Submitted by Victor Hugo Mendonça (victorhmendonca22@gmail.com) on 2016-07-14T18:34:53Z No. of bitstreams: 1 Tese_Victor_14_07_2016 final.pdf: 911359 bytes, checksum: 60f1e386da3b1337919d14a76237ba08 (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: O título presente na ficha catalográfica e capa do trabalho está diferente do título que consta na folha de aprovação. Por favor, corrija as informações e realize uma nova submissão Agradecemos a compreensão. on 2016-07-14T18:45:52Z (GMT) / Submitted by Victor Hugo Mendonça (victorhmendonca22@gmail.com) on 2016-07-14T19:37:52Z No. of bitstreams: 1 Tese_Victor_14_07_2016 final2.pdf: 910821 bytes, checksum: 1c2a6fac92c5cd96775707dcc1b13a52 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-07-15T19:43:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mendonca_vh_dr_araca.pdf: 910821 bytes, checksum: 1c2a6fac92c5cd96775707dcc1b13a52 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-15T19:43:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mendonca_vh_dr_araca.pdf: 910821 bytes, checksum: 1c2a6fac92c5cd96775707dcc1b13a52 (MD5) Previous issue date: 2016-05-20 / A endometrite é um dos problemas de maior frequência e relevância na reprodução de éguas. Os objetivos deste trabalho foram determinar o perfil das concentrações de IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-6, IL-10 e IL-4 presentes no soro sanguíneo e no lavado uterino de éguas com endometrite naturalmente adquirida e naquelas clinicamente saudáveis, bem como definir o padrão da resposta imune (TH1 e TH2); observar se a inflamação local no útero pode gerar inflamação sistêmica; e, verificar se o lavado uterino e o tratamento com enrofloxacina alteram o perfil de concentração das citocinas nestas éguas. Foram utilizadas 12 éguas da raça Quarto de Milha incluídas em programa de transferência de embriões e subdivididas em 2 grupos, com 6 animais cada: GC (animais sadios) e GE (animais com endometrite). Amostras de soro e lavado uterino foram colhidas nos dias 1 (início do cio), 2, 3, 4 e 5 dias após o início do cio. As concentrações de TNF-α, IL-2 e IFN-γ (TH1); IL-4, IL-6, e IL-10 (TH2) foram mensuradas por citometria de fluxo pelo método Cytometric Bead Array (CBA). As diferentes citocinas avaliadas nas amostras de lavado uterino, à exceção da IL-4, apresentaram concentrações mais elevadas em éguas do GE comparadas às do GC no dia 1. A utilização de lavados uterinos seriados associados a antibioticoterapia sistêmica não provocaram alterações significativas nas concentrações de citocinas presentes no útero de éguas do GC. As concentrações séricas de citocinas não diferiram entre os grupos. Nossos resultados estabeleceram o perfil de concentração de TNF-α, IFN-, IL-2, IL-6 e IL-10 bem como demonstraram que o padrão TH1 predominou sobre o TH2 no útero de éguas do GE quando comparado ao perfil de animais do GC no dia 1. Como ambas as vias estavam ativadas, sugere-se que o padrão TH0 esteja atuante no ambiente uterino de éguas com endometrite naturalmente adquirida. O tratamento com lavagens uterinas seriadas e antibiótico sistêmico foi eficiente em reduzir a concentração de citocinas no lavado uterino de éguas com endometrite em 72 horas, equiparando-se com os níveis do grupo de éguas saudáveis. / Endometritis is one of the most frequent and relevant diseases in mares. The goals of this study were to determine the profile concentration of cytokines such as IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-6, IL-10 and IL-4 present in blood serum and uterine lavage of mares with naturally acquired endometritis and those clinically healthy, well as set the pattern of immune response (TH1 and TH2); see if local inflammation in the uterus can cause systemic inflammation; and check whether the uterine lavage and the treatment with enrofloxacin alter the concentration profile of cytokines in these mares. Twelve Quarter Horse mares from an embryo transfer program were divided into 2 groups, with 6 animals each: control group (CG, healthy animals) and experimental group (EG, animals with endometritis). Blood serum and uterine lavage samples were collected on days 1 (onset of estrus), 2, 3, 4 and 5 (after onset of estrus). Concentrations of TNF-α, IL-2 and IFN-γ (TH1); IL-4, IL-6, and IL-10 (TH2) were measured by flow cytometry using the Cytometric Bead Array method (CBA). All cytokines, but not IL- 4, evaluated in the uterine lavage samples showed higher concentrations in mares with endometritis compared to healthy animals on day 1. The use of serial uterine lavages associated with systemic antibiotic therapy did not cause significant changes in concentrations of cytokines in the uterus of mares without endometritis. Serum concentrations of cytokines did not differ between groups. Our results established the concentration profile of TNF-α, IFN-, IL-2, IL-6 and IL-10 concentrations and showed that the TH1 immune response predominated over TH2 in the uterus of mares with endometritis when compared to healthy animals on day 1. As both pathways were activated, it is suggested that the TH0 immune response is active in the uterine environment of mares with naturally acquired endometritis. Treatment with serial uterine flushings and systemic antibiotic were effective in reducing the concentration of cytokines in uterine lavage of mares with endometritis in 72 hours, equating to the levels of healthy mares group.

