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Caracterização das amilases produzidas por isolados de rizóbios e mutantes de Bacillus sp. provenientes de solos amazônicos

Oliveira, Cassiane Minelli de 24 June 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-11T13:55:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cassiane Minelli.pdf: 1637307 bytes, checksum: b5227c9445b1a0b3f8dcc8fcef9bcfd3 (MD5) Previous issue date: 2013-06-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / One of the biggest successes of Brazilian agriculture is the Pro-Alcohol, whose base of support is the culture of sugar cane, which leaves a lapse of activity in the offseason. In view of this, several alchool industries have been investing in other cultures, where the starch is the primary source for the alcohol production. The pursuit of amylase in thermotolerant Bacillus sp. And rhizobia from Amazonian soils is a strategy to be used for the bio-industries to reduce or stop importing them. Mutation was made from two Bacillus sp. containing amylases by exposure to ultraviolet light. Also tested were 40 strains of rhizobia for the presence of thermophilic amylases. Enzyme assays were performed to check for amylase activity at different temperatures, times, pHs, thermal shock and thermal stability. The Bacillus sp. ITAAM 023M mutant showed higher amylolyse than mutant ITAAM 010M. The amylases of the two Bacillus sp mutants and rhizobias proved quite diverse as their characteristics, indicating they are different from each other. The temperature with higher amylase activity of the mutants ITAAM 010M and ITAAM 023M was 100 ˚C. Amylase from the mutant ITAAM 010M showed greater activity in pH 4.5, and from the ITAAM 023M at pH 7.5. Their amylases showed high sensitivity to thermal shock. Amylase from mutant ITAAM 010M showed high thermostability at temperature of 90 ˚C. The amylase from ITAAM 023M, at a temperature of 80˚C. The highest activity shown by ITAAM 010M amylase was 1.6 U / ml and the ITAAM 023M, 1.5 U / mL. From the 40 rhizobia, 17 grew well in culture medium containing starch, 19 produced amylolytic halo, and 11 proved to be thermophiles. Rhizobia INPA INPA R001 and INPA R020 showed the highest rates of amylolyse. Their amylase showed greater activity at 90˚C. Amylase of INPA R001 showed higher activity at 100˚C, and from INPA R020, 30˚C. Amylase from INPA R001 showed greater activity at pH 4.5 and from INPA R020, at pH 7.5. Their amylases showed high sensitivity to thermal shock. Amylase from INPA R020 showed higher thermostability at 90 °C and from INPA R001 at 100˚C. The higher activity shown by amylase of rhizobia INPA R001 was 1.6 U/mL, and from INPA R020, 7.5 U/mL / Um dos maiores sucessos da agricultura brasileira é o Pró-Álcool, cuja base de sustentação é a cultura da cana-de-açúcar, que deixa um lapso de atividade na entressafra. Em vista disso, diversas usinas vêm investindo em outras culturas, onde o amido é a fonte primária para a produção do álcool. A busca de amilases termotolerantes em Bacillus sp. e em rizóbios de solos da Amazônia é uma estratégia a ser usada para que as bioindústrias reduzam ou parem de importá-las. Foi feita a mutação de dois Bacillus sp. contendo amilases com exposição à luz ultravioleta. Foram testadas também, 40 estirpes de rizóbio quanto à presença de amilases termotolerantes. Foram feitos ensaios enzimáticos para a verificação de atividade amilolítica em diferentes temperaturas, tempos, pHs, choque térmico e termoestabilidade. O mutante de Bacillus sp. ITAAM 023M mostrou maior índice de amilolise do que o ITAAM 010M. As amilases dos dois mutantes de Bacillus sp e dos rizóbios mostraram-se bem diversificadas quanto às suas características, indicando serem diferentes umas das outras. A temperatura com maior atividade das amilases dos mutantes ITAAM 010M e ITAAM 023M foi 100˚C. A amilase do mutante ITAAM 010M mostrou maior atividade em 4,5, e a do ITAAM 023M em pH 7,5. Suas amilases mostraram alta sensibilidade ao choque térmico. A amilase do mutante ITAAM 010M mostrou maior termoestabilidade na temperatura de 90˚C. A do ITAAM 023M, na temperatura de 80˚C. A maior atividade mostrada pela amilase do ITAAM 010M foi de 1,6 U/mL e a do ITAAM 023M, 1,5 U/mL. Dos 40 rizóbios, 17 cresceram bem em meio de cultura contendo amido, 19 produziram halo amilolítico e 11 se mostraram termofílicos. Os rizóbios INPA R001 e INPA R020 mostraram os maiores índices de amilolise. Suas amilases mostraram maior atividade a 90˚C. A amilase do INPA R001 mostrou maior atividade a 100˚C, e a do INPA R020 a 30˚C. A amilase do INPA R001 mostrou maior atividade no pH 4,5 e a do INPA R020 no pH 7,5. Suas amilases mostraram alta sensibilidade ao choque térmico. A amilase do INPA R020 mostrou maior termoestabilidade a 90ºC e a do INPA R001 a 100˚C. A maior atividade amilolítica mostrada pela amilase do rizóbio INPA R001 foi de 1,6 U/mL e a do rizóbio INPA R020, 7,5 U/mL
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Caracterização físico-química, química e bioquímica do suco tropical de manga (Mangifera indica L.) não adoçado obtido pelo processo hot fill. / Caracterization physicochemical, chemical e biochemistry of the tropical non sweetened mango (Mangifera indica L.) juice by hot fill method.

