This Master's Thesis is part of the Training Line of Research, Knowledge and Professional Development of the Graduate Program in Education of the Federal University of Santa Maria / RS. The research aimed to study and understand the continuing self(trans)formation of teachers and students by the web of school educational practice with the popular pedagogy possible in the context. It was necessary to infer the continuing self(trans)formation as an articulator of the context of students and teachers daily; understand the self(trans)formation experience of Circles, as a contribution to the education of the teachers in the context of a public school of Basic Education to build a more meaningful and humane education for their subjects and to investigate how continuing self(trans)formation, intertwined with popular pedagogy, can contribute to educational practice with a bias of significant changes to students. To conduct the survey, the concepts of continuing education were intertwined (Freire, 2011a), teacher training (IMBERNÓN, 2009), held along the career path and life experiences, especially when it occurs in times of training conducted with focus on everyday school. Along with the continuing self(trans)formation education (HENZ, 2014; 2015), the work brings the contributions of Freire s popular pedagogy (2014; 2013; 2011) as an opportunity to public school and a more meaningful education to learners and educators/teachers, so it is a learning space and experience with the seriousness of the profession and the joy of learning constantly. The chosen methodological approach was qualitative, supported by Ghedin & Franco (2011); André (2001); Duarte (2002); Michel (2009), based on Investigative-training Dialogic Circles (HENZ, 2014), (FREITAS, 2015), (HENZ; FREITAS, 2015) that emphasize opportunities for dialogue and self(trans)formation teacher training with emphasis and proximity in the daily of the students involved with the community and the reality of the subject. The methodology is characterized by a case study (YIN, 2005) since it favors a particular context and investigates intensively the particularities with characteristics of research participant (BRANDÃO, 2001), as the researcher has immersion and participation in the context of research and the work issues of needs perceived by the group watching and analyzed daily. The research took place through five Dialogic Circles Investigative-training and another devolutive Circle and research validation with the collective of teachers of the State School of Basic Education Antônio João Zandoná of Barra Funda (RS), which, since 2003, works with a methodology of generating themes from the perspective of popular pedagogy of Paulo Freire (2013). The research caused an intertwining between the continuing self(trans)formation and popular education pedagogy to build links between the school educational practice and the context of students with a view to the possibility of renewal and enhancement of public school as a place to learn, grow, politicized, humanize and be happy. The hermeneutic analysis (GADAMER, 1998; FLICKINGER, 2014, KRONBAUER, 2014) noted that the dialogue as a research methodology has much to contribute to the self(trans)formation times of educators, co-authors of the research, from everyday issues and disquieting that emerged from the circles, leading them to the realization that the self(trans)formation may contribute to novel-viable in building a more problematical, dialogue and human education. / Esta Dissertação de Mestrado insere-se na Linha de Pesquisa Formação, Saberes e Desenvolvimento Profissional do Programa de Pós-graduação em Educação da Universidade Federal de Santa Maria/RS. A investigação se propôs a estudar e compreender a auto(trans)formação permanente de professores e estudantes pelo entrelaçamento da práxis educativa escolar com a pedagogia popular possível no seu contexto. Foi necessário depreender a auto(trans)formação permanente como articulador do contexto dos estudantes e do cotidiano do professor; compreender a experiência auto(trans)formativa dos Círculos, como contribuição à formação de professores no contexto de uma escola pública de Educação Básica para a construção de uma educação mais significativa e humana para seus sujeitos e investigar como a auto(trans)formação permanente, entrelaçada à pedagogia popular, pode contribuir com práxis educativas com um viés de transformações significativas aos estudantes. Para realizar a pesquisa, foram entrelaçados os conceitos de formação permanente (FREIRE, 2011a), formação docente (IMBERNÓN, 2009), realizada ao longo da trajetória profissional e experiências de vida, em especial quando ocorrida nos momentos de formação realizados com foco no cotidiano escolar. Juntamente com a auto(trans)formação permanente (HENZ, 2014; 2015), o trabalho traz as contribuições da pedagogia popular de Freire (2014; 2013; 2011) como uma possibilidade para a escola pública e uma educação mais significativa para os educandos/educandas e educadores/educadoras, de modo que seja um espaço de aprendizagens e experiências com a seriedade da profissão e a alegria de aprender constantemente. A abordagem metodológica escolhida foi a qualitativa, fundamentada por Ghedin & Franco (2011); André (2001); Duarte (2002); Michel (2009), embasada nos Círculos Dialógicos Investigativo-formativos (HENZ, 2014), (FREITAS, 2015), (HENZ; FREITAS, 2015) que privilegiam espaços de diálogo e auto(trans)formação docente com ênfase e proximidade no cotidiano dos estudantes, envolvidos com a comunidade e com a realidade dos sujeitos. A metodologia caracteriza-se por um estudo de caso (YIN, 2005) visto que privilegia um contexto específico e busca investigar as particularidades de forma intensa, com características de pesquisa-participante (BRANDÃO, 2001), já que a pesquisadora possui imersão e participação no contexto de pesquisa e a problemática de trabalho parte de necessidades percebidas pela observação do grupo e do cotidiano analisado. A realização da pesquisa deu-se por meio de cinco Círculos Dialógicos Investigativo-formativos e mais um Círculo de devolutiva e validação da pesquisa com o coletivo de educadoras da escola Estadual de Educação Básica Antônio João Zandoná, de Barra Funda (RS), que, desde 2003, trabalha com uma metodologia de temas geradores, sob a ótica da pedagogia popular de Paulo Freire (2013). A pesquisa provocou um entrelaçamento entre a auto(trans)formação permanente e a pedagogia de educação popular para construir aproximações entre a práxis educativa escolar e o contexto dos estudantes com vistas à possibilidade de renovação e valorização da escola pública como um lugar para aprender, crescer, politizar-se, humanizar-se e ser feliz. A análise hermenêutica (GADAMER, 1998; FLICKINGER, 2014, KRONBAUER, 2014) observou que o diálogo como metodologia de pesquisa tem muito a contribuir para os momentos de auto(trans)formação das educadoras, coautoras da pesquisa, a partir de temáticas cotidianas e inquietantes que emergiram dos Círculos, levando-as à conscientização de que a auto(trans)formação pode contribuir para inéditos-viáveis na construção de uma educação mais problematizadora, dialógica e humana.