Thesis (MTech (Radiography))--Cape Peninsula University of Technology, 2011. / The focus of this study is on the presentation patterns of invasive cancer of the cervix (CaCx) in Zimbabwe. The study was undertaken at a large referral cancer treatment centre in Harare the capital city of Zimbabwe. The main study question addressed was: Are there any changes in the presentation patterns of invasive CaCx in Zimbabwe? This was subdivided into three sub questions: 1) What are the presentation patterns of invasive CaCx among the Zimbabwean women presenting to the major referral centre in terms of histology, stage of the disease, ages of patients, Human immunodeficiency virus (HIV) status and socioeconomic status? 2) What is the trend in the presentation patterns of invasive CaCx in terms of the study variables during the period of study? 3) Are there any correlations that exist among the study variables? This study was conducted because of the sharp contrast that exists in invasive CaCx presentation patterns and incidence between the developed and developing countries. The incidence is now very low in developed countries while it is continuing to rise in developing countries resulting in death among women at a time when they are supposed to be more effective in their families and the nation at large. A retrospective documentary study of patients' files using an observation check list was done from 1998 to 2010. A systematic sample of four years was selected with 1998 as the base year (1998, 2002, 2006 and 2010). To strengthen the sample all the available patients' files for the selected years were considered. On average the majority of the patients (91.75%) presented with squamous cell carcinoma (SCC), 5.5% presented with adenocarcinoma and 2.75% with other types of histology. It was found that (89%) of women presented with late stage disease (stage liB and above). The ages of patients at presentation were between 40 to 60 years. Very few patients had recorded HIV status in 1998 and 2002 but a significant increase in proportion of patients with known HIV status was noted in 2006 (48%) and 2010 (73%). The average percentage for HIV positive patients for 2006 and 2010 was 57% and the average percentage for HIV negative patients was 43%. The majority (58.25%) of the patients were of low socioeconomic status. No significant change in trend was noted for variables except for HIV status where there was a downward trend in the percentage of HIV positive patients and an upward trend in the percentage of HIV negative patients. When correlation analysis was done among the variables no significant association was noted among the variables except that a low degree of association was recorded for the ages of patients and HIV status. The association indicated that young invasive CaCx patients are associated with HIV infection at presentation. The recommendations are that the government should mobilize resources towards prevention and control of invasive cancer of the cervix and awareness campaigns on early presentation should increase. Furthermore the cancer registry should expand its services to cover all health institutions nationwide. It is also recommended that further studies should be done on the presentation patterns of invasive CaCx and of HIV status. Longitudinal studies are recommended in order to monitor changes in presentation patterns.

Situou,se a ocorrência do câncer cérvico-uterino no contexto da presença, já expressiva, das neoplasias malignas no perfil de morbimortalidade da população brasileira. Discutiu-se o padrão peculiar de coexistência, no país, de riscos igualmente altos e crescentes para formas de câncer típicas de sociedades em diferentes estágios de desenvolvimento socioeconômico. Em relação ao câncer cervical, verificou-se sua ocorrência mais elevada, e em idades mais precoces,nas regiões menos desenvolvidas do país; a magnitude e distribuição etária em todas as áreas, entretanto, foram compatíveis com as observadas em regiões do mundo com alta frequência da doença. As altas taxas de detecção das lesões precursoras entre os exames citológicos indicam, além de riscos elevados, um atendimento voltado principalmente para a clientela sintomática. Conjecturou- se sobre a ascensão previsível da ocorrência, em função da persistência de precárias condições de vida, da maior exposição a fatores de risco e da incipiência das atividades de controle. Foram discutidas as baixas cobertura e efetividade das ações de controle, e os problemas determinantes dessa situação em cada nível da atividade. Criticou-se a inadequação das normas vigentes em relação a população-alvo e a periodicidade do exame colpo citológico, assim como a insuficiência dos parâmetros de avaliação existentes. Sugeriram-se alguns indicadores e delinearam-se os aspectos fundamentais de um sistema integrado de informações operacionais e epidemiológicas. / Was situated the occurrence of cervical cancer in the context of the presence, as expressive of malignant neoplasms in the morbidity profile of the population. Discussed the peculiar pattern of coexistence in the country, also high and rising for typical forms of cancer societies at different stages of socioeconomic development risks . In relation to cervical cancer , there was a higher occurrence , and at younger ages , in the less developed regions of the country, the magnitude and age distribution in all areas , however, were consistent with those observed in regions of the world with high frequency of the disease. The high rates of detection of precursor lesions between the cytological examinations indicate, in addition to high risks, service catering mainly for symptomatic clientele. Is conjectured about the predictable rise of occurrence, depending on the persistence of poor living conditions, greater exposure to risk factors and the paucity of control activities. Low coverage and effectiveness of control measures, and the determinants of this situation problems at every level of activity were discussed. Criticized the inadequacy of rules in relation to the target population and the frequency of colpo cytological examination, as well as the failure of the parameters of assessment. Have been suggested and outlined some indicators are the key aspects of an integrated operational and epidemiological information.

