Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-23T07:48:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 246668.pdf: 3951481 bytes, checksum: 0b0a74b376120ee43c9c8d2e27a98945 (MD5) / O presente estudo analisou através de técnicas farmacológicas alguns mecanismos envolvidos na resposta contrátil induzida pelas cininas em cólons normais ou com colite por TNBS. Foi constatado que a contração induzida pela BK e análogos é mediada por receptores do tipo B2 e não por receptores do tipo B1. Além disso, foi demonstrado que a resposta contrátil à BK é mediada pelo influxo de cálcio externo, ativação de canais de cálcio do tipo L e N, liberação neuronal de acetilcolina, pela participação de neuropeptídeos, prostanóides, leucotrienos e pelo TRPV1. Também foi demonstrado que o receptor B1 pode ser induzido in vitro após a montagem das preparações alcançando respostas contráteis máximas em 6-8 h. Também foi evidenciado que a colite promove aumento da resposta contrátil à BK e a des-Arg9-BK sugerindo a indução dos receptores B1 e B2. Essa hipótese foi confirmada através da realização do ensaio de união específica com os ligantes [3H]-BK ou [3H]-des-Arg10-calidina, os quais revelaram aumento na densidade de ambos os receptores sem, no entanto, causar alteração da afinidade desses receptores pelo agonista. Ademais, foi constatado que na colite ocorreu aumento da expressão do RNAm para os receptores das cininas. Confirmou-se também, pela utilização de animais com deleção gênica para os receptores B1 ou B2, que ambos são necessários para a indução do dano tecidual colônico. Por outro lado, foi verificada que a indução in vivo do receptor B1 é dependente de síntese protéica, PI3K?, NF-?B, TNFa e da participação da iNOS. Os estudos também indicam que a resposta contrátil induzida pela des-Arg9-BK envolve o influxo de cálcio externo, a ativação de canais de cálcio do tipo L, da degradação do ácido araquidônico bem como de seus metabólitos, de enzimas iNOS e eNOS e proteínas quinases PKA, PKC, PI3K? e MEK. Os resultados do presente trabalho contribuem para o melhor entendimento dos mecanismos envolvidos nas respostas contráteis mediadas pelos receptores B1 e B2, bem como o papel desses receptores na colite ulcerativa.

Orientador: Mara Aparecida Alves Cabral / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T13:35:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Magalhaes_KarinadeCarvalho_M.pdf: 12199498 bytes, checksum: 243dc58b0f19c728e36e7134e36ec926 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A Retocolite Ulcerativa Inespecifica (RCUI) é uma doença inflamatória intestinal, de etiologia desconhecida (MORAES FILHO et aI, 1988 & PRADO et al, 1991) e a Síndrome do Intestino Irritável (Sll) é uma doença funcional do aparelho digestivo (DROSSMAN et al. 1990), nas quais, distúrbios afetivo-emocionais elou eventos estressantes de vida parecem ser relevantes no desencadeamento e na manutenção de suas sintomatologias. O presente trabalho objetivou avaliar a presença de distúrbios emocionais (ansiedade e depressão) e identificar eventos estressantes de vida nos doze meses que antecederam as primeiras manifestações sintomáticas de ambas as doenças. Foram estudados trinta e um pacientes com RCm, trinta com sn, sendo comparados com um grupo controle de trinta indivíduos sem sintomas gastrintestinais. Os dois primeiros grupos procederam do Ambulatório de Gastroenterologia Clínica e o grupo Controle, do Ambulatório de Oftalmologia, do Hospital das Clínicas, da Faculdade de Ciências Médicas, da Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP. Os protocolos foram padronizados para os três grupos, proporcionando maior fidedignidade nas comparações intra e inter grupos. Os pacientes foram contactados através de uma entrevista semi-estruturada, com base no roteiro de histórico de vida (MAYER-GROSS, SLATER, TOTH, 1972), aplicando-se também, as escalas de Beck para depressão (BECK et aI, 1961) e de traços e comportamento de agressividade de Gayra1 (GA YRAL, 1979). Os resultados foram analisados de forma descritiva, com a elaboração de