Submitted by Camila Girondi (camila.girondi@gmail.com) on 2018-07-03T20:30:17Z No. of bitstreams: 1 Dissertação 28.06 COM FICHA CATALOGRÀFICA.pdf: 1652288 bytes, checksum: 2ff0f9722f6563cc30aaacbdd2bd4b81 (MD5) / Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2018-07-10T19:06:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 girondi_cm_me_sjc.pdf: 1652288 bytes, checksum: 2ff0f9722f6563cc30aaacbdd2bd4b81 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T19:06:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 girondi_cm_me_sjc.pdf: 1652288 bytes, checksum: 2ff0f9722f6563cc30aaacbdd2bd4b81 (MD5) Previous issue date: 2018-05-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As nanofibras (NF) podem ser sintetizadas por meio de eletrofiação, um método simples que permite incorporação de fármacos em biopolímeros que apresentam a vantagem de serem liberados de forma gradual. Policaprolactona (PCL) apresenta a vantagem de poder ser eletrofiada permitindo a incorporação de fármacos. Os ácidos retinoicos são fármacos empregados no tratamento de osteossarcoma, mas, apresentam efeitos colaterais. O ATRA (all-trans-retinoic-acid) é o mais comum entre os retinoides. Os objetivos deste estudo foram: sintetizar e caracterizar NF, incorporar o fármaco a elas e verificar a liberação ao meio de cultura; realizar testes de citoxicidade e genotoxicidade tais como: crescimento, integridade, viabilidade e micronúcleo de células MG63 tratadas com NF incorporada com ATRA e analisar a secreção das citocinas pró inflamatórias: IL-1β, IL-6 e TNF-α por meio do teste ELISA. As NF sintetizadas por meio da eletrofiação foram caracterizadas morfologicamente e bioquimicamente por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e estudo do espectro de infravermelho da transformada de Fourrier (FTIR): Os testes in vitro foram realizados utilizando uma linhagem de células imortalizadas de osteossarcoma, MG63. Os ensaios incluídos nesse estudo foram divididos em grupos compostos por: [C (controle puro), ATRA (controle positivo), NF (controle negativo) e NF + ATRA (grupo experimental).] Em todos os grupos foram realizados testes de viabilidade celular (MTT), micronúcleo e ELISA sob os tempos de 3, 7 e 14 dias. A liberação do fármaco através do sistema de NF+ATRA foi comprovada pelo FTIR. Os demais resultados encontrados foram avaliados através do teste ANOVA one-way, no qual o método apresentou-se eficiente, mostrando diferença estatística de p=0,00, sendo signficante para todos os períodos de tempo nos testes de MTT e MN, além de ser verificada a secreção de citocinas proinflamatórias IL-1β e IL-6, comprovando os efeitos citotóxicos e genotoxicos sob células MG63 mostrando a efetividade da técnica. Podendo ser uma alternativa para o tratamento. / Nanofibers (NF) can be synthesized by electro-spinning, a simple method that allows incorporation of drugs into biopolymers that have the advantage of being released gradually. Polycaprolactone (PCL) has the advantage that it can be electrophied allowing the incorporation of drugs. Retinoic acids are drugs used in the treatment of osteosarcoma, but have side effects. ATRA (all-trans-retinoicacid) is the most common retinoid. The objectives of this study were: to synthesize and characterize NF, to incorporate the drug to them and to verify the release to the culture medium; perform cytotoxicity and genotoxicity tests such as: growth, integrity, viability and micronucleus of N63-treated NF-treated cells with ATRA and to analyze the secretion of pro-inflammatory cytokines: IL-1β, IL-6 and TNFα by the ELISA . The NF synthesized by electrophilation were characterized morphologically and biochemically by scanning electron microscopy (SEM) and Fourrier Transform Infrared Spectrum (FTIR) study: In vitro tests were performed using an immortalized osteosarcoma cell line, MG63. The trials included in this study were divided into groups composed of: C (pure control), ATRA (positive control), NF (negative control) and NF + ATRA (experimental group). All groups were tested for cell viability (MTT), micronucleus and ELISA under the times of 3, 7 and 14 days. Release of the drug through the NF + ATRA system was confirmed by FTIR. The other results were evaluated using the oneway ANOVA test, in which the method was efficient, showing a statistical difference of p = 0.00, being significant for all time periods in the MTT and MN tests, besides the secretion of proinflammatory cytokines IL-1β and IL-6, proving the cytotoxic and genotoxic effects under MG63 cells, showing the effectiveness of the technique. It may be an alternative to treatment