Oliveira, Aurelice Barbosa de January 2006 (has links)
OLIVEIRA, Aurelice Barbosa de. Caracterização físico-química, química e bioquímica do suco tropical de manga (Mangifera indica L.) não adoçado obtido pelo processo hot fill. 2006. 110 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Tecnologia de Alimentos, Fortaleza-Ce, 2006 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-01T12:11:36Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_aboliveira.pdf: 464268 bytes, checksum: dfae11a628100cfbc737e4e4df8790a0 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-01T12:13:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_aboliveira.pdf: 464268 bytes, checksum: dfae11a628100cfbc737e4e4df8790a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-01T12:13:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_aboliveira.pdf: 464268 bytes, checksum: dfae11a628100cfbc737e4e4df8790a0 (MD5) Previous issue date: 2006 / The present work aimed to evaluate the physicochemical and chemical parameters and polyphenoloxidase (PPO) and peroxidase (POD) activity on the processing stages and shelf life of the tropical non sweetened mango juice preserved by hot fill method. The samples were removed afterwards the pulp discharged, homogenation, pasteurization and the product in the end of the processing and after 55, 110 and 165 days of storage (28ºC ± 2ºC). Total titratable acidity, pH, total soluble solids (ºBrix), reducing and total sugar, ascorbic acid, carotenoids, anthocyanins and colour (L*, a* e b*) were analysed. The results showed that pH, total titratable acidity, total sugar content and carotenoids not have a statistical significance at a level of 5% along the storage time. It was observed a higher PPO activity during the studied processing stages and in the shelf life of the product, keeping oscillating in a general manner. The POD showed an increasing activity during the processing stages and keeping stable along the storage. In conclusion the physicochemical and chemical parameters for this product were within the limits established by the Brazilian legislation and the thermal treatment was not efficient to inactivate these enzymes probably due to the possible presence of isoforms with different thermo stability grades and/or isotypes renaturation. / O presente trabalho teve como objetivo avaliar os parâmetros físico-químicos e químicos e a atividade da polifenoloxidase (PPO) e peroxidase (POD) nas etapas de processamento e durante a vida de prateleira do suco tropical de manga não adoçado envasado pelo processo hot fill. Foram retiradas amostras após as etapas de despolpa, homogeneização e pasteurização e do produto logo após o processamento e aos 55, 110 e 165 dias de armazenamento (28ºC ± 2ºC). A acidez total titulável, pH, sólidos solúveis totais (ºBrix), açúcares redutores e totais, ácido ascórbico, carotenóides, antocianinas e cor (L*, a* e b*) foram analisados. Os resultados apresentaram que o pH, a acidez total titulável, o conteúdo de açúcar total e carotenóides não apresentaram significância estatística ao nível de 5% durante o período de armazenagem. Foi observada uma maior atividade da PPO durante as etapas de processamento estudadas bem como na vida de prateleira do produto, de um modo geral mantendo-se oscilante. A POD apresentou atividade crescente nas etapas de processamento e em seguida mantendo-se constante durante o armazenamento. Conclui-se que os parâmetros físico-químicos e químicos para esse produto encontram-se dentro dos limites estabelecidos pela Legislação Brasileira e o tratamento térmico não se apresentou eficiente para a inativação dessas enzimas, devido possivelmente a presença de isoformas com diferentes graus de termoestabilidade e/ou renaturação de isotipos.
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CaracterizaÃÃo fÃsico-quÃmica, quÃmica e bioquÃmica do suco tropical de manga (Mangifera indica L.) nÃo adoÃado obtido pelo processo hot fill. / Caracterization physicochemical, chemical e biochemistry of the tropical non sweetened mango (Mangifera indica L.) juice by hot fill method.