tabelas, gráficos e percentuais de ocorrência das variáveis em estudo e de forma qualitativa com base nos relatos das histórias livres de vida. Os três grupos mostraram-se homogêneos quanto ao sexo e principais características sócio-demo gráficas. O grupo Sij: apresentou mais distúrbios afetivo-emocionais, como depressão, ansiedade e somatização do que os grupos RCm e Controle. O grupo RCm apresentou maior tendência a introjetar a agressividade e manifestar distúrbios de personalidade do que os grupos sn e Controle. Ambos, sn e RCm, demonstraram dificuldade de exteriorizar agressividade, quando comparados ao grupo Controle. O grupo RCm apresentou características de personalidade obsessiva, quando comparado aos grupos sn e Controle. Nos grupos RCm e sn, identificaram-se eventos estressantes de vida, nos doze meses que antecederam as primeiras manifestações dos sintomas. Foram idenrificadas, também em ambos os grupos, conseqüências negativas da doença sobre suas vidas / Abstract: Non-specific ulcerative rectocolitis, (NURC) is an inflammatory intestinal with an unknown etiology (MORAES FILHO et ai, 1988 & PRADO et al" 1991) and Irritable Bowel Syndrome (ms) is a functional disease of the digestive system (DROSSMAN et al, 1990). In both diseases, affective-emotional disorders and/or life stressful events seem to be important in the triggering and in the maintenance of their symptomatologies. The aim of the present report is to evaluate the presence of emotional disorders (anxiety and depression) and to identify life stressful events in the twelve months that preceded the first symptomatic manifestations of both diseases. Thirty-one patients with NURC. and thirty with IBS were examined and they were compared to a control group with thirty individuais with no gastrointestinal symptoms. The first two groups were referred from Out-patient Department of Clinical Gastroenterology and control group from Out-patient Department of Ophthalmology of Faculty of Medical Sciences of State University of Campinas- UNICAMP. Protocols were standardized for the three groups, providing greater reliability in intra- and inter-groups' comparisons. Patients were contacted through a semi-guided interview, based on life description (MAYER-GROSS, SLATER, ROTH, 1972) and Beck's Scales for Depression ( BECK et ai, 1961) and Gayral's Scales of Traces and Aggressiveness Behavior (GA YRAL, 1979) were aiso applied. ResuIts were analyzed in a descriptive way, with the elaboration of tables, graphs and percentage of occurrence of the studied variables and in a qualitative way based on reports of life free histories. The three groups were shown to be homogeneous regarding sex and the main socio-demograpbic features. IBS group showed more affective-emotional disorders, such as depression, anxiety and somatization than the other groups. NURC group had greater tendency to introject aggressiveness and to manifest personality disorders than ms and control groups. Both IBS and NURC groups had difficuIty in expressing aggressiveness when compared to control group. NURC group presented obsessive personality features when compared to ms and control groups. NURC and ms groups presented life stressful events in the twelve months that preceded the first symptoms manifestations. There were negative consequences of the diseases on patients' lives of both groups / Mestrado / Mestre em Saude Mental

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4298_1.pdf: 893623 bytes, checksum: 0bcd91f818d9d6a5db4eae01d84b07ed (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os métodos imunohistoquímicos associados aos sistemas computadorizados de análise de imagens tem sido de extrema importância, como ferramentas auxiliares, no estudo da expressão de proteínas relacionadas a neoplasias malignas em pacientes portadores de doenças inflamatórias intestinais. Neste estudo, obtive-se o perfil imunohistoquímico das proteínas p53 e Ki-67 do tecido intestinal de pacientes com colite ulcerativa (n=30) um grupo tratado clinicamente e outro cirurgicamente de ambos os sexos e idade média de 38,5 