Submitted by Késia Melo (kesia_maximiano@yahoo.com.br) on 2018-04-11T19:51:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação versão final.doc: 862208 bytes, checksum: 48a01aa794c913f196579d65f60ef66d (MD5) / Rejected by Satie Tagara (satie@marilia.unesp.br), reason: Falta o resumo em inglês. on 2018-04-13T13:14:32Z (GMT) / Submitted by Késia Melo (kesia_maximiano@yahoo.com.br) on 2018-04-20T18:51:30Z No. of bitstreams: 1 Dissertação versão final.doc: 863744 bytes, checksum: 21683daa4fbf31448954936579e331a0 (MD5) / Rejected by Satie Tagara (satie@marilia.unesp.br), reason: - Falta a folha de aprovação, elemento obrigatório. - As assinaturas dos membros componentes da banca são opcionais. on 2018-04-23T13:41:40Z (GMT) / Submitted by Késia Melo (kesia_maximiano@yahoo.com.br) on 2018-04-25T19:31:56Z No. of bitstreams: 2 Dissertação versão final.doc: 863744 bytes, checksum: 21683daa4fbf31448954936579e331a0 (MD5) Dissertação versão final.doc: 1267712 bytes, checksum: c4180352f1fd3ae38920c8e120fe0f68 (MD5) / Rejected by Satie Tagara (satie@marilia.unesp.br), reason: Para enviar o arquivo contendo sua dissertação ou tese é necessário que: - o arquivo esteja no formato Portable Document Format (PDF); - o arquivo não esteja protegido; - o trabalho deve ser enviado completo em um arquivo apenas; - o texto do arquivo PDF submetido ao Repositório deve ser idêntico à versão impressa e ser a versão final do trabalho, incluindo as modificações realizadas após a defesa; - a folha de aprovação é um elemento obrigatório, constituído, dentre outras informações, dos nomes dos membros da banca examinadora. As assinaturas são opcionais. Qualquer dúvida, favor entrar em contato com a Biblioteca da FFC/STATI, na sexta-feira. on 2018-04-25T20:30:52Z (GMT) / Submitted by Késia Melo (kesia_maximiano@yahoo.com.br) on 2018-04-25T21:31:31Z No. of bitstreams: 1 Dissertação versão final.pdf: 1433683 bytes, checksum: 5a434e97a316f690746809bb1078e5a2 (MD5) / Rejected by Satie Tagara (satie@marilia.unesp.br), reason: Substituir o atestado pela folha de aprovação (elemento obrigatório em trabalhos acadêmicos). Estou enviando via e-mail um modelo da folha de aprovação, como referência. on 2018-04-27T13:17:34Z (GMT) / Submitted by Késia Melo (kesia_maximiano@yahoo.com.br) on 2018-05-24T18:27:40Z No. of bitstreams: 1 Enviar.pdf: 1439631 bytes, checksum: 48cfe1be6f78247b7ad7417f9546ca3e (MD5) / Approved for entry into archive by Satie Tagara (satie@marilia.unesp.br) on 2018-05-24T19:09:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 melo_kmm_me_mar.pdf: 1439631 bytes, checksum: 48cfe1be6f78247b7ad7417f9546ca3e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T19:09:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 melo_kmm_me_mar.pdf: 1439631 bytes, checksum: 48cfe1be6f78247b7ad7417f9546ca3e (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Esta pesquisa teve como objetivo central a compreensão do modo pelo qual as pessoas trans têm se apropriado de espaços online de interação a fim de fomentar debates políticos, e tecer redes de solidariedade e sociabilidade, e de que forma essas interlocuções repercutem na formação de uma consciência política em torno dos direitos dessas pessoas. Para tal, parto da investigação da proliferação desses espaços, tomando como ponto de partida um grupo da plataforma Facebook, (mas não permanecendo apenas nele), visto não somente o quantitativo de membros no grupo, mas, principalmente, as temáticas frequentemente discutidas e a participação ativa de um elevado número de participantes nas discussões. Utilizo-me da etnografia multissituada como aporte teóricometodológico, especialmente no que diz respeito ao entrecruzamento entre as interações on e offline, tendo em vista que o acesso a novas possibilidades tecnológicas e a novos espaços de discussão, associada a transformações sociais e políticas tendem a modificar a forma com que as pessoas trans experienciam os sentidos atribuídos ao ser e se tornar pessoa trans, e a buscar alternativas de enfrentamento em relação aos mecanismos que garantem a delimitação de espaços, dinâmicas e direitos. Desse modo, ao buscar analisar os discursos que são acionados a partir das discussões nesses espaços e a forma com que eles marcam espaços offline de interação, utilizo-me do referencial teórico Queer, e dos estudos feministas, além do estudo sócio antropológico sobre mídias digitais. / This research aimed to understand the way in which trans people have appropriated online spaces of interaction in order to foment political debates, and to create networks of solidarity and sociability, and in what way these interlocutions have repercussions in the formation of a political awareness of the rights of these people. To do so, I proceed from the investigation of the proliferation of these spaces, taking as a starting point a group of the Facebook platform, (but not remaining only in it), seen not only the number of members in the group, but mainly the topics often discussed and the active participation of a large number of participants in the discussions. I use multi-situational ethnography as a theoretical and methodological contribution, especially in relation to the interlinking between on and offline interactions, given that access to new technological possibilities and new spaces of discussion, associated with social and political transformations tend to to change the way in which trans people experience the meanings attributed to being and become a trans person, and to seek alternatives to coping with the mechanisms that guarantee the delimitation of spaces, dynamics and rights. Thus, in seeking to analyze the discourses that are triggered from the discussions in these spaces and the way in which they mark offline spaces of interaction, I use Queer's theoretical framework and feminist studies, as well as the anthropological socio-digital study on digital media.