Aurelice Barbosa de Oliveira 12 June 2006 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / O presente trabalho teve como objetivo avaliar os parÃmetros fÃsico-quÃmicos e quÃmicos e a atividade da polifenoloxidase (PPO) e peroxidase (POD) nas etapas de processamento e durante a vida de prateleira do suco tropical de manga nÃo adoÃado envasado pelo processo hot fill. Foram retiradas amostras apÃs as etapas de despolpa, homogeneizaÃÃo e pasteurizaÃÃo e do produto logo apÃs o processamento e aos 55, 110 e 165 dias de armazenamento (28ÂC Â 2ÂC). A acidez total titulÃvel, pH, sÃlidos solÃveis totais (ÂBrix), aÃÃcares redutores e totais, Ãcido ascÃrbico, carotenÃides, antocianinas e cor (L*, a* e b*) foram analisados. Os resultados apresentaram que o pH, a acidez total titulÃvel, o conteÃdo de aÃÃcar total e carotenÃides nÃo apresentaram significÃncia estatÃstica ao nÃvel de 5% durante o perÃodo de armazenagem. Foi observada uma maior atividade da PPO durante as etapas de processamento estudadas bem como na vida de prateleira do produto, de um modo geral mantendo-se oscilante. A POD apresentou atividade crescente nas etapas de processamento e em seguida mantendo-se constante durante o armazenamento. Conclui-se que os parÃmetros fÃsico-quÃmicos e quÃmicos para esse produto encontram-se dentro dos limites estabelecidos pela LegislaÃÃo Brasileira e o tratamento tÃrmico nÃo se apresentou eficiente para a inativaÃÃo dessas enzimas, devido possivelmente a presenÃa de isoformas com diferentes graus de termoestabilidade e/ou renaturaÃÃo de isotipos. / O presente trabalho teve como objetivo avaliar os parÃmetros fÃsico-quÃmicos e quÃmicos e a atividade da polifenoloxidase (PPO) e peroxidase (POD) nas etapas de processamento e durante a vida de prateleira do suco tropical de manga nÃo adoÃado envasado pelo processo hot fill. Foram retiradas amostras apÃs as etapas de despolpa, homogeneizaÃÃo e pasteurizaÃÃo e do produto logo apÃs o processamento e aos 55, 110 e 165 dias de armazenamento (28ÂC Â 2ÂC). A acidez total titulÃvel, pH, sÃlidos solÃveis totais (ÂBrix), aÃÃcares redutores e totais, Ãcido ascÃrbico, carotenÃides, antocianinas e cor (L*, a* e b*) foram analisados. Os resultados apresentaram que o pH, a acidez total titulÃvel, o conteÃdo de aÃÃcar total e carotenÃides nÃo apresentaram significÃncia estatÃstica ao nÃvel de 5% durante o perÃodo de armazenagem. Foi observada uma maior atividade da PPO durante as etapas de processamento estudadas bem como na vida de prateleira do produto, de um modo geral mantendo-se oscilante. A POD apresentou atividade crescente nas etapas de processamento e em seguida mantendo-se constante durante o armazenamento. Conclui-se que os parÃmetros fÃsico-quÃmicos e quÃmicos para esse produto encontram-se dentro dos limites estabelecidos pela LegislaÃÃo Brasileira e o tratamento tÃrmico nÃo se apresentou eficiente para a inativaÃÃo dessas enzimas, devido possivelmente a presenÃa de isoformas com diferentes graus de termoestabilidade e/ou renaturaÃÃo de isotipos. / The present work aimed to evaluate the physicochemical and chemical parameters and polyphenoloxidase (PPO) and peroxidase (POD) activity on the processing stages and shelf life of the tropical non sweetened mango juice preserved by hot fill method. The samples were removed afterwards the pulp discharged, homogenation, pasteurization and the product in the end of the processing and after 55, 110 and 165 days of storage (28ÂC Â 2ÂC). Total titratable acidity, pH, total soluble solids (ÂBrix), reducing and total sugar, ascorbic acid, carotenoids, anthocyanins and colour (L*, a* e b*) were analysed. The results showed that pH, total titratable acidity, total sugar content and carotenoids not have a statistical significance at a level of 5% along the storage time. It was observed a higher PPO activity during the studied processing stages and in the shelf life of the product, keeping oscillating in a general manner. The POD showed an increasing activity during the processing stages and keeping stable along the storage. In conclusion the physicochemical and chemical parameters for this product were within the limits established by the Brazilian legislation and the thermal treatment was not efficient to inactivate these enzymes probably due to the possible presence of isoforms with different thermo stability grades and/or isotypes renaturation. / The present work aimed to evaluate the physicochemical and chemical parameters and polyphenoloxidase (PPO) and peroxidase (POD) activity on the processing stages and shelf life of the tropical non sweetened mango juice preserved by hot fill method. The samples were removed afterwards the pulp discharged, homogenation, pasteurization and the product in the end of the processing and after 55, 110 and 165 days of storage (28ÂC Â 2ÂC). Total titratable acidity, pH, total soluble solids (ÂBrix), reducing and total sugar, ascorbic acid, carotenoids, anthocyanins and colour (L*, a* e b*) were analysed. The results showed that pH, total titratable acidity, total sugar content and carotenoids not have a statistical significance at a level of 5% along the storage time. It was observed a higher PPO activity during the studied processing stages and in the shelf life of the product, keeping oscillating in a general manner. The POD showed an increasing activity during the processing stages and keeping stable along the storage. In conclusion the physicochemical and chemical parameters for this product were within the limits established by the Brazilian legislation and the thermal treatment was not efficient to inactivate these enzymes probably due to the possible presence of isoforms with different thermo stability grades and/or isotypes renaturation.