anos. Os tecidos foram fixados em formalina a 10%, submetidos à rotina histológica e montados em parafina. Fragmentos de tecido (4 μm) foram submetidos à técnica de imunohistoquímica para as proteínas Ki-67 e p53. Os perfis de marcação tecidual foram quantificados através de uma estação de análise de imagem contendo um microscópio óptico equipado com uma câmera digital ambos acoplados a um computador contendo o software OPTIMAS®. Os resultados obtidos demonstram diferenças significativas nos padrões de marcação no tecido inflamado em pacientes tratados clinicamente quando comparados aos tecidos de pacientes tratados cirurgicamente. As proteínas Ki-67 e P-53 indicam marcadores imunohistoquímicos úteis para diferenciação de tecidos de colite ulcerativa que trazem características pré-neoplásicas sugestivas de malignidade

O pantoprazol (PAN) é um inibidor da bomba de prótons clinicamente empregado para o tratamento de úlcera gástrica e refluxo gastro-esofágico. Estudos relacionados à estabilidade físico-química mostraram que a degradação do PAN está diretamente relacionada com a acidez do meio, determinando a necessidade de administrá-lo em uma forma gastrorresistente. Desse modo, este trabalho propôs-se a desenvolver micropartículas à base de polímero gastrorresistente (Eudragit S100®), polímero de baixa permeabilidade (Eudragit RS30D®) ou de blenda polimérica (Eudragit S100®/ Eudragit RS30D®), contendo PAN pela técnica de spraydrying . O estudo de dissolução in vitro utilizando célula de fluxo demonstrou que o PAN foi liberado das micropartículas em 120 minutos, seguindo cinética de primeira ordem, de acordo com o modelo monoexponencial. A avaliação da gastrorresistência in vitro em célula de fluxo e em dissolutor evidenciou que as formulações de micropartículas à base de Eudragit S100® e da blenda (Eudragit S100®/ Eudragit RS30D®), garantiram adequada proteção ao fármaco em ambiente ácido. Estudos in vivo confirmaram esses resultados, pois possibilitaram a constatação da proteção do fármaco pelas micropartículas durante a passagem pelo estômago, o que possibilitou absorção entérica do PAN em quantidade adequada para exercer atividade farmacológica. Por fim, a investigação ex vivo da permeação do PAN carreado por micropartículas no epitélio intestinal mostrou que estes sistemas foram capazes de garantir a absorção da totalidade do fármaco carreado, constatando-se ainda que este processo ocorreu segundo o modelo monoexponencial.

O pantoprazol (PAN) é um inibidor da bomba de prótons clinicamente empregado para o tratamento de úlcera gástrica e refluxo gastro-esofágico. Estudos relacionados à estabilidade físico-química mostraram que a degradação do PAN está diretamente relacionada com a acidez do meio, determinando a necessidade de administrá-lo em uma forma gastrorresistente. Desse modo, este trabalho propôs-se a desenvolver micropartículas à base de polímero gastrorresistente (Eudragit S100®), polímero de baixa permeabilidade (Eudragit RS30D®) ou de blenda polimérica (Eudragit S100®/ Eudragit RS30D®), contendo PAN pela técnica de spraydrying . O estudo de dissolução in vitro utilizando célula de fluxo demonstrou que o PAN foi liberado das micropartículas em 120 minutos, seguindo cinética de primeira ordem, de acordo com o modelo monoexponencial. A avaliação da gastrorresistência in vitro em célula de fluxo e em dissolutor evidenciou que as formulações de micropartículas à base de Eudragit S100® e da blenda (Eudragit S100®/ Eudragit RS30D®), garantiram adequada proteção ao fármaco em ambiente ácido. Estudos in vivo confirmaram esses resultados, pois possibilitaram a constatação da proteção do fármaco pelas micropartículas durante a passagem pelo estômago, o que possibilitou absorção entérica do PAN em quantidade adequada para exercer atividade farmacológica. Por fim, a investigação ex vivo da permeação do PAN carreado por micropartículas no epitélio intestinal mostrou que estes sistemas foram capazes de garantir a absorção da totalidade do fármaco carreado, constatando-se ainda que este processo ocorreu segundo o modelo monoexponencial.