Este estudo discute as transformações corporais realizadas por mulheres trans a partir das suas narrativas, coletadas através de entrevistas semi-estruturadas e complementadas pela observação participante realizada em seus diferentes espaços de sociabilidade. Agrega também análise documental e pesquisa bibliográfica, com o objetivo de contextualizar e localizar histórica e socialmente o objeto da pesquisa. Fizeram parte deste estudo: travestis, mulheres transexuais, bombadeiras, cirurgiões plásticos e a equipe de saúde do ambulatório trans de um hospital universitário da cidade do Rio de Janeiro.O processo de investigação desdobrou-se em três diferentes níveis: análise dos discursos contidos nos dispositivos legais, políticas de saúde voltadas para as pessoas trans, materiais informativos, técnicos e educativos; análise das narrativas de travestis e mulheres transexuais em seus itinerários de reconstrução corporal; e análise de saberes e práticas de bombadeiras, cirurgiões plásticos e profissionais de saúde, suas concepções sobre a relação corpo e gênero e sua percepção de risco e cuidados com a saúde. Os dados coletados foram sistematizados e interpretados à luz da análise de conteúdo temática, privilegiando as narrativas dos sujeitos sobre suas experiências, saberes e práticas, comparando-os aos resultados da revisão de literatura e ao previsto nos dispositivos legais que normatizam o direito das mulheres trans à saúde.Os resultados demonstram que as mulheres trans investigadas começam a estranhar seus corpos, gostos e desejos ainda na infância e que dois fatos parecem indispensáveis para a decisão em modificar o corpo: a emergência e aceitação da identidade trans e o acesso à informação sobre técnicas, substâncias e pessoas que podem ajudá-las a fazer um corpo de mulher. As minhas interlocutoras demonstraram conhecer os riscos do uso do silicone industrial e hormônios na construção clandestina do corpo, mas também me fizeram constatar que é a situação financeira de cada uma que define as formas seguras ou não de modificação corporal. O conjunto de normativas, através das leis, resoluções e portarias que, de certa forma, anunciam uma política de saúde para as mulheres trans, entende de forma diferenciada e reducionista as identidades trans, localizando travestis e transexuais em diferentes alternativas de cuidado à saúde, muitas vezes, centrando as travestis nas estratégias de prevenção das DST-AIDS e as mulheres transexuais no acesso à cirurgia de transgenitalização, sem que seja proposto, ou melhor, efetivados serviços e práticas de modificação corporal no SUS. Essa conformação das políticas, sistemas e serviços de saúde, acaba por recrudescer a recorrência das mulheres trans aos serviços das bombadeiras, fato que aumenta os riscos à saúde dessas pessoas. Mesmo para as mulheres transexuais cadastradas no processo transexualizador, o foco do atendimento é a construção da genitália, ficando a modificação corporal (implante de próteses mamária e/ou glúteos, depilação a laser, lipoescultura, rinoplastia e feminização da face) para quando possível. Estas mulheres esperam que o sistema de saúde compreenda sua necessidade de modificação corporal não como uma questão meramente de estética, mas como uma questão de saúde pública.

O objetivo deste estudo foi analisar a vulnerabilidade programática, social e individual para a infecção por HIV em mulheres trans. Para esse fim, realizaram-se quatro estudos. No primeiro estudo, a partir da análise crítica da escala de Masculinidade e Feminilidade (M) da versão brasileira da Escala de Personalidade de Comrey (CPS), recuperou-se o tratamento histórico que a psicologia feminista deu às ideias de sexo e gênero e seus desdobramentos. Além disso, apontou-se para uma concepção de gênero autodeterminada, não essencialista, pluralista e não patológica. Por fim, analisou-se como o CPS é mantido como medida psicológica válida no contexto brasileiro em paralelo, contraditoriamente, com a defesa da igualdade de gênero. O segundo estudo avaliou a prevalência de HIV em mulheres trans do sul do brasil que buscam cirúrgicas de redesignação genital e fatores associados. O terceiro, buscou conhecer as demandas e barreiras no acesso a serviços de saúde relativos ao HIV e específicos para pessoas trans em dois estados do Brasil - Rio Grande do Sul e São Paulo -, que iniciaram de forma pioneira o atendimento a essa população. Foram investigadas, ainda, as experiências de discriminação no contexto de saúde que impactavam o acesso à saúde em geral. Por fim, o quarto estudo, avaliou a eficácia de uma intervenção online multidimensional (educacional, afetiva e comportamental) para mudar as atitudes dos profissionais de saúde em relação a população LGBT. Encontrou-se que a psicologia brasileira precisa aderir a uma visão inclusiva da diversidade de gênero, que a prevalência de HIV em mulheres trans é alta e associada ao trabalho sexual, que há barreiras no seu acesso à saúde e, que o preconceito dos profissionais de saúde é alto, mas que intervenções para reduzi-lo são efetivas. Apontam-se diretrizes para psicologia reduzir a vulnerabilidade da população trans. / The aim of this study was to analyze the programmatic, social and individual vulnerability to HIV infection among trans women. For this aim, four studies were done. In the first study, a critical literature review of the Masculinity and Femininity (M) scale of the Brazilian version of Comrey Personality Scale (CPS) recovered the historical treatment that feminist psychology gave the sex and gender ideas and their developments. In addition, the studied pointed to a self-determined, not essentialist, pluralistic and not pathological gender conception. Finally, it was examined how the CPS is kept as valid psychological measure in the Brazilian context in parallel, paradoxically, to the defense of gender equality. The second study assessed the prevalence of HIV and associated factors in trans women from southern Brazil who seek sex reassignment surgery. The third study sought to evaluate the demands and barriers in access to health services related to HIV and specific to trans people in two states in Brazil - Rio Grande do Sul and São Paulo - that started in a pioneering way the care of this population. It also investigated the experiences of discrimination in the health context that impacted access to health care in general. Finally, the fourth study assessed the effectiveness of a multidimensional (educational, affective and behavioral) web-based intervention program to change Brazilian health care practitioners’ attitudes toward the LGBT population. It was found that the Brazilian psychology must adhere to a comprehensive view of gender diversity, that the prevalence of HIV in trans women is high and associated with sex work, that there are barriers in the healthcare access and that prejudice among health professionals is high, but, interventions to reduce it are effective. We point to guidelines for psychology to reduce the vulnerability of trans population.