The objective of this study was to evaluate the effect of intrauterine plasma infusion on conceiving rate in selected group of mares during the breeding seasons 2008 and 2009. The fresh sperm insemination was followed by the infusion of self-plasma and subsequently the successivity of the insemination was compared with the control group of mares. Next, there were observed following factors which could influence the effectiveness of conceiving: age of the mares, number of insemination doses, size and location of preovulating follicle, month of the year. There was also evaluated the difference between multiparous (with one and more births) and nulliparous mares. The statistical analyses were proceeded by the use of contingency tables and the one-factorial analysis of variance (ANOVA). Next, the regression and correlation analyses were used. All the statistical procedures were performed with the use of statistical software STATGRAPHICS Plus 5.0. The results showed that there were the same results in observing of both number of insemination doses and fertile heats evaluation. There was found no significant effect of plasma infusion on the conceiving rate. In the model with the effects of plasma infusion and the age of the mare there were found statistically significant differences. It means that the effect of plasma infusion on conceiving rate was confirmed in the mares of the age up to 14 years. The result of the following analysis is the non-significant difference in conceiving rate between the groups of multiparous mares with or without plasma infusion.

Em bovinos, a mortalidade embrionária associada a falhas no processo de reconhecimento materno da prenhez atinge 30 a 40%. O sucesso da prenhez , depende de uma apropriada interação bioquímica entre o endométrio materno e o concepto. Objetivou-se a validação de uma técnica cirúrgica de implantação de cateteres intrauterinos para a obtenção de fluídos em diferentes dias do ciclo estral e da prenhez inicial em bovinos, de modo a permitir a análise sistemática e contínua das secreções do microambiente uterino. O funcionamento dos cateteres foi testado e alterações morfológicas conseqüentes da implantação dos cateteres foram descritas. Cateteres de silicone foram inseridos cirurgicamente nos cornos uterinos e exteriorizados pelo flanco de nove vacas Holandesas. As vacas foram divididas para receberem (n = 6) ou não (n = 3) embriões no dia 7 de um ciclo estral sincronizado (dia 0 = dia do cio). Microlavagens uterinas foram realizadas nos dias 14, 16, 18 e 20 pós-estro. Todas as vacas foram abatidas no dia 20, seus tratos reprodutivos submetidos à análise macroscópica e tecidos uterinos coletados e fixados para análise histopatológica. A técnica utilizada: (1) permitiu a obtenção de fluídos uterinos, (2) resultou em 0% de taxa de prenhez, (3) causou afecções nos órgãos reprodutivos, como aderências, infecções focais e endometrites e (4) afetou o tecido uterino com inflamações agudas e crônicas além de fibroplasias e dilatações glandulares. Conclui-se que a implantação e operação dos cateteres e as alterações morfológicas foram incompatíveis com a manutenção da prenhez. A abordagem cirúrgica testada não foi adequada para estudar o microambiente uterino de vacas prenhez prenhes / In cattle, embryonic death related to failure in the maternal recognition of pregnancy is as high as 30 to 40%. The success of pregnancy depends on appropriated biochemical interactions between the maternal endometrium and conceptus. The purposed of this dissertation was to validate a surgical technique to place and operate of intrauterine catheters to obtain fluid on different days of the estrous cycle and early pregnancy in cows, such technique should allow a systematic and continuous analysis of the uterine microenvironment secretions. Function of catheters was tested and resulting morphological changes were described. Silicon indwelling catheters were surgically placed in both uterine horns and exteriorized by the flank in 9 Holstein cows. Cows were divided to either receive (n = 6) or not (n = 3) embryo transfer on the day 7 of a synchronized estrous cycle (day 0 = day of estrus). Uterine flushing was performed through the catheters on days 14, 16, 18 and 20 pos-estrus. All cows were slaughtered on day 20 and reproductive tracts were colleted and prepared for histological analysis. In summary, the technique used: (1) allowed collection of uterine fluids, (2) resulted in 0% pregnancy rate, (3) caused pathologies in the reproductive organ, such as adhesions, focal infections and endometritis and (4) affected the uterine tissue with acute and chronic inflammation besides fibroplasias and glandular dilation. It was concluded that implantation and operation catheters the resulted in morphological changes which were incompatible with maintenance of pregnancy. The surgical approach tested was not suitable to study the uterine microenvironment in pregnant cows

