El presente trabajo se realizó con el fin de evaluar la actividad antibacteriana in vitro del aceite esencial de hojas de Aloysia triphylla P. “cedrón” de la región de Tacna, frente a las bacterias patógenas Escherichia coli ATCC 25922 y Staphylococcus aureus ATCC 25923. Se determinó la sensibilidad antibacteriana de Escherichia coli y Staphylococcus aureus, por el método de disco difusión, por el método de dilución en medio líquido y difusión en agar. Los resultados indican que el aceite esencial, contiene actividad antibacteriana significativa frente a Escherichia coli y moderada frente a Staphylococcus aureus. Así, el estudio reveló la CMI de Escherichia coli siendo de 3,701 mg/mL mientras que para Staphylococcus aureus fue 15,167 mg/mL (dosis cinco veces mayor). También se precisó la CMB de Escherichia coli siendo de 4,186 mg/mL, mientras que para Staphylococcus aureus fue 16,259 mg/mL (dosis cuatro veces mayor). Palabras claves: Sensibilidad antibacteriana, CMI, CMB, Escherichia coli ATTC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923.