Actinobacillus pleuropneumoniae (App) est l’agent étiologique de la
pleuropneumonie porcine, une infection pulmonaire contagieuse chez les
porcs. Parmi les nombreux mécanismes de virulence retrouvés chez les
bactéries, la formation de biofilms joue souvent un rôle important dans la
pathogenèse. Il a été récemment démontré qu’App avait la capacité de former
des biofilms in vitro. Dans notre laboratoire, la formation de biofilms par App
a été évaluée en microplaques dans différents milieux de culture. Nous avons
démontré que la souche de référence de sérotype 1 est capable de former des
biofilms. Le but de ce travail est d’identifier des gènes impliqués dans la
biosynthèse et dans la régulation de l’expression des biofilms chez App.
L’objectif de cette étude était de générer une banque de mutants d’App
4074NalR à l’aide du transposon mini-Tn10. Cette banque de 1200 mutants a
été criblée à l’aide du modèle in vitro de formation de biofilms en
microplaques et en tubes : 24 mutants démontrant une formation de biofilms
modifiée par rapport à la souche mère App 4074NalR ont été sélectionnés et
identifiés, nous permettant ainsi de localiser le site d’insertion du transposon.
Une analyse a permis d’identifier de nouveaux gènes impliqués dans la
biosynthèse et dans la régulation de l’expression des biofilms chez App. Notre
criblage a permis d’identifier 16 gènes connus impliqués dans la formation de
biofilms chez App (hns) ou chez d’autres pathogènes (potD2, ptsI, tig and
rpmF) mais également de nouveaux gènes impliqués dans la formation de
biofilm (APL_0049, APL_0637 and APL_1572). Une caractérisation plus
poussée de ces gènes nous permettra d’améliorer la compréhension des
mécanismes impliqués dans la formation de biofilm chez App. / A. pleuropneumoniae (App) is the causative agent of porcine
pleuropneumonia, a contagious pulmonary infection in swine. Among the numerous
virulence mechanisms found in bacteria, the formation of biofilms often plays an
important role in pathogenesis. It has been recently demonstrated that App has the
ability to form biofilms in vitro. In our laboratory, the formation of biofilms by App
has been evaluated in microplates under different growth conditions. We showed
that the reference strain of serotype 1 is capable of forming biofilms when cultured in
a specific growth medium. The objective of this work is to identifiy genes implicated
in the biosynthesis and regulation of biofilm formation in App.
The objective of this study was to generate a mutant library of App using the
mini-Tn10 transposon. A total of 1200 mutants has been screened with the help of in
vitro models for biofilm formation which use microtiter plates or test tubes; 24
mutants exhibited modified biofilm formation when compared to the parental strain
4074NalR. The selection and identification of these mutants allowed the
identification of the insertion site of the transposon. Analysis revealed novel genes
implicated in biosynthesis and regulation of the biofilm formation in App. Our screen
allowed the identification of genes already associated in biofilm formation of App
(hns) or other pathogens (potD2, ptsI, tig and rpmF). Genes (APL_0049, APL_0637
and APL_1573) that have not yet been associated with biofilm formation were also
identified. Further characterization of the genes mentioned above would permit a
greater understanding of the mechanisms implicated in biofilm formation of App.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/5161 |
| Date | 02 1900 |
| Creators | Grasteau, Alexandra |
| Contributors | Jacques, Mario |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | French |
| Detected Language | English |
| Type | Thèse ou Mémoire numérique / Electronic Thesis or Dissertation |
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