A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma doença neuromuscular fatal, a mais comum das distrofias musculares, causada pela ausência da proteína distrofina, componente importante do complexo glicoproteínadistrofina, que envolve as células musculares lisas, cardíacas e esqueléticas, estabilizando a membrana dessas células durante contrações e relaxamentos. Por ser uma doença genética ligada ao cromossomo X, acomete indivíduos do sexo masculino, sendo que casos raros de meninas afetadas também são relatados. Indivíduos afetados pela DMD apresentam alterações significantes na composição corpórea, comparados com a população normal. Cães da raça golden retriever que possuem distrofia muscular (GRMD) representam o melhor modelo animal para ensaios terapêuticos na busca do tratamento da DMD, sendo esses animais fundamentais para o estudo do desenvolvimento dessa anomalia, devido ao fato de apresentarem genes e sintomas clínicos homólogos aos dos pacientes humanos. A similaridade entre as duas doenças é surpreendente, ambas são caracterizadas por precoce miopatia degenerativa, com progressiva necrose, fagocitose, deposição de cálcio e fibrose endomisial e perimisial. O foco principal deste trabalho foi esclarecer dúvidas quanto ao comportamento da musculatura lisa dos animais distróficos e portadores da GRMD, para se conhecer os efeitos da doença nesse tipo de tecido. Para avaliação da musculatura lisa uterina foram utilizados quatro úteros de cadelas golden retriever saudáveis, cinco úteros de portadoras do gene e quatro úteros de animais afetados pela GRMD. Analisando as fotomicrografias uterinas dos grupos, podemos notar que não há diferenças morfológicas através dos estudos histológicos convencionais. Porém, quando analisamos as fotomicrografias polarizadas , nota-se nas cadelas saudáveis exclusivamente colágeno do tipo III, de coloração esverdeada. Quanto às portadoras do gene da GRMD, observa-se colágeno predominantemente vermelho, do tipo I, e pouco em verde, tipo III. Fotomicrografias das fêmeas afetadas pela GRMD encontraram colágeno tipo III na parte interna do endométrio, miométrio e perimétrio, e colágeno tipo I em epitélio vascular, porém ambos em menor quantidade. É possível visualizar colágeno entre as fibras musculares através da luz polarizada. Para a avaliação da digestibilidade dos nutrientes em cães GRMD e sua capacidade absortiva, foram utilizados nove cães GRMD, sete fêmeas portadoras e dez animais saudáveis; todos receberam a mesma dieta adicionada de oxido crômico. O período experimental constou de um intervalo de 10 dias, sendo os cinco primeiros dias de adaptação e os cinco restantes de coleta de amostras. Os coeficientes de digestibilidade aparente (CDAs) obtidos pelos grupos estudados foram comparados e analisados: os resultados indicaram que os cães com GRMD avaliados não apresentaram redução do aproveitamento nutricional. Novas pesquisas que avaliem o gasto energético e composição corpórea destes animais são necessárias para melhor compreensão dos mecanismos envolvidos no emagrecimento e perda de peso que apresentam. Para a avaliação do tempo de trânsito gastrintestinal (TTGI) em cães golden retriever saudáveis, portadores e afetados pela distrofia muscular, foram utilizados 18 cães divididos em três grupos animais saudáveis, portadores e afetados pela GRMD, com seis cães cada. Os animais foram acondicionados em canis individuais e receberam a mesma dieta; esferas de polietileno (BIPS) impregnadas com bário foram fornecidas durante a alimentação. Cada animal recebeu 10 marcadores de tamanho grande (5 mm de diâmetro) e 30 marcadores de tamanho pequeno (1.5mm de diâmetro). Os animais foram radiografados nos momentos antes (basal) da 1ª refeição, para confirmação da ausência de conteúdo alimentar e fecal no trato gastrintestinal, e após a alimentação, em intervalos de duas horas, até que os marcadores atingissem o cólon. Resultados apontaram que os cães GRMD avaliados apresentam TTGI mais rápido quando comparados aos demais grupos. Este trabalho comprovou que a mm. lisa de cães distróficos é, de diversas maneiras, afetada pela doença, apresentando tanto alterações morfológicas como morfofuncionais. Muitos estudos nessa área são necessários para melhor compreensão dos mecanismos da enfermidade, bem como maneiras de intervenção para melhoria da qualidade de vida dos indivíduos afetados. Cães GRMD(s) são o melhor modelo animal para estudos pré-clínicos da DMD, assim esses resultados são muito relevantes para aprimoramento e melhora de manejo em biotérios que abrigam esses animais e para extrapolação de dados na própria medicina / Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a fatal neuromuscular disease, it is the most common muscular dystrophy caused by absence of dystrophin protein, an important component of the dystrophin-glycoprotein complex, involving cell membranes of smooth, cardiac and skeletal cells, stabilizing these cells during contractions and relaxations. Because it is a genetic disorder linked to the X chromosome, it affects males, with rare cases of girls affected also reported. Individuals affected by DMD show significant changes in body composition, compared with the normal population. Golden retriever dogs who have muscular dystrophy (GRMD) represent the best animal model for therapeutic trials in the treatment of DMD,; these animals are fundamental to the study of the development of this anomaly, due to the fact that they show clinical symptoms and genes homologous to the human patients. The similarity between the two diseases is staggering; both are characterized by early degenerative myopathy with progressive necrosis, phagocytosis, calcium deposition and endomysial and perimysial fibrosis. The main focus of this thesis was to answer questions about the behavior of smooth muscles of dystrophic animals and carriers of GRMD, to know the effects of the disease in this tissue type. For evaluation of uterine smooth muscle we utilized four uteri of golden retriever healthy bitches, five uteri of gene carriers and four uteri of animals affected by GRMD. Analyzing the uterine photomicrographs of the groups we note that there are no morphological differences in conventional histological studies. However, when we analyze