Στο κεντρικό νευρικό σύστημα υπάρχουν διακριτές περιοχές με αμιγώς αισθητική λειτουργία κι άλλες με αμιγώς κινητική. Υπάρχουν ωστόσο και περιοχές, των οποίων η λειτουργία είναι να συντονίζουν
ολόκληρο το νευρικό σύστημα. Σημαντικό ρόλο σε αυτόν το συντονισμό έχουν οι χολινεργικοί και οι μονοαμινεργικοί νευρώνες, οι οποίοι με τους νευροδιαβιβαστές που εκκρίνουν, μπορούν να ελέγχουν
μερικές από τις πιο περίπλοκες λειτουργίες του ΚΝΣ (μνήμη, δραστηριοποίηση, διάθεση, libido και πολλές
άλλες).
Η Ρ4 είναι μια πρωτεΐνη που ανακαλύφθηκε μόλις το 2004. Ανήκει στην οικογένεια των
μεταφορέων SLC10 και μοιράζεται αρκετά κοινή δομή με τα υπόλοιπα μέλη, παρόλο που εκφράζεται σε
εντελώς διαφορετικές περιοχές από αυτά. Η μοναδικότητα της Ρ4 έγκειται στο ότι είναι ένας
διαμεμβρανικός νευροδιαβιβαστής που εντοπίζεται τόσο στους χολινεργικούς όσο και στους
μονοαμινεργικούς νευρώνες, γεγονός που την καθιστά τον μόνο διαβιβαστή με διτή παρουσία και στα
δύο αυτά συστήματα. Ωστόσο, δεν υπάρχουν ακόμη πολλές πληροφορίες για τον ακριβή εντοπισμό της
σε αυτούς τους νευρώνες ούτε για το μήνυμα το οποίο μεταφέρει.
Προηγούμενα πειράματα έδειξαν ότι η Ρ4 σχετίζεται με τον έλεγχο στην έκκριση της ντοπαμίνης. Η
αρχική μας υπόθεση είναι ότι αυτό επιτυγχάνεται μέσω κάποιας αλληλεπίδρασης της Ρ4 και της VMAT2,
η οποία είναι υπεύθυνη για την απελευθέρωση ντοπαμίνης από τα συναπτικά κυστίδια. Μια τέτοια
σχέση, θα μπορούσε να δικαιολογηθεί αν οι δύο αυτές πρωτεΐνες εντοπίζονται στο ίδιο συναπτικό
κυστίδιο. Προκειμένου να επαληθεύσουμε αυτήν την υπόθεση, χρησιμοποιήσαμε τη μέθοδο της
Ανοσοκατακρήμνησης. Τα αποτελέσματα μέχρι στιγμής είναι ενθαρρυντικά και με μερικές
βελτιστοποιήσεις, η μέθοδος αυτή θα μπορούσε να επαληθεύσει αυτήν την υπόθεση.
Προκειμένου να διερευνηθεί περαιτέρω η λειτουργία της Ρ4, μελέτες συμπεριφοράς καθώς και
φαρμακολογικές μελέτες πραγματοποιήθηκαν σε γενετικά τροποποιημένα ποντίκια, τα οποία δεν
μπορούν να συνθέσουν Ρ4. Τα αποτέλεσματα έδειξαν ότι η Ρ4 δεν επηρεάζει τη λειτουργία της μνήμης,
ωστόσο ίσως σχετίζεται με την ανάληψη πρωτοβουλίας και την επιθυμία ανταμοιβής. Παράλληλα, οι
δοκιμές με αμφεταμίνη επαλήθευσαν ότι η Ρ4 σχετίζεται με την έκκριση ντοπαμίνης. Μελέτες με
φλουοξετίνη έδειξαν πιθανή επίδραση της P4 στην έκκριση σεροτονίνης, η οποία ωστόσο δεν ήταν
αρκετά ξεκάθαρη προς το παρόν. Τα πειράματα αυτά αποκάλυψαν ακόμη παράγοντες οι οποίοι μπορούν
να επηρεάσουν την έκβαση των δοκιμών σε γενετικά τροποποιημένα ποντίκια και οι οποίοι θα πρέπει να
λαμβάνονται υπόψη κατά το σχεδιασμό μελλοντικών πειραμάτων.
Οι ιδιότητες της Ρ4 δεν έχουν κατανοηθεί ακόμα πλήρως και απαιτούνται πολλά επιπλέον
πειράματα προκειμένου αυτές να αποκαλυφθούν. Νέες φαρμακολογικές μελέτες έχουν ήδη σχεδιαστεί,
ενώ παράλληλα σύγχρονες μοριακές τεχνικές έχουν επιστρατευθεί ώστε να ρίξουν φως στην ακριβή της
τοποθεσία. / This master thesis summarizes the efforts to identify the location and the behavioural
effect of P4, a recently discovered protein. P4 belongs to the family of sodium‐dependent bile acid transporters (SLC10), whose first two members are expressed in the gastrointestinal system. However, P4 itself shows a wide expression pattern in various areas of the Central Nervous System. According to electron microscopy, in situ and immunohistochemistry studies, P4
is expressed specifically in both the cholinergic and the monoaminergic terminals, two systems that are responsible for various neurologic and psychiatric disorders. Previous cocaine
provocation in KO animals indicated a possible effect of P4 in the release of dopamine. Since
VMAT2 is responsible for the transfer of dopamine into the synaptic vesicles, the relation
between P4 and VMAT2 needs to become clear. Using Immunoprecipitation, we tried to
distinguish if P4 and VMAT2 share the same synaptic vesicle. Moreover, studies in animal
models were used in order to unravel the function of P4: the Radial Arm Maze assessment
showed no influence of P4 on memory but a possible effect in the reward system, amphetamine
provocation showed that KO animals are more affected by amphetamine, while fluoxetine
provocation indicated a possible effect of P4 in serotoninergic neurons. Tests in animals with
different genetic origin revealed several factors that can affect the final outcome of these studies
(age, weight and housing). All this data will help us design our future studies and cast more light
in the properties of P4.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:upatras.gr/oai:nemertes:10889/4450 |
| Date | 08 July 2011 |
| Creators | Γεωργιόπουλος, Χαράλαμπος |
| Contributors | Emilsson, Karolina, Λυγερού, Ζωή, Georgiopoulos, Charalampos, Λυγερού, Ζωή, Μανδαμαδιώτης, Θεόφιλος, Ταραβήρας, Σταύρος |
| Source Sets | University of Patras |
| Language | English |
| Detected Language | Greek |
| Type | Thesis |
| Rights | 12 |
| Relation | Η ΒΚΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. |
Page generated in 0.0024 seconds