Nous nous concentrons sur la reproduction visuelle de la « femme » dans le quadrinhos en tant que référence de la période créatif et innovante de la littérature visuelle au Brésil au travers du manga. Cette thèse étudie le fait que la « femme » en tant que personnage principal peut être vu comme un simple critère esthétique pour un regard masculin érotique. Cependant, nous trouvons également dans ces caractéristiques un contrepoids, puisque dans ce référentiel érotique, ces personnages féminins sont devenus un exemple de liberté personnelle d´indépendance et d´autonomie au Brésil. Nous analysons de manière entrelaçé l´immigration au Brésil et au Japon, la représentation visuelle féminin en quadrinhos, manga et manga-inspirés quadrinhos, le fandom et les contradictions féminines. / The visual reproduction of the "woman" in quadrinhos marks a creative and innovative period of the visual literature in Brazil concerning its hybridization with manga. This thesis concerns the fact that this "woman" can be seen as a simple aesthetic criterion for an erotic male gaze. However, we argue that this characteristic becomes a counterweight for women´s personal freedom, independence and autonomy in Brazil. We analyse it through a carnivalization which mark the immigration of Japanese to Brazil and of Brazilian Japanese to Japan with the female visual representation in quadrinhos, manga and manga-inspired quadrinhos, the fandom and feminine contradictions.

O SL trans-splicing (do inglês, spliced leader trans-splicing) catalisado pelo spliceossomo em Trypanosoma brucei é responsável pelo processamento dos pré-mRNAs policistrônicos em mRNAs maduros. Esta maquinaria é associada a partir de pequenas partículas ribonucleoproteicas nucleares (snRNPs) U1, U2, U4/U6 e U5 constituídas de pequenos RNAs nucleares (snRNAs), um complexo canônico de sete proteínas Sm (SmB, SmD3, SmD1, SmD2, SmE, SmF e SmG) e fatores proteicos específicos. O núcleo de proteínas Sm de T. brucei apresenta variações com funções desconhecidas, como a substituição do heterodímero SmD3/SmB por Sm16,5K/Sm15K na snRNP U2, e de SmD3 por SSm4 na snRNP U4. Na primeira parte deste trabalho, investigou-se a interação destes diferentes complexos Sm recombinantes com os snRNAs U2, U4 e U5 obtidos por transcrição in vitro. Todos os complexos apresentaram alta afinidade pelo snRNA cognato. Observou-se, ainda, que apenas o núcleo Sm que contém Sm16,5K/Sm15K associado ao snRNA U2 interage com alta afinidade com U2A/U2B. Adicionalmente, foi obtida a estrutura cristalográfica de U2A/U2B de T. brucei, que revela uma organização similar àquela já descrita para ortólogas de Homo sapiens. Entretanto, há um desvio de pelo menos 6 Å no ponto médio da alça carregada positivamente no domínio RRM de U2B para a acomodação do snRNA U2. Além disso, observou-se uma longa hélice-α adicional na extremidade C-terminal de U2A. A análise dos três núcleos Sm de T. brucei a partir da combinação de modelagem molecular e espalhamento de raios-X a baixo ângulo revela estruturas de barril-β altamente torcido com interior carregado positivamente para interação com snRNAs. A principal diferença entre as estruturas encontra-se nas extremidades C- e N-terminal dos variantes de proteínas Sm, possivelmente para interação com U2A no braço 1 do spliceossomo, no caso de Sm15K/Sm16,K, e com U5-220K e U5-200K no corpo do spliceossomo, no caso de SSm4. Na segunda parte deste trabalho, a expressão homóloga da proteína U5-200K de T. brucei completa e do produto truncado no seu cassete helicase/ATPase/Sec63 N-terminal levou à copurificação de um subcomplexo de snRNP U5 composto por U5-220K, U5-116K, U5-40K e U5-Cwc21, sendo que a proteína recombinante completa ainda copurificou as proteínas Sm. Experimentos de imunolocalização mostraram que a proteína U5-200K truncada não é direcionada ao núcleo, como é o caso da proteína completa. As células que expressam a proteína truncada apresentaram um defeito de crescimento significativo, e os processamentos de pré-mRNA por cis- e SL trans-splicing foram ligeiramente afetados, já que a proteína truncada não entra no núcleo, onde deveria exercer sua atividade. Os resultados apresentados indicam a formação de um subcomplexo de snRNP U5 ainda no citoplasma, sendo que as proteínas Sm devem ser um sinal para o seu transporte nuclear mediado por importina-β. Em leveduras, a proteína Aar2 substitui U5-200K no citoplasma, regulando assim a biogênese de snRNP U5, porém esta proteína não foi identificada em T. brucei. Os resultados apresentados neste trabalho contribuem como o primeiro estudo estrutural de proteínas spliceossomais de um parasita do homem e também com novas informações sobre a biogênese das partículas ribonucleoproteicas U2 e U5 de T. brucei. / The spliced-leader (SL) trans-splicing catalyzed by the spliceosome in Trypanosoma brucei is responsible for processing polycistronic pre-mRNAs into mature mRNAs. The spliceosome machinery is assembled by small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs) U1, U2, U4/U6 and U5 that are composed by small nuclear RNAs (snRNAs), a canonical complex of Sm proteins (SmB, SmD3, SmD1, SmD2, SmE, SmF, SmG) and specific factors. The Sm core peculiarly varies in T. brucei, where SmD3/SmB are replaced by Sm16.5K/Sm15K in U2 snRNP and SmD3 is substituted by SSm4 in U4 snRNP. In the first part of this thesis, we investigated the interaction