Orientadora : Profª. Drª. Maria Fernanda de Paula Werner / Coorientadora : Profa. Dra. Cristiane Hatsuko Baggio / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 22/02/2017 / Inclui referências: f. 153-179 / Resumo: A colite ulcerativa é uma doença crônica caracterizada por inflamação difusa que afeta a mucosa colônica com diarreia sanguinolenta como característica predominante. Estudos epidemiológicos sugerem que a ocorrência da doença inflamatória intestinal está crescendo consideravelmente no mundo todo e a razão permanece desconhecida. Atualmente, tem sido apontado que a colite apresenta caráter multifatorial, sendo o resultado da interação entre fatores genéticos e ambientais. Apesar da relevância e do impacto da doença na saúde e na vida social dos pacientes, a colite ulcerativa não é totalmente compreendida e a terapêutica disponível tem pouca eficácia associada a inúmeros efeitos adversos, dando espaço à procura urgente por novas alternativas terapêuticas. Recentemente, tem sido observado que polissacarídeos purificados de plantas poderiam melhorar respostas biológicas assim como a resposta imune. Sendo assim, este estudo foi desenhado para investigar os efeitos protetores e de cicatrização da ramnogalacturonana (RGal) isolado da Acmella oleracea (L.) R.K. Jansen em um modelo experimental agudo de inflamação intestinal induzida quimicamente com dextrano sulfato de sódio (DSS) em camundongos, investigando os possíveis mecanismos de ação envolvidos. Além disso, também avaliamos os mecanismos complementares em células heterogêneas de adenocarcinoma colorretal epitelial humano (Caco-2). Os resultados obtidos são bastante promissores e demonstraram que o tratamento com RGal durante 7 dias claramente reduziu a gravidade da colite induzida por DSS através da proteção do epitélio do cólon e neurônios do plexo mioentérico quando observados por técnicas histológicas. Ademais, o tratamento com RGal também aumentou os fatores protetores da mucosa, como o muco gástrico e a proliferação de novas células seguido pela manutenção do trânsito intestinal e redução da alodinia abdominal. Ainda, em um ensaio de função de barreira in vitro, RGal promoveu a cicatrização e reduziu a permeabilidade das células Caco-2 em placas transwell, reduziu a secreção de citocina e manteve a integridade dos complexos intercelulares de junção epitelial, nomeadamente ocludina e claudina-1. Assim, nossos resultados sugerem que RGal pode representar uma molécula promissora para o desenvolvimento de fármacos para melhorar o tratamento terapêutico da colite ulcerativa. Palavras chaves: Colite ulcerative, doença inflamatória intestinal, Acmella oleracea, RGal, Caco-2. / Abstract: Ulcerative colitis is a chronic disease characterized by diffuse inflammation that affects the colonic mucosa with bloody diarrhea as a predominant symptom. Epidemiological studies suggest that the occurrence of inflammatory bowel disease (IBD) is increasing /worldwide and the reason remains unknown. Currently, it has been pointed out that the colitis presents multifactorial character, being the result of interaction between genetic and environmental factors. Despite the relevance and the impact of the disease on health and social life of patients, ulcerative colitis is not fully understood and the available therapy has low effectiveness associated with numerous adverse effects, giving space for the urgent quest for new therapeutic alternatives. Recently, it has been observed that several polysaccharides purified from plants could improve biological responses in diseases as well as enhance immune responses. Thus, this study was designed to investigate the protective and healing effects of rhamnogalacturonan (RGal) isolated from Acmella oleracea (L.) R.K. Jansen in an acute experimental model of intestinal inflammation chemically induced with dextran sulfate sodium (DSS) in mice with the possible mechanisms underlying this activity. Furthermore, we also evaluated the complementary mechanisms in heterogeneous human epithelial colorectal adenocarcinoma cells (Caco-2). The findings obtained are very promising and demonstrated that RGal treatment for 7 days clearly reduced the severity of DSS colitis in mice through the protection of colon epithelium and neurons of the myenteric plexus. Besides, RGal treatment increased mucosal protective factors followed by the maintenance of the intestinal transit and reduction of abdominal allodynia. Furthermore, in an in vitro barrier function assay, RGal promoted healing and markedly reduced the Caco-2 permeability on transwell inserts chambers, reduced cytokine secretion and maintained the integrity of intercellular junctional complexes, namely occludin and claudin-1. Thus, our promising results suggest that RGal may represent an attractive and promising molecule for drug development to improve the therapeutic management of ulcerative colitis. Keywords: Ulcerative colitis, inflammatory bowel disease, Acmella oleracea, RGal, Caco-2.