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CaracterizaÃÃo fÃsico-quÃmica, quÃmica e bioquÃmica do suco tropical de manga (Mangifera indica L.) nÃo adoÃado obtido pelo processo hot fill. / Caracterization physicochemical, chemical and biochemistry of the tropical non sweetened mango (Mangifera indica L.) juice by hot fill method.

Aurelice Barbosa de Oliveira 12 June 2006 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / O presente trabalho teve como objetivo avaliar os parÃmetros fÃsico-quÃmicos e quÃmicos e a atividade da polifenoloxidase (PPO) e peroxidase (POD) nas etapas de processamento e durante a vida de prateleira do suco tropical de manga nÃo adoÃado envasado pelo processo hot fill. Foram retiradas amostras apÃs as etapas de despolpa, homogeneizaÃÃo e pasteurizaÃÃo e do produto logo apÃs o processamento e aos 55, 110 e 165 dias de armazenamento (28ÂC Â 2ÂC). A acidez total titulÃvel, pH, sÃlidos solÃveis totais (ÂBrix), aÃÃcares redutores e totais, Ãcido ascÃrbico, carotenÃides, antocianinas e cor (L*, a* e b*) foram analisados. Os resultados apresentaram que o pH, a acidez total titulÃvel, o conteÃdo de aÃÃcar total e carotenÃides nÃo apresentaram significÃncia estatÃstica ao nÃvel de 5% durante o perÃodo de armazenagem. Foi observada uma maior atividade da PPO durante as etapas de processamento estudadas bem como na vida de prateleira do produto, de um modo geral mantendo-se oscilante. A POD apresentou atividade crescente nas etapas de processamento e em seguida mantendo-se constante durante o armazenamento. Conclui-se que os parÃmetros fÃsico-quÃmicos e quÃmicos para esse produto encontram-se dentro dos limites estabelecidos pela LegislaÃÃo Brasileira e o tratamento tÃrmico nÃo se apresentou eficiente para a inativaÃÃo dessas enzimas, devido possivelmente a presenÃa de isoformas com diferentes graus de termoestabilidade e/ou renaturaÃÃo de isotipos. / The present work aimed to evaluate the physicochemical and chemical parameters and polyphenoloxidase (PPO) and peroxidase (POD) activity on the processing stages and shelf life of the tropical non sweetened mango juice preserved by hot fill method. The samples were removed afterwards the pulp discharged, homogenation, pasteurization and the product in the end of the processing and after 55, 110 and 165 days of storage (28ÂC Â 2ÂC). Total titratable acidity, pH, total soluble solids (ÂBrix), reducing and total sugar, ascorbic acid, carotenoids, anthocyanins and colour (L*, a* e b*) were analysed. The results showed that pH, total titratable acidity, total sugar content and carotenoids not have a statistical significance at a level of 5% along the storage time. It was observed a higher PPO activity during the studied processing stages and in the shelf life of the product, keeping oscillating in a general manner. The POD showed an increasing activity during the processing stages and keeping stable along the storage. In conclusion the physicochemical and chemical parameters for this product were within the limits established by the Brazilian legislation and the thermal treatment was not efficient to inactivate these enzymes probably due to the possible presence of isoforms with different thermo stability grades and/or isotypes renaturation.

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