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Studies of the effects photodynamic therapy antimicrobial and gene expression of S. Mutans biofilms and caries dentin / Estudos dos efeitos da terapia fotodinÃmica antimicrobiana na viabilidade e na expressÃo gÃnica de S. mutans em biofilmes e lesÃes de cÃrie dentinÃria

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A aplicaÃÃo da Terapia FotodinÃmica Antimicrobiana - TFA na Odontologia surge como um tratamento eficaz na reduÃÃo das populaÃÃes microbianas presentes nos biofilmes orais e nas lesÃes de cÃrie dental. Nesse contexto, os objetivos desse trabalho sÃo: a)comparar o potencial antimicrobiano da TFA utilizando diferentes fotossensibilizadores e determinar a capacidade de produÃÃo de oxigÃnio singlete para cada um deles (capÃtulo 1); b) determinar o grau de penetraÃÃo do corante azul de orto toluidina em dentina desmineralizada in vitro e in situ utilizando a microscopia confocal Raman (capÃtulo 2); c) avaliar o potencial antimicrobiano da TFA e sua habilidade de alterar a expressÃo dos genes gtfB, gtfC, gbpB e luxSem biofilmes orais de Streptococcus mutans formados in vitro (capÃtulo 3); d) investigar, atravÃs de um ensaio clÃnico, a performance da TFA utilizando a associaÃÃo do azul de orto toluidina e um diodo emissor de luz (capÃtulo 4). Como abordagens metodolÃgicas foram realizados estudos in vitro, in situ e um ensaio clÃnico. Como resultados, observou-se que o azul de orto toluidina foi o Ãnico fotossensibilizador que reduziu significantemente as contagens de S. mutans (p<0,05). Contudo, a geraÃÃo de oxigÃnio singlete nÃo teve relaÃÃo direta com a atividade bactericida da TFA (capÃtulo 1). Hà difusÃo do azul de orto toluidina em dentina sadia e desmineralizada in vitro e in situ, embora o grau de desmineralizaÃÃo nÃo tenha alterado o nÃvel de penetraÃÃo do fotossensibilizador (capÃtulo 2). Embora a TFA tenha sido efetiva na morte de biofilmes de S. mutans formados in vitro, a alteraÃÃo nos genes de virulÃncia foi somente observada para luxS, um gene relacionado ao estresse oxidativo (capÃtulo 3). Finalmente, os resultados do ensaio clÃnico demostraram que lesÃes de cÃrie dentinÃria profundas apresentam diminuiÃÃo na microbiota cariogÃnica quando tratadas com a TFA (capÃtulo 4). Em resumo, a terapia antimicrobiana fotodinÃmica à efetiva em cultura planctÃnica e biofilmes de S. mutans, o fototossensibilizador utilizado à capaz de penetrar em dentina desmineralizada in vitro e in situ, a TFA altera a expressÃo de gene relacionado à formaÃÃo de biofilme e reduz significativamente a microbiota in vivo. Contudo protocolos clÃnicos seguros devem ser estabelecidos para que sua utilizaÃÃo clÃnica possa ser indicada. / The  application  of  Antimicrobial  Photodynamic  Therapy   (PACT)  in  dentistry Â
emerged  as  an  effective  treatment  in  reducing  microbial  populations  present  in  oral  biofilms Âand Âdental Âcaries Âlesions. ÂIn Âthis Âcontext, Âthe Âobjectives Âof Âthis Âwork Âare: Âa) Âto  compare  the  antimicrobial  effect  of  photodynamic  therapy  using  different  photosensitizers  and  evaluate  the  production  of  singlet  oxygen  for  each  of  them  (chapter Â1), Âb) Âto Âdetermine Âthe Âpenetration Âdegree Âof Âtoluidine Âblue Âortho Âdye Â(TBO)  in Âin Âvitro Âand Âin Âsitu Âdemineralized Âdentin Âusing Âconfocal ÂRaman Âmicrospectroscopy  (chapter  2),  c)  to  evaluate  the  antimicrobial  effect  of  photodynamic  therapy  and  its  ability  to  alter  the  expression  of  genes  gtfB,  gtfC,  gbpB  and  luxS  in  Streptococcus  mutans Âoral Âbiofilms Âformed Âin Âvitro Â(Chapter Â3), Âd) Âto Âinvestigate Âthe Âperformance Âof  PACT Âby Âthe Âassociation Âof Âtoluidine Âblue Âortho Âand Âa Âlight Âemitting Âdiode Âusing Âa  clinical  trial  (chapter  4).  As  methodological  approaches,  in  vitro,  in  situ  and  clinical  studies  were  performed.  The  results  showed  that  the  TBO  was  the  only  photosensitizer,  which  significantly  reduced  the  counts  of  S.  mutans  (p  <  0.05).  However,  the  singlet  oxygen  generation  was  not  directly  related  to  the  bactericidal  activity  of  PACT  (Chapter  1).  The  TBO  penetration  profiles  in  sound  and  demineralized  dentin  in  vitro  and  in  situ  were  similar,  besides  different  degrees  of  demineralization  (chapter  2).  While  PACT  has  been  effective  in  killing  S.  mutans  biofilms Âformed Âin Âvitro, Âthe Âchange Âin Âvirulence Âgenes Âwas Âobserved Âonly Âfor ÂluxS, Âa  oxidative  stress  related  gene  (chapter  3).  Finally,  the  results  of  clinical  trial  demonstrated Âthat Âdentin Âcaries Âlesions Âshowed Âa Âdecrease Âin Âthe Âcariogenic Âmicroflora  when  treated  with  PACT  (Chapter  4).  In  summary,  antimicrobial  photodynamic  therapy Âis Âeffective Âto Âkill ÂS. Âmutans Âboth Âas Âplanktonic Âculture Âas Âwell Âas Âbiofilm, Âthe  photosensitizer Âused Âis Âable Âto Âpenetrate Âinto Âdemineralized Âdentin Âin Âvitro Âand Âin Âsitu,  PACT  can  alter  the  expression  of  biofilm  formation  associated  genes,  and  significantly Âreduce Âthe Âin Âvivo Âmicroflora. ÂHowever Âsafe Âclinical Âprotocols Âshould Âbe  established Âfor Âclinical Âuse Âmay Âbe Âindicated.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:6137
Date17 December 2012
CreatorsJuliana Paiva Marques Lima Rolim
ContributorsNadia Accioly Pinto Nogueira, Lidiany Karla Azevedo Rodrigues, MÃrcia Maria de Negreiros Pinto Rocha, Cristiane Tomaz Rocha, Rafael Nobrega Stipp
PublisherUniversidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Odontologia, UFC, BR
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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