóis totais, taninos condensados hidrolisáveis e orto-difenólicose na atividade antioxidante frente aos radicais DPPH e ABTS, como na capacidade redutora do ferro e capacidade redutora total, com pouca influência do tempo. A atividade antioxidante e capacidade redutora dos extratos de rooibos mostraram-se correlacionadas com o teor de compostos fenólicos totais, flavonoides, flavonóis e orto-difenólicos.Os teores de quercetina, isoquercitrina, e rutina e foram correlacionados com ABTS, FRAP e capacidade redutora total. Assim, é possível afirmar que tais compostos quantificados estão diretamente ligados às funcionalidades in vitro apresentadas pelo extrato aquoso de rooibos. Em relação a atividade antimicrobiana, os extratos nas concentrações de 7,81 a 1000 µg mL-1 não foram eficazes em inibir o crescimento dos micro-organismos testados.No que diz respeito à atividade inibitória das enzimas α-amilase e α-glucosidase, todas as amostras analisadas mostraram valores similares de extrato para inibir 50% da atividade enzimática (CI50). O chá extraído a 80°C por 10 min foi usado para o teste de hemólise no qual foi constatado que ocorreu uma interação benéfica com os eritrócitos, diminuindo a ocorrência de hemólise nas células eritrocitárias. Observa-se uma diminuição da atividade hemolítica com o aumento da concentração do extrato de rooibos, tal característica aponta que a inibição da liberação de hemoglobina no plasma é dependente da concentração de extrato de rooibos contido no meio. Conclui-se de modo global, que a temperatura de extração é o fator de maior influência positiva nessas variáveis em rooibos fermentado orgânico.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:21:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonio Setsuo Sakamoto Junior.pdf: 2373735 bytes, checksum: b35b9e1a804cb1e6e80c6137dada9016 (MD5) Previous issue date: 2015-12-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Thin ceramic laminates have been widely requested by patients because it’s a reliable conservative aesthetic procedure, stable and presents adequate longevity. It is known that the color change of the cement below these thin restorations may result inappropriate final color. Thus, the purpose of this in vitro study was to evaluate the color agreement between pressable lithium disilicate ceramics with tryin pastes and corresponding resin cements, determination of the degree of conversion of resin cements using FT-Raman spectroscopic and color stability after artificial accelerated aging (AAA) for 300 hours. Eighty-four ceramic discs (0.3 mm, 0.5 mm, 1.0 mm thick) were prepared (IPS e.maxPress HT A2 – Ivoclar Vivadent) to simulate veneers. Evaluation the baseline color was done in the CIE-L*a*b* color space with reflectance spectrophotometer (control group). The try-in pastes were applied into the interlayer of the ceramic (simulation of selection color procedure) above silicon transparent matrix (0.1 mm thick) and the color complex were measured using a spectrophotometer (n=7), with no substrate. The same ceramic discs were used for cementation procedure with Variolink II (only base),after storage in distilled water, protected from light, at 37ºC for 24 hours, the specimens were mensured the color and submitted to FT-Raman spectroscopy to determinate the degree of conversion (DC). After that, the specimens were AAA for 300 hours and measured by spectrophotometer to calculate ΔE. Two-way ANOVA was used to analyze the data. Tukey’s post hoc for multiple comparisons and Spearman correlation test were performed (α = 0.05). There was no agreement between the try-in with resin cements, L* and b* values increased, increasing the value/opacity,yellowish of the complex. All groups exhibited values of ΔE>3.3, except resin color A3 group (1.0 mm ceramic thickness). Ceramic thicknesses (0.3 mm and 0.5 mm) did not affect the DC compared to the control (p> 0.05). Thus, DC was influenced by the color of cement, where the over saturated color showed higher conversion rate, DC decreased when ceramic disc thickness increased. No correlation between DC and ΔE was observed. / A modalidade indireta de restauração denominada laminado cerâmico, vem sendo vastamente solicitada pelos pacientes, por se tratar de um procedimento confiável, estável, conservador, estético e apresenta longevidade aceitável. Sabe-se que a alteração de cor do cimento localizado abaixo destas restaurações delgadas pode influenciar negativamente no aspecto estético final. Desta forma, o propósito do presente estudo in vitro foi avaliar a concordância da coloração da pasta de prova e seu respectivo cimento resinoso, verificar o grau de conversão deste pelo método Micro-Raman e sua estabilidade de cor após envelhecimento artificial acelerado (EAA) por 300 horas. Foram confeccionados 84 discos cerâmicos com sistema IPS e.maxPress HT (Ivoclar Vivadent) na cor A2 com 3 espessuras (0.3 mm, 0.5 mm, 1.0 mm) cuja coloração foi mensurada com espectrofotometria de refletância (grupo controle). Em seguida, foi realizada a simulação da seleção da cor do cimento Variolink II (try in Transparente, Opaco, A3) e mensurada a cor do conjunto nas coordenadas CIEL* a*b*. Depois foi realizada a cimentação adesiva (mesmos discos cerâmicos utilizados com try in) com três cores de cimentos resinosos (Base: Transparente, Opaco, A3), sobre uma matriz de silicone transparente com cavidade de espessura de 0,1 mm (n=7), sem qualquer substrato. Após armazenamento com água destilada, protegido da luz, em estufa a 37ºC por 24h, os corpos de prova (cp) foram submetidos novamente ao teste de espectrofotometria e ao teste grau de conversão (GC) pelo método FT-Raman. Em seguida, foram submetidos ao EAA por 300 horas e mensurada a coloração para verificar se houve alteração (ΔE). Os dados coletados foram submetidos à ANOVA 2 fatores, seguido pelo pós-teste de Tukey e pelo teste de correlação de Spearman (α=0,05). Não houve concordância entre o try in e respectivo cimento, os valores de L* e b* aumentaram, tornando mais luminosa/opaca e amarelada. Todos grupos apresentaram valores superiores de ΔE=3,3, exceto o grupo do cimento cor A3 (cerâmica espessura de 1,0 mm) e as espessuras cerâmicas de 0,3 e 0,5 mm não influenciaram o GC, onde apresentaram valores sem diferença significativa (p>0,05) comparada ao grupo controle. Assim, o GC foi influenciado pela cor do cimento, onde o mais saturado apresentou maior taxa de conversão, ao passo que o valor de GC diminuiu quando a espessura do disco cerâmico interposto aumentou. Não houve relação entre o GC e ΔE.