[pt] Os glicocorticóides sintéticos tais como a triancinolona
acetonido e a
prednisolona não possuem fluorescência natural e nem são
induzidos a fluorescer
por meio do procedimento padrão para glicocorticóides
naturais, que consiste no
tratamento com ácido sulfúrico concentrado. No presente
trabalho, um
procedimento de derivação fotoquímica para triancinolona
acetonido e
prednisolona foi desenvolvido e cuidadosamente otimizado
com o intuito de se
obter derivados fluorescentes estáveis que permitiram
elaborar um método
espectrofluorimétrico para determinação dos mesmos em
formulações
farmacêuticas. Este procedimento consistiu na exposição à
radiação ultravioleta
(300 nm) de soluções ácidas dos glicocorticóides sintéticos
em reator fotoquímico.
Parâmetros experimentais, tais como tipo e concentração do
ácido, temperatura e
tempo de aquecimento, sistema de solventes e tempo de
exposição ao UV se
mostraram críticos e por isso foram cuidadosamente
estudados. As características
do reator também se mostraram importantes para o sucesso do
procedimento. A
intensidade da fluorescência (excitação em 240 nm e emissão
em 350 nm) e a
estabilidade dos fotoprodutos se mostraram apropriados para
permitir o
desenvolvimento de um método espectrofluorimétrico.
Parâmetros instrumentais
importantes, tais como banda espectral de passagem e a
velocidade de varredura
foram otimizados, visando à obtenção da melhor razão sinal
do analito/sinal do
branco e da melhor resolução espectral. Parâmetros
analíticos de mérito, obtidos a
partir das curvas analíticas, revelaram limites de detecção
de 5 e 6 ng mL-1 para
triancinolona acetonido e prednisolona, respectivamente; e
limites de
quantificação de 17 ng mL-1 para a triancinolona acetonido
e 19 ng mL-1 para a
prednisolona. As faixas lineares dinâmicas, nos dois casos,
se estenderam por três
ordens de grandeza com coeficientes de linearidade (r2) de
0,99. Este método
espectrofluorimétrico foi testado em formulações
farmacêuticas, obtendo-se os
melhores resultados para os comprimidos e soluções
injetáveis. Estudos para avaliar o efeito de dois
potenciais interferentes (polimixina B e benzocaína)
também foram realizados. Resultados de recuperação foram
avaliados tomando
como referência os valores indicados na bula do medicamento
e também valores
obtidos com o procedimento de referência (HPLC com detecção
fotométrica UVvis)
utilizado no Jockey Club Brasileiro, obtendo resultados
entre 97 ± 14 e 104 ±
6 %. / [en] The synthetic glucocorticoid such as triamcinolone
acetonide and
prednisolone neither present natural fluorescence nor
fluorescence can be induced
by means of the standard procedure used for natural
glucocorticoids which
consists on a treatment with concentrated sulfuric acid. In
the present work, a
photochemical derivatization procedure for these two
synthetic glucocorticoids
was developed and carefully optimized aiming the obtantion
of fluorescent
derivatives stable enough to allow the development of a
spectrofluorimetric
method for determination of these analytes in
pharmaceutical formulations. The
photochemical derivatization procedure consisted on the
exposure of acidic
solutions of these synthetic glucocorticoids to the
ultraviolet radiation (300 nm) in
a photochemical reactor. Experimental parameters such as
type and concentration
of the acid, temperature and heating time, solvent system
and UV exposition time
have shown to be critical and therefore they were carefully
studied. The design of
the photochemical reactor) has also shown to be relevant
for the success of the
procedure. The intensity of the fluorescence (with maximum
excitation and
emission wavelenghts at 240 nm and 350 nm respectively) and
the stability of
these photoproducts, have shown to be appropriated for the
development of a
spectrofluorimetric method. Important instrumental
parameters such as spectral
bandpass and scan velocity have been optimized aiming the
achievement of best
signal-to-blank ratio and spectral resolution. Analytical
parameters of merit,
obtained from the analytical curve, have indicated limits
of detention of 5 and 6
ng mL-1 for triamcinolone acetonide and prednisolone,
respectively, and limits of
quantification of 17 ng mL-1 for triamcinolone acetonide
and 18 ng mL-1 for
prednisolone. The linear dynamic range for both analytes
extended over three
orders of magnitude with linear coefficients (r2) of 0,99.
The spectrofluorimetric
method was tested by the analysis of pharmaceutical
formulations, with best performance for tablets and
injectable solutions. A study to evaluate the effect of
two potential interferents (polimixine B and benzocaine)
has also been made.
Recovery results were evaluated using both, the reference
values indicated in the
medicine instructions and concentration values obtained
using the reference
procedure (HPLC with UV-visible photometric detection) used
in the Brazilian
Jockey Club. Satisfactory recovery results were achieved
(between 97 ± 14 and
104 ± 6 %).
| Identifer | oai:union.ndltd.org:puc-rio.br/oai:MAXWELL.puc-rio.br:6260 |
| Date | 08 April 2005 |
| Creators | ANETE LOPES COELHO |
| Contributors | RICARDO QUEIROZ AUCELIO |
| Publisher | MAXWELL |
| Source Sets | PUC Rio |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | TEXTO |
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