the polarized photomicrographs, we note that in healthy bitches we can see only collagen type III of greenish color. As regards the carriers of the GRMD gene, there is predominantly red collagen , type I, and very little green, type III. Photomicrographs of females affected by GRMD found type III collagen inside the endometrium, myometrium and perimetrium and collagen type I in vascular epithelium, but both in a very little quantity. It is possible to visualize collagen between muscle fibers by polarized light. For the assessment of nutrient digestibility in dogs GRMD and its absorptive capacity, we used nine GRMD, seven carriers females and ten healthy animals and all of them received the same diet with added chromic oxide. The experimental period consisted of an interval of 10 days, with the first five days to adaptation and the last ones to sample collection. The apparent digestibility coefficients obtained by the groups were compared and analyzed; the results showed that dogs with GRMD evaluated showed no reduction in energy utilization. The experimental period consisted of an interval of 10 days, with the first five days to adaptation and the last of them to sample collection. The apparent digestibility coefficients obtained by the groups were compared and analyzed; the results showed that dogs with GRMD evaluated showed no reduction in nutritional absorption. New research to assess energy expenditure and body composition in these animals are needed to a better understanding of the mechanisms involving reduction and weight loss they present. For the assessment of gastrointestinal transit time (TTGI) in golden retriever dogs healthy carriers and affected by GRMD 18 dogs divided into three groups were used - healthy animals, carriers and affected by GRMD, with six dogs each. The animals were placed in individual cages and were fed the same diet; polyethylene spheres (BIPS) impregnated with barium were supplied during feeding. Each animal received 10 markers large size (5mm diameter) and 30 markers small size (1.5mm diameter). Radiographs were taken in the moments before (baseline) the 1 st meal, to confirm the absence of food and fecal content in the gastrointestinal tract and after feeding at two-hour intervals until markers reach the colon. Results indicated that GRMD dogs evaluated showed TTGI faster when compared to the other groups. This thesis has shown that the smooth muscles of dystrophic dogs are, in many ways, affected by the disease, with both morphological and morphofunctional alterations; many studies in this area are needed so we can better understand the mechanisms of disease, as well as ways of intervention to improve the quality of life of affected individuals. GRMD dogs are the best animal model for preclinical studies of DMD, so these results are very relevant to enhancement and improvement of management in bioteries these animals have

Orientador: Áureo Tatsumi Yamada / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T23:37:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bianco_JuaresEdnaldoRomero_D.pdf: 17105644 bytes, checksum: 64a116dab9ebcd72e51d45d800243157 (MD5) Previous issue date: 2018-08-16T20:37:19Z / Resumo: As células Natural Killer uterinas (uNK) participam da interação materno fetal atuando ativamente como elemento imuno-modulador do micro-ambiente uterino na gestação bem sucedida. Apesar das uNK possuírem um potencial lítico, relacionado com a sua resposta imune inata, este não se manifesta em uma gestação normal. Por outro lado, diversos relatos sugerem o envolvimento destas células em abortos e interrupções da gestação. No presente trabalho, foi avaliado o possível envolvimento das células uNK em atividade citotóxica sob a influência "in loco" do líquido amniótico no útero pseudogestante de camundongos. Para tanto, camundongos fêmeas foram acasaladas com machos vasectomizados, e os cornos uterinos injetados com óleo mineral para indução do útero pseudogestante. O líquido aminótico coletado em condições assépticas dos sítios de desenvolvimento embrionário normal no 10° dia de gestação (dg), foi inoculado no volume constante de 3uL através de micro-injeção na parede uterina da região antímesometrial nosnódulos de decidualização dos animais no 9o dia de pseudogestação (dpg). Amostras dos sítios inoculados com líquido amniótico foram coletadas nos intervalos de 30 minutos, 1, 2 e 6 horas para análises morfológicas, citoquímicas, imunocitoquímicas, imunoquímica e expressões gênicas. Como controles, foram utilizados úteros gestantes normais no 8o dg e úteros pseudogestantes submetidos à introdução de agulha hipodérmica na parede do corno uterino e/ou inoculados com 3uL de solução fisiológica estéril.Pelas análises morfológicas realizadas em cortes histológicos avaliados pela coloração de hematoxilina-eosina, o endométrio decidualizado da região mesometrial e antímesometrial do útero pseudogestante inoculado com salina ou simples introdução da agulha hipodérmica não apresentaram variações. Igualmente, a morfologia das células uNK através da citoquímica com lectina DBA, não apresentou diferenças entre os grupos controles. Ainoculação de LA no útero pseudogestante promoveuhiperemia local após 30 minutos que, em cortes histológicos, foi constatada como estagnação do sangue e dilatação dos vasos venosos no endométrio. Nestes locais foram constatadas alterações degenerativas nas células uNK com perda de reatividade da superfície celular e no conteúdo dos grânulos através da lectina DBA. A análise immunocitoquímica, RT-PCR e ELISA para as citocinas IFN-y e TNF-a e, das proteínas perforina