Orientador: Daniela Cardoso Umbelino Cavallini / Banca: Patricia de Oliveira Prada / Banca: Marla Simone Jovenasso Manzoni / Resumo: Objetivos: A utilização de microrganismos probióticos na redução do risco de doenças inflamatórias intestinais (DIIs), incluindo a colite ulcerativa (CU), tem se mostrado promissora, sendo que o efeito benéfico depende da cepa utilizada e da fase da patologia. O objetivo do presente estudo foi averiguar o efeito de um produto probiótico à base de soja, fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus 416 e com adição de Bifidobacterium longum ATCC 15707, na fase aguda da colite quimicamente induzida em camundongos. Métodos: O protocolo experimental teve duração total de 14 dias e os animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos (n=10): Grupo C - Animais sadios que não receberam os produtos em estudo; Grupo CL - Animais com colite quimicamente induzida e que não receberam os produtos em estudo; Grupo CLF - Animais com colite quimicamente induzida e que receberam o produto fermentado probiótico; Grupo CLP - Animais com colite quimicamente induzida e que receberam o produto não fermentado (placebo). A indução da colite foi feita pela administração de dextran sulfato de sódio (DSS) a 3% dissolvido na água fornecida diariamente aos animais, por um período de sete dias, e os produtos foram administrados ao longo dos 14 dias de estudo. Durante o período experimental foram monitorados os seguintes parâmetros: peso corpóreo dos animais, ingestão hídrica e de ração, consistência e presença de sangue oculto ou aparente nas fezes e composição da microbiota fecal. Ao final do protocolo, os animais foram eutanasiados e o intestino grosso foi removido para realização das análises macroscópica e histológica. Resultados: De acordo com os resultados do índice de atividade da doença (IAD), os animais que consumiram o produto probiótico (CLF) apresentaram redução dos sintomas associados à colite durante... / Abstract: Objectives: The use of probiotic microorganisms in the reduction of inflammatory bowel diseases (IBD) risks, including ulcerative colitis (UC), has been shown promising, and the beneficial effect depends on the strain used and the stage of disease. The objective of this study was to investigate the effect of a probiotic soy product fermented with Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus 416 with addition of Bifidobacterium longum ATCC 15707 in the acute phase of colitis chemically induced in mice. Methods: The experimental protocol had total duration of 14 days and the animals were randomized into four groups (n = 10): Group C - healthy animals that have not received the products under study; CL Group - Animals with chemically induced colitis and who have not received the products under study; CLF Group - Animals with chemically induced colitis and receiving the probiotic fermented product; Group CLP - animals with chemically induced colitis and receiving the unfermented product (placebo). The induction of colitis was made by the administration of dextran sodium sulfate (DSS) 3% dissolved in the drinking water for a period of seven days, and the products were administered over the 14 days of the study. During the trial period the following parameters were monitored: body weight, water and food intake, consistency and presence of hidden or apparent blood in stool and composition of the fecal microbiota. At the end of the protocol, the animals were euthanized and the large intestine was removed to perform the macroscopic and histological analysis. Results: According to the results of disease activity index (DAI), the animals that consumed the probiotic product (CLF) showed a reduction of symptoms associated with colitis during the induction period, compared to the ... / Mestre