of the different recombinant Sm cores with U2, U4 and U5 snRNAs obtained by in vitro transcription. All the protein complexes bind the cognate snRNA with high affinity. Only the Sm core that contains Sm16.5K/Sm15K associated with U2 snRNA interacts with the recombinant U2A/U2B subcomplex. Additionally, the crystallographic structure of T. brucei U2A/U2B was obtained, showing an overall organization similar to the one observed in the human counterpart. However, we observed a 6 Å deviation in the medium point of a positively charged turn in the RRM motif of U2B to accommodate U2 snRNA. Besides, a long α -helix was observed in the C-terminal region of U2A. Structural analysis of Sm core variations in T. brucei was proceeded using molecular modelling techniques associated with small angle X-ray scattering. The quaternary structure models show seven Sm proteins as β-barrels with positively charged interior for cognate snRNA interaction. The main difference among these Sm core structures resides in the C- and N-terminal regions of the variant proteins, probably enabling the interaction of Sm15K/Sm16,5K with U2A in the spliceosomes arm 1, and the association of SSm4 with U5-220K and U5-200K in the spliceosomes body. In the second part of this thesis, homologous expression of full-length and N-terminally truncated U5-200K from T. brucei led to the copurification of a U5 snRNP subcomplex containing U5-220K, U5-116K, U5-40K and U5-Cwc21. The full-length U5-200K construct also copurified Sm proteins. Immunolocalization experiments showed that the truncated U5-200K protein is not directed to the nucleus as is the case for the full-length protein. Cells that expressed the truncated protein showed a significant growth defect and the pre-mRNA processing by cis- and SL trans-splicing was negatively affected since the truncated protein did not enter the nucleus where it should be active. The results suggest that a subcomplex of U5 snRNP begins to be assembled in the cytoplasm and the Sm proteins may be the signal for the nuclear transport mediated by β-importin. In yeast, Aar2 replaces U5-200K in the cytoplasm in another regulation step. However, Aar2 has not been identified in T. brucei. The results presented here contribute with the first structural study of spliceosomal proteins of a human parasite and give new insights into the biogenesis of U2 and U5 snRNPs in T. brucei.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os cones de guta-percha usados em endodontia, compostos de poli (1,4-trans-isopreno), ZnO e/ou BaSO4 e ceras/resinas, foram feitos para durar a vida inteira nos canais radiculares por eles preenchidos. Entretanto, existem evidÃncias de que esses materiais sofrem degradaÃÃo com o decorrer do tempo de obturaÃÃo intensificada quando existem infecÃÃes por microrganismos. A bactÃria Enterococcus faecalis à um desses microrganismos, normalmente associada com infecÃÃes periapicais persistentes. A prevalÃncia dessa bactÃria em casos de re-tratamento ocorre entre 29 e 79% dos casos. O objetivo do trabalho à estudar a degradaÃÃo bacteriana de cones de guta-percha em meio contendo E. faecalis, com o foco na matÃria orgÃnica, o poliisopreno. Cada amostra de cone foi imersa em meio de sais minerais com inÃculo de concentraÃÃo de 5,4x105 UFC/mL por perÃodos de 10 a 100 dias. Os cones foram removidos do contato com o inÃculo em tempos variados e analisados. Foram pesados e caracterizados por TGA, GPC, FTIR, MEV e RMN H1. O crescimento do inoculo foi monitorado atravÃs de medidas de densidade Ãptica, determinaÃÃo da porcentagem de mineralizaÃÃo de CO2, medidas da biomassa seca de cÃlulas, medidas de pH e contagem de cÃlulas. A atividade antimicrobiana dos constituintes inorgÃnicos dos cones foi verificada mediante o teste de difusÃo em poÃo. Foi observada perda gradual de massa dos cones com o tempo de degradaÃÃo. O aumento no teor de resÃduos em 800ÂC, mostra que houve uma perda progressiva de matÃria orgÃnica e um aumento na proporÃÃo de constituintes inorgÃnicos. ApÃs o contato com E. faecalis, o poliisopreno isolado dos cones das marcas Odous e Tanari foi analisado e comparado com o poliisopreno in natura por GPC e FTIR. Os resultados mostram que nos trÃs casos ocorre uma pequena e gradual perda de massa molar do poliisopreno constituintes do material, mais evidenciada no poliisopreno in natura. Os espectros de infravermelho mostram que a degradaÃÃo tambÃm ocorre com modificaÃÃes estruturais do polÃmero, especialmente no surgimento de bandas de deformaÃÃo de C=O e OH/OOH; e variaÃÃes no padrÃo de cristalinidade das bandas de C=C-H. As imagens de MEV mostram que podem ocorrer mudanÃas na morfologia da superfÃcie dos cones biodegradados, resultado do ataque seletivo ao componente orgÃnico. Os espectros de RMN de H1 do poliisopreno in natura mostram que o material sofreu pequenas mudanÃas estruturais nas molÃculas de poliisopreno durante o bioensaio. Todos os bioensaios de monitoramento indicaram que o inÃculo cresce continuamente durante o perÃodo de contato com os cones ou com o poliisopreno in natura. A bactÃria degrada a matÃria orgÃnica dos cones usando-os como fonte de substrato e, consequentemente, causando vazios nos cones que podem ocasionar falhas no tratamanto endodÃntico. / The gutta-percha cones used in endodontic therapy, consisting of poly (1,4-trans-isoprene), ZnO and/or BaSO4 and wax/resin, were meant