e granzima-A revelaram que, o líquido amniótico acentuava a expressão destas moléculas ou dos seus genes relacionados à resposta pró-inflamatória, enquanto não alteravam a expressão de moléculas anti-inflamatórias como a IL-10. A geração do óxido nítrico (NO), através da quantificação de nitrato e nitrito, demonstrou um aumento nas concentrações, principalmente do nitrito após a inoculação do líquido amniótico. O teste de TÚNEL e a imunocitoquímica para anti-caspase-3 revelaram aumento de marcações positivas nas células uNK e deciduais sob o efeito do líquido amniótico em relação aos grupo controles, enquanto se verificava uma relação inversa para a imunocitoquímica com o anti-PCNA aos 2 a 6 horas após líquido amniótico. O conjunto dos resultados obtidos comprovam que as células uNK são sensíveis à ação local do líquido amniótico, com padrão de resposta compatível à ativação da sua capacidade citotóxica e pró-inflamatória relacionada com a resposta imune inata. / Abstract: Uterine Natural Killer (uNK) cells participate on the maternal fetus interaction actively playing as a immunomodulator element of the uterine micro-enviroment during a well successful gestation. Despite uNK having a lytic potencial that is related to its innate immune responsive, this does not manifest in a normal gestation. Moreover, several reports suggest the involvement of these cells in abortions and interruptions of gestation. In this study, we investigated the possible involvement of uNK cells in cytotoxic activity under the influence "in loco" of amniotic fluid in the uterus of mice pseudopregnant. For this, female mice were mated with vasectomized males and the uterine horns injected with mineral oil for induction of the pseudopregnant uterus. The amniotic fluid collected aseptically from sites of normal embryonic development in the 10 th day of gestation (dg) was inoculated on the constant volume of 3ul_ through microinjection on the uterine wall in the antimesometrial region into uterine nodules from animals on the 9th day of pseudopregnancy (dpg). Samples of inoculated sites with amniotic fluid were collected at intervals of 30 minutes, 1, 2 and 6 hours for morphological, cytochemical, immunocytochemical, immunochemical and relative gene expressions analyses. As controls, normal pregnant uteri on the 8th dg, and uterus on 9th dpg were submitted to the introduction of a hypodermic needle into the wall of the uterus and/or inoculated with 3uL of sterile saline.For the morphological analysis performed on histological sections evaluated by hematoxylin-eosin, the decidualized endometrium of the mesometrial and antimesometrial regions of the pseudopregnant uterus were inoculated with saline or simple introduction of the hypodermic needle showed no variations. Also, the morphology of uNK cells by DBA lectin cytochemistry, evidenced no differences among control groups.The amniotic fluid inoculation on the pseudopregnant uterus promote Hyperaemia after 30 min, in histological slides that was observed as blood interruption flow and dilatation of the vessels on the endometrium. On these areas it was observed degenerative modifications on uNK cells with loss in the positive reaction to DBA lectin in the cellular membranes and in the granules.The immunocytochemical analysis, RT-PCR and ELISA for the cytokines IFN-y and TNF-a, and the perforin and granzyme-A protein revealed that the amniotic fluid enhanced the expression of these molecules or their genes related to pro-inflammatory response, while not altering the expression of anti-inflammatory molecules such as IL-10.The generation of nitric oxide (NO), was observed through the quantification of nitrate and nitrite that demonstrated an increase in concentrations, primarily of nitrite after inoculation of amniotic fluid.The TUNEL assay and immunocytochemistry for anti-caspase-3 revealed an increase on positive uNK and decidual cells under the effect of amniotic fluid in relation to the control group, while there was an inverse relationship to immunocytochemistry with anti-PCNA at 2 and 6 hours after the amniotic fluid. The overall results show that uNK cells are sensitive to local action of amniotic fluid, compatible with standard response to the activation of their cytotoxic and proinflammatory that are related to the innate immune response. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Versao final mestrado Thiago Vilar.pdf: 739126 bytes, checksum: 66bb2bb01cc8bdf814337ede7b5d1f54 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / The aim of this work was to evaluate the total antioxidant capacity in Holstein cows during the volunteer waiting period on two moments, dry season and raining season, to correlate with variables: glucose levels, Na, K, Ca, AST, ALT, triglycerides, cholesterol, open days and services per conception. Were analyzed 60 animals, subdivided on two groups, dry period (n=30) and raining period (n=30). The experiment began at the calve (d0) and finished 42 days postpartum (d42), and the evaluations were weekly (d0, d7, d14, d21, d28, d35 e d42). The dry period showed THI=72,3 and raining period showed THI=75,9. The respiratory rate was different between the seasons (p<0,001) and within periods (p<0,01). The rectal temperature wasn´t between the seasons (p>0,05), but was different into the periods (p<0,05). The reproductive infections was presented in 56,6% (n=34), being 52,94% during the dry season and 47,05% during the raining season. There are different levels of glucose (p<0,05) between the seasons, less at the calve. The elements that were analyzed and showed more