O pantoprazol (PAN) é um inibidor da bomba de prótons clinicamente empregado para o tratamento de úlcera gástrica e refluxo gastro-esofágico. Estudos relacionados à estabilidade físico-química mostraram que a degradação do PAN está diretamente relacionada com a acidez do meio, determinando a necessidade de administrá-lo em uma forma gastrorresistente. Desse modo, este trabalho propôs-se a desenvolver micropartículas à base de polímero gastrorresistente (Eudragit S100®), polímero de baixa permeabilidade (Eudragit RS30D®) ou de blenda polimérica (Eudragit S100®/ Eudragit RS30D®), contendo PAN pela técnica de spraydrying . O estudo de dissolução in vitro utilizando célula de fluxo demonstrou que o PAN foi liberado das micropartículas em 120 minutos, seguindo cinética de primeira ordem, de acordo com o modelo monoexponencial. A avaliação da gastrorresistência in vitro em célula de fluxo e em dissolutor evidenciou que as formulações de micropartículas à base de Eudragit S100® e da blenda (Eudragit S100®/ Eudragit RS30D®), garantiram adequada proteção ao fármaco em ambiente ácido. Estudos in vivo confirmaram esses resultados, pois possibilitaram a constatação da proteção do fármaco pelas micropartículas durante a passagem pelo estômago, o que possibilitou absorção entérica do PAN em quantidade adequada para exercer atividade farmacológica. Por fim, a investigação ex vivo da permeação do PAN carreado por micropartículas no epitélio intestinal mostrou que estes sistemas foram capazes de garantir a absorção da totalidade do fármaco carreado, constatando-se ainda que este processo ocorreu segundo o modelo monoexponencial.

Memoria para optar al titulo profesional de Bioquímico / La Enfermedad de Crohn (EC) y la Colitis Ulcerosa (CU) enfermedades inflamatorias intestinales (EII) multifactoriales que presentan una relación genética importante. Recientemente se han descrito polimorfismos en los genes de los receptores de reconocimiento de patógenos NOD2/CARD15 y Toll tipo 4 (TLR4), que estarían involucrados en la patogénesis de las EII. No existen antecedentes descritos acerca de la frecuencia de estos polimorfismos en población latinoamericana El objetivo principal de esta tesis es determinar la frecuencia de polimorfismos Asp299Gly de TLR4 y L1007fsinC, Arg702Trp, Gly908Arg de NOD2/CARD15 en un grupo de pacientes chilenos portadores de EII. Se estudiará DNA obtenido de sangre periférica de 44 pacientes con EII (22 EC, 22 CU) y 20 controles sanos. Los polimorfismos se determinaron mediante PCR-RFLP o PCR alelo específico. Se caracterizaron ademas características clínicas y demográficas. Dentro de los pacientes diagnosticados con EC, encontramos un patrón clínico inflamatorio en 14 de ellos, 5 pacientes presentaron un fenotipo penetrante y 5 desarrollaron estenosis, en cuanto a la localización de la enfermedad en EC, un individuo manifiesto compromiso esofágico, 5 presentaron daño perianal, 7 con compromiso de íleo y 16 pacientes mostraron compromiso colónico. Pacientes diagnosticados con CU, 2 de ellos presentaron proctitis, 2 proctosigmoiditis, 4 colitis izquierda y 14 desarrollaron pancolitis. El análisis genético de NOD2/CARD15 reveló la presencia del alelo Arg702Trp, L1007fsinsC y Gly908Arg, en dos pacientes con EC, uno con EC y uno con CU, respectivamente. El alelo mutado del polimorfismo Asp299Gly del gen de TLR4 fue identificado en dos pacientes uno con EC y uno con CU. PCR y PCR-RFLP es una técnica sensible y confiable, y es considerado un excelente método de detección de polimorfismos. Este es el primer estudio genético realizado en pacientes chilenos con EII, donde se demuestra que los alelos asociados con estas patologías se presentan con una frecuencia equivalente a grupos europeos según lo publicado en estudios anteriores. Sin embargo, factores ambientales u otros polimorfismos genéticos podrían estar involucrados en la patogénesis de EII en nuestra población / Crohn’s disease (CD) and ulcerative colitis (UC) are multifactorial diseases with a genetic background. Genes related to the innate immune response have been observed to be involved. Polymorphisms of Toll-like receptor 4 (TLR4) and CARD15/NOD2 are thought to be involved in the pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD). There is no information about the frequency of these polymorphisms in South American and Chilean populations. The main subject of this thesis is investigate the distribution of NOD2/CARD15 (Arg702Trp, Gly908Arg and Leu1007fsinsC) and TLR4 (Asp299Gly) polymorphisms in Chilean patients with IBD. DNA was obtained from 22 CD, 22 UC patients and 20 healthy individuals. Genotyping was performed by allele-specific PCR and by PCR-RFLP analysis. Clinical and demographic features were characterized. Among the CD patients, the clinical pattern was deemed inflammatory in 14, while five had penetrating and five stricturing, variants. One patient had esophageal involvement, five perianal, seven ileal and in 16 the colon was involved. Among the UC patients, two had proctitis, two proctosigmoiditis, four left-sided colitis and 14 pancolitis. NOD2/CARD15 analysis revealed the presence of the Arg702Trp allele in two CD patients (both Heterozygotes), L1007fsinsC in one CD patient (heterozygote) while Gly908Arg was found in one UC patient. The Asp299Gly TLR4 allele was identified in one UC and one CD patient. PCR and RFLP-PCR is a sensitive and reliable technique, and it is consider an excellent method to detecting genetics polymorphisms. This genetic study shows that the alleles frequently associated with IBD (L1007fsinsC, Gly908Arg and Arg702Trp in NOD2/CARD15 and Asp299Gly TLR4) have a low incidence in Chilean, IBD patients, which is similar to European populations. It is possible that, in addition to environmental factors, other genetic polymorphisms may be involved in the pathogenesis of the disease in Chilean, IBD patients

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4260_1.pdf: 1556243 bytes, checksum: 9062eb76fd488be821a97ff41b95233f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Nos últimos anos tem se aumentado o interesse pelo estudo cada vez mais detalhado dos processos patológicos envolvidos nas doenças inflamatórias intestinais, em especial a retocolite ulcerativa idiopática. Visando oferecer um método que auxilie o diagnóstico diferencial ou mesmo que seja indicador da transformação neoplásica, a galectina-3 surge como um potencial marcador da fisiopatologia de diversos tipos de câncer, entre eles o câncer colorretal. Para este estudo, o perfil imunohistoquímico foi avaliado em tecido intestinal de pacientes com retocolite ulcerativa (n=20) e sua respectiva contraparte normal, de ambos os sexos e idade média de 55 anos. Os tecidos foram fixados em formalina a 10% e submetidos à histoquímica da reação de Schiff (PAS) para visualizações das inclusões citoplasmáticas de glicosaminoglicanos, e tricrômico de Masson para visualização das fibras colágenas. Fragmentos de tecido (4 &#956;m) foram submetidos à técnica de imunohistoquímica para a proteína galectina-3. Os perfis de marcação tecidual foram analisados através de uma estação de trabalho contendo um microscópio óptico equipado com uma câmera digital ambos acoplados a um computador contendo o software OPTIMAS®. Os resultados obtidos demonstram uma diminuição da expressão da galectina-3 no sitio inflamatório da retocolite ulcerativa. Houve um aumento significativo (p<0.022) no número de células caliciformes dos pacientes tratados clinicamente, porém com redução do conteúdo glandular. Os dados sugerem que a atividade glandular juntamente com a redução da expressão da galectina-3 possam auxiliar o diagnóstico e o monitoramento desses pacientes