to last a lifetime in root canals filled by them. However, there is evidence that these materials suffer degradation with the passage of time when there shutter intensified infections by microorganisms. The bacterium Enterococcus faecalis is one of those microorganisms commonly associated with persistent periapical infections. The prevalence of this bacterium in cases of re-treatment is between 29% and 79% of cases. The objective is to study the bacterial degradation of gutta-percha in medium containing E. faecalis, with the focus on organic matter, polyisoprene. Each sample cone was immersed in mineral salts medium with inoculum concentration of 5.4 x 105 CFU/mL for periods of 10 to 100 days. The cones were removed from contact with the inoculum at various times and analized. Were weighed and characterized by TGA, GPC, FTIR, NMR H1 and SEM. The growth of the inoculum was monitored by optical density measurements, determining of percentage of mineralization of CO2, measured dry biomass cells, measurements of pH and cell count. The antimicrobial activity of inorganic constituents of cones was verified by diffusion test pit. Was observed gradual loss of mass of the cones with the degradation time. The increase in the ash content at 800 ÂC, shows that there was a progressive loss of organic matter and an increased proportion of inorganic constituents. After contact with E. faecalis, polyisoprene isolated cones marks Odous and Tanari was analized and compared and the fresh polyisoprene by GPC and FTIR. The results show that in all three cases there is small and gradual loss of the molar mass of the polyisoprene constituents of material, the more evidente in polyisoprene in nature. Infrared spectra show that degradation also ocurrs with strutural modifications of the polymer, especially in the occurrence of deformation bands of C=O and OH/OOH, and variations in the pattern of cristalinity of the bands of C=C-H. The SEM images show that changes may ocurr in the surface morphology of the cones biodegraded, resulting the from selective attack to the organic component. The NMR H1 spectra of polyisoprene fresh show that the material has undergone minor structural changes in the molecules of polyisoprene during bioassay. All bioassays monitoring indicated that the inoculum grows continuously during the period of contact with the cones or polyisoprene in nature. The bacteria degrades the organic matter of the cones using them as a source of substrate and thereby causing voids cones that can cause failure in endodontic treatment.

This work is focused on characterization of a polycrystalline sample of the coordination compound with ions Eu3+ using as a binder the trans-cinnamic acid , [Eu(cin)3]. The interest in coordination with lanthanide compounds is due to their large technological applications. The process of luminescence of coordination compounds containing lanthanide, also called antenna effect, has a main objective the use of new ligands with various applications, both in increasing the efficiency of energy receptors in the ultraviolet region and the development of biomarkers. In this work, to characterize the polycrystalline material, Raman spectroscopy was used to determine the vibrational behavior of the material at ambient temperature and pressure. It was also shown the behavior of the compound at low temperatures, in which variations in various vibrational modes were observed, indicating thus the occurrence of phase transition. Using a diamond anvil cell the material was studied by high hydrostatic pressure Raman spectroscopy. The purpose of this methodology was to map possible phase transitions and discover the occurrence of possible polymorphism. However, until the pressure reached in the experiments - about 5.2 GPa - it was found that the original phase remained stable. A discussion of the luminescence of the sample is also provided in this work. / O presente trabalho està focado na caracterizaÃÃo de uma amostra policristalina do composto de coordenaÃÃo com Ãons Eu3+ utilizando como ligante o Ãcido trans-cinÃmico, [Eu(cin)3]. O interesse em compostos de coordenaÃÃo com lantanÃdeos deve-se Ãs suas amplas aplicaÃÃes tecnolÃgicas. O processo de luminescÃncia dos compostos de coordena- ÃÃo contendo lantanÃdeo, tambÃm chamado de efeito antena, tem como principal objetivo o uso de novos ligantes com aplicaÃÃes diversas, tanto no aumento da eficiÃncia de re- ceptores de energia na regiÃo do ultravioleta quanto no desenvolvimento de marcadores biolÃgicos. Neste trabalho, para realizar a caracterizaÃÃo do material policristalino, foi utilizada a espectroscopia Raman, a fim de determinar o comportamento vibracional do material à temperatura e pressÃo ambiente. TambÃm foi verificado o comportamento do composto sob baixas temperaturas, no qual foram observadas variaÃÃes em vÃrios modos vibracionais, indicando, por conseguinte, a ocorrÃncia de transiÃÃo de fase. Utilizando uma cÃlula de pressÃo a extremos de diamante o material foi estudado a altas pressÃes hidrostÃticas atravÃs de espectroscopia Raman. O intuito desta metodologia era mapear possÃveis transiÃÃes de fase e descobrir a ocorrÃncia de eventual polimorfismo. Entretanto, atà a pressÃo atingida nos experimentos â cerca de 5,2 GPa â verificou-se que a fase ori- ginal permaneceu estÃvel. Uma discussÃo sobre a luminescÃncia da amostra tambÃm à fornecida neste trabalho.