persistent variation was the cholesterol (P<0,05), AST (P<0,05), K (P<0,05) e Ca (P<0,05). The animals of the dry period had less open days (p<0,01) than the other group, but the services per conceptions weren´t significant (p>0,05). The Total antioxidant capacity (CAT) showed difference between raining season and dry season (p<0,05), with more elevated levels during the raining season. At the 42° day postpartum the animals with higher level of CAT had more open days than the others (r=0,37;p<0,05). The cows during the raining season appeared to be more stressed by the hot climate with more significant losses on the reproductive performance. / Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a condição antioxidativa total de vacas holandesas durante o período de espera voluntário em duas estações, chuvosa e seca, e correlacionar com os níveis sanguíneos de glicose, Na, K, Ca, AST, ALT, triglicérides, colesterol, e variáveis reprodutivas, dias em aberto e serviços/concepção. No total foram avaliados 60 animais, subdivididos em dois grupos, seca (n=30) e chuva (n=30). O experimento iniciou no momento do parto (d0) até o 42° dia pós-parto (d42), sendo as avalições realizadas uma vez por semana (d0, d7, d14, d21, d28, d35 e d42). A estação seca mostrou ITU=72,3 e a estação chuvosa ITU=75,9. A FR foi diferente entre os períodos (p<0,001) e dentro dos períodos (p<0,01). A TR não diferiu entre as estações (p>0,05), mas sim dentro dos períodos matutino e vespertino (p<0,05). Dos animais avaliados, 56,6% (n=34) desenvolveram algum grau de infecção do trato reprodutivo, sendo 52,94% na seca e 47,05% na chuva. Houve variação nas concentrações séricas de glicose (p<0,05) entre os períodos, menos ao parto. Também houve variações mais duradouras entre as concentrações de colesterol (p<0,05), atividade da AST (p<0,05), K (p<0,05) e Ca (p<0,05) entre as estações. Os animais da estação seca tiveram menor número de dias em aberto (p<0,01), mas não houve diferença entre o número de serviços por concepção (p>0,05) entre as estações. Houve diferença na capacidade antioxidativa total (CAT) no sangue entre os dois períodos (p<0,05), com maior aumento na estação chuvosa. Animais com elevado CAT ao final do 42° dia pós-parto apresentaram maior número de dias em aberto (r=0,37; p<0,05). Na estação chuvosa, durante o período voluntário de espera, verificou-se a influência do estresse térmico durante o período voluntário de espera e que este fato influencia diretamente os índices reprodutivos subsequentes.

Grande parte das perdas embrionárias ocorrem nas três primeiras semanas após a inseminação e grande parte pode-se atribuir a baixas concentrações de progesterona. Desta maneira, o objetivo do presente experimento foi avaliar os efeitos e a interação entre o escore de condição corporal (ECC) e condição ovariana (EO) em vacas suplementadas com progesterona de longa ação (P4) após IATF sobre a taxa de prenhez em vacas de corte. Neste experimento foram utilizados 1573 vacas de corte, lactantes entre 30 e 60 dias pós-parto. As vacas tiveram a ovulação sincronizada iniciando-se no dia - 10 e foram inseminadas no dia 0. No dia 4, os animais foram blocados de acordo com ECC e EO e ordem de parto e divididos em dois tratamentos: (P4, n = 786) e (Controle, n = 787). Foram feitas avaliações ultrassonograficas dos ovários nos dias -10, 0 e 4, para mensurações de tamanho de folículo e corpo lúteo e no dia -10 foi feita a avaliação do ECC. A taxa de prenhez (P/IA) entre os grupos P4 vs CONTROLE não apresentou diferenças P=0,49. Vacas com ECC &gt; 2,75 tiveram melhora P/IA (P&lt;0,05) comparadas com vacas com ECC &le; 2,5. Vacas com presença de folículo &ge; 8 mm no dia -10 apresentou melhor P/IA (P&lt;0,05) comparadas com vacas com presença de CL ou folículo &lt; 8 mm. Vacas com folículo &ge;8 mm e CL apresentaram maior tamanho de folículo, maior área de CL, no entanto, os animais com presença de folículo &ge; 8 mm apresentaram maior taxa de concepção comparado com os animais com folículo &lt; 8 mm e com presença de CL. Concluimos que a suplementação com P4 após a IATF não melhora as taxas de prenhez, independente do ECC e do EO, no entanto, o ECC e o EO apresentam influências nas taxas de prenhez, onde os animais com melhor ECC no início do protocolo apresentaram melhor EO e maior taxa de prenhez. / Embryo loss commonly occurs in the first three weeks after insemination due to low progesterone (P4) concentrations. Therefore, this study evaluates the effects of body condition score (BCS) and ovarian condition (OC) on pregnancy rates (P/AI) in beef cows supplemented with long-acting P4 after timed artificial insemination (TAI). We used 1573 lactating Nellore cows at 30-60 days postpartum. The animals were pre-synchronized on Day -10 and inseminated on Day 0. On Day 4, they were evaluated for BCS, OC and parturition order and divided into two treatment groups: P4 supplementation (N= 786) and control group (N = 787). Ultrasound exams were performed on Days -10 and 0 to measure follicle diameter and on Day 4 to evaluate corpus luteum (CL) area. BCS was determined on Day -10. P/AI did not vary between P4 supplementation and control treatments (P = 0.49). Cows with BCS &gt; 2.75 had better P/AI than cows with BCS &le; 2.5 (P &lt; 0.05). Cows without CL and with follicle diameter &ge; 8 mm on Day -10 presented better P/AI than cows with follicle &lt; 8 mm or CL (P &lt; 0.05). In conclusion, P4 supplementation after TAI did not improve P/AI. However, BCS and OC affected P/AI and the animals with better BCS at the beginning of the experiment had better OC and P/AI.

Foram utilizados 15 úteros de macacos Rhesus (Macaca mulatta), sendo 5 fêmeas nulíparas, 5 primíparas e 5 pluríparas. Todas as fêmeas eram maduras sexualmente, tinham de 38 a 87 meses de idade e pesavam entre 4,9 a 7,39 Kg. Em todos os animais foram feitos o estudo topográfico, biometria dos órgãos, microscopia de luz e quantificação de colágeno no miométrio. O útero se situa na pelve, sobre a vagina, entre a bexiga urinária e o intestino reto. O útero é do tipo simples, caracterizado por um fundo globóide, localizado sobre a junção com as tubas uterinas, oco, alongado e com contorno piriforme. Pode ser dividido macroscopicamente em quatro regiões: corpo, fundo, istmo e cérvix uterina. Não foram observadas diferenças macroscópicas e de topografia entre as fêmeas nulíparas, primíparas e pluríparas. O comprimento total do útero nas fêmeas nulíparas tiveram média de 4,12 ± 0,2 cm, nas primíparas 4,32 ± 0,26 cm e nas pluríparas 5,14 ± 0,71 cm. Comparando as mensurações entre as três categorias, observou-se que as fêmeas pluríparas possuem as maiores medidas. O endométro é formado por um epitélio prismático simples e uma lâmina própria que contém as glândulas endometriais, que também possui epitélio prismático simples. Em todos os animais estudados, as glândulas endometriais eram tubulares simples e retas. Em relação à distribuição do colágeno no miométrio, o método de Picrossirius Red, permitiu observar uma ampla distribuição do colágeno por todo o compartimento. A cérvix é constituída por um epitélio prismático simples, possui poucas fibras musculares lisas e consiste principalmente em tecido conjuntivo denso. A porcentagem de colágeno encontrado no miométrio das fêmeas nulíparas teve uma média de 26,32 ± 0,82, nas primíparas 29,07 ± 1,01 e nas pluríparas 38,93 ± 1,07, pelo método de coloração de Picrosirius Red. / Fifteen uterus of rhesus macaques (Macaca mulatta) were used, collected from 5 nulliparous, 5 primaparous and 5 pluriparous individuals. All females were sexually mature, they were 38-87 months of age and weighed between 4,9 to 7,39 Kg. All animals were submitted to study topography, biometry of the organs, light microscopy and quantification of collagen in the myometrium. The uterus is located in the pelvis on the vagina between the bladder and rectum. The uterus has a simple type, characterized by a globular background, located on the junction of the fallopian tubes, hollow, elongated and pear-shaped contour. Grossly it can be divided into four parts: body, bottom, isthmus and cervix. No differences were observed macroscopic and topography between nulliparous, rimiparous and pluriparous. The total length of the uterus in nulliparous females had a mean of 4,12 ± 0,2 cm in primiparous 4,32 ± 0,26 cm and 5,14 ± 0,71 cm in pluriparous. Comparing the measurements among the three categories, it was observed that the sows have greater measures. The endometrial epithelium is formed by a simple prismatic and a lamina propria containing the endometrial glands, wich also has a simple prismatic epithelium. In all studied animals the endometrial glands were simple and straight tubular. Regarding the distribution of collagen around the bay. The cervix is composed of a simple prismatic epithelium, has a few smooth muscle fibers and consists mainly of dense connective tissue. The percentage of collagen found in the myometrium of the nulliparous females had an average of 26, 32 ± 0, 82, 29, 07 ± 1, 01 in primiparous and pluriparous 38,93 ± 1,07, through the staining method of Picrosirius Red.