Orientador: Francisco Eduardo Martinez / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-18T07:43:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fontanelli_BeatrizAparecidaFioruci_M.pdf: 2160007 bytes, checksum: 5e358e9b41de70f7fd7c801fae0e0378 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A exposição ao etanol altera a concentração do retinol e do all-trans-ácido retinóico (atAR) em vários tecidos. Os retinóides, retinol e atAR, são importantes para a diferenciação e manutenção das células epiteliais da próstata. O atAR se liga aos receptores de ácido retinóico (RARa, ß e y) e a interação receptor/ligante com a sequência responsiva ao retinóide no DNA, levam à transcrição de genes alvos. Assim, o atAR exerce efeitos no crescimento celular, diferenciação e apoptose, sendo essencial no desenvolvimento e diferenciação de órgãos e tecidos. Nosso objetivo foi analisar o retinol, o ácido retinóico e seus receptores, bem como, o índice de proliferação celular e de apoptose no lobo dorsolateral da próstata de ratos adultos UCh. Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais (n=10/grupo): UChA (ingestão voluntária de etanol a 10% (v/v); UChACo (controle - ausência de etanol); UChB (ingestão voluntária de etanol a 10% (v/v) e UChBCo (controle - ausência de etanol). Após 150 dias de experimentação, os animais foram eutanasiados por decapitação e o sangue do tronco e os lobos dorsolaterais das próstatas foram coletados e processados: (1) para análises da concentração do retinol e do atAR no plasma e na próstata por meio de HPLC; (2) e análises de microscopia de luz para a proliferação celular (Ki-67), apoptose (Tunel) e para os receptores de ácido retinóico, por meio dos anticorpos anti-RARa, -ß e -y. O consumo crônico de etanol diminuiu a concentração do retinol no plasma dos grupos UChB (consumo alto de etanol) e UChA (consumo baixo de etanol). A concentração do retinol foi ainda menor no plasma do grupo UChB comparado ao UChA. No entanto, a concentração do retinol no tecido prostático não teve diferença significativa entre os grupos. O atAR aumentou significativamente somente no plasma do grupo UChB. Na próstata, a concentração do atAR aumentou no grupo UChB, enquanto que no UChA não houve diferença estatística. O RAR? na próstata dorsal e lateral dos ratos UCh não foi alterada em função do consumo de etanol. Já os RARß e -? apresentaram aumento do sinal na próstata dorsal do grupo UChB. Não houve diferença no índice de proliferação celular e de apoptose nas próstatas dorsais e laterais dos grupos experimentais. Conclui-se que o etanol altera a concentração do retinol e do atAR no plasma. Essa alteração é diretamente proporcional à quantidade de etanol consumida. Já na próstata, o retinol não é alterado pelo etanol. O consumo alto de etanol altera a concentração do atAR na próstata dorsolateral e a expressão dos RAR ß e y na próstata dorsal. A alteração da expressão dos RAR pode aumentar a sensibilidade da próstata à ação do atAR. O etanol não altera a proliferação celular e a apoptose na próstata dorsal e lateral / Abstract: Ethanol exposure alters the concentration of retinol and all-trans retinoic acid (atAR) in several tissues. Retinoids (retinol and atAR) are essential for the differentiation and homeostasis of the prostate epithelial cells. atAR binds to retinoic acid receptors (RAR a, ß and ?) and the interaction receptor/ligand with the sequence responsive to retinoid into DNA lead to transactivation of target genes. Thus, atAR directly produces their effects on cell growth, differentiation and apoptosis. This study aimed to analyze the retinol and all-trans-retinoic acid concentrations and its atAR receptors as well as the cell proliferation and apoptosis index upon the dorsolateral prostate lobe of adult UCh rats. All animals were divided into four experimental groups (n = 10/group): UChA (10% ethanol (v / v) voluntary intake); UChACo (without ethanol consumption); UChB (10% ethanol (v / v) voluntary intake) and UChBCo (without ethanol consumption). After 150 days of experimentation, animals were sacrificed followed by decapitation and trunk blood and dorsolateral prostate lobes collected. Samples of plasma and prostate by concentration analysis of the retinol and atAR were processed for HPLC. The cell proliferation and apoptosis immunoreactivities were assessed by Ki-67 and Tunel, respectively, and nuclear receptors by anti-RAR a,-ß and-y. Chronic ethanol consumption reduced the concentration of plasma retinol in UChB (high ethanol intake) and UChA groups (low ethanol intake). The retinol concentration in plasma was even lower in UChB compared to UChA group. However, the retinol concentration in prostate tissue was not significantly different between the groups. Concentration of atAR increased in plasma of UChB group, and was 96% higher in the UChA group. The prostate, atAR increased in the UChB group, while in UChA group no statistical difference. There was no statistical difference in proliferation cell and apoptosis in the dorsal and lateral prostate lobes between the groups. The expression of RAR a in the dorsal and lateral prostate of UCh rats was not altered as a function of ethanol consumption. Already RAR ß and-y showed increased signal in the dorsal prostate UChB group. We conclude that ethanol alters the concentration of retinol and atAR in plasma. This change is directly proportional to the amount of ethanol consumed. In the prostate, retinol is not altered by ethanol. The high ethanol intake alters the concentration of atAR in dorsolateral prostate and the expression of RARß and RARy in the dorsal prostate. Alteration in expression of RAR can increase sensitivity to the action of the atAR in prostate. Ethanol does not alter cell proliferation and apoptosis in the dorsolateral prostate / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural