CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A anemia falciforme (AF) à uma hemoglobinopatia causada por uma mutaÃÃo pontual no gene da β-globina caracterizada por eventos vaso-oclusivos e um estado inflamatÃrio crÃnico. Estudos tem demonstrado novas opÃÃes de tratamento na AF, com a finalidade de potencializar a aÃÃo da HidroxiurÃia (HU) e com isso promover a diminuiÃÃo da dosagem sem comprometer a concentraÃÃo da hemoglobina fetal (HbF), bem como o uso de substÃncias que possam agir no mecanismo inflamatÃrio. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da L-arginina e do BAY 73-6691 sobre as concentraÃÃes de TNF-α, IL-8 e Ãxido nÃtrico em neutrÃfilos de pacientes com AF. Participaram do estudo 50 pacientes com diagnÃstico molecular de AF, atendidos no ambulatÃrio de Hematologia do Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio (HUWC) em Fortaleza-Cearà e 30 indivÃduos saudÃveis como grupo controle. Os pacientes foram divididos em dois grupos, de acordo com o uso de HU: SSHU (30 pacientes em uso de HU) e SS (20 pacientes sem uso de HU). Os neutrÃfilos dos pacientes foram extraÃdos do sangue total por diferenÃa de gradiente de densidade e tratados com L-arginina e BAY 73-6691 isoladamente nas concentraÃÃes 0,1, 1, 10 e 100 Âg/mL e com a associaÃÃo L-arginina e BAY 73-6691 na concentraÃÃo de 10 Âg/mL. Um grupo de neutrÃfilos nÃo tratados foi utilizado para comparaÃÃo (HbSS). A citotoxicidade foi avaliada atravÃs da atividade de LDH e ensaio do MTT. Os nÃveis de TNF-α e IL-8 foram determinados por ELISA, e os nÃveis de NO, por ensaio colorimÃtrico. Foi observado que a L-arginina e o BAY 73-6691 isolados causaram toxicidade em neutrÃfilos de ambos os grupos apenas na concentraÃÃo de 100 Âg/mL, enquanto que a associaÃÃo nÃo apresentou efeitos citotÃxicos na concentraÃÃo de 10 Âg/mL. Tanto a L-arginina e o BAY 73-6691 isolados como a associaÃÃo (L-arginina +BAY 73-6691) foram capazes de reduzir significativamente os nÃveis dos marcadores inflamatÃrios TNF-α e IL-8 e de elevar os nÃveis de NO em neutrÃfilos de pacientes do grupo SS, em relaÃÃo ao grupo de neutÃfilos nÃo tratados (HbSS). Os resultados do estudo mostraram que a L-arginina e o BAY 73-6691 sÃo potenciais alternativas terapÃuticas para a AF por serem capazes de aumentar a biodisponibilidade do NO e reduzir o processo inflamatÃrio em neutrÃfilos de pacientes com AF nÃo tratados com HU. / Sickle cell anemia (SCA) is a hemoglobinopathy caused by a point mutation in the β-globin gene characterized by vaso-occlusive events and a chronic inflammatory state. Studies have demonstrated new treatment options in SCA in order to potentiate the action of Hydroxyurea (HU) and thereby promote decreased dosage without compromising fetal hemoglobin concentration, as well as the use of substances that may act in the inflammatory mechanism. The present study aimed to assess the effect of L-arginine and BAY 73-6691 on TNF-α concentration, IL-8 and nitric oxide in neutrophils from patients with sickle cell anemia. The study included 50 patients with a molecular diagnosis of SCA, treated at the hematology clinic at the University Hospital Walter CantÃdio in Fortaleza, CearÃ, and 30 healthy individuals as a control group. The patients were divided into two groups, according to the use of HU: SCAHU (30 patients treated with HU) and SCASS (20 patients not treated with HU). Neutrophils from patients were extracted from whole blood by density gradient difference and treated with L-arginine and BAY 73-6691 alone in the concentrations 0.1, 1, 10 and 100 ug / mL and L-arginine and BAY 73-6691 association at a concentration of 10 ug / ml. A group of untreated cells was used for comparison. Cytotoxicity was assessed by the LDH activity and MTT assay. TNF-α and IL-8 were determined by ELISA and NO levels by colorimetric assay. It has been observed that L-arginine and BAY 73-6691 isolated neutrophils caused toxicity in both groups only at the concentration of 100 ug / ml while the combination had no cytotoxic effects. L-arginine and BAY 73-6691 isolated and the combination were able to reduce levels of inflammatory markers TNF-α and IL-8 and to increase NO levels significantly in the SS group neutrophils in relation to the group untreated cells. The results of the study showed that L-arginine and BAY 73-6691 are potential therapeutic alternatives for SCA to be able to increase the bioavailability of NO and reducing the inflammatory process in neutrophils from patients with SCA not treated with HU.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:11383 |
| Date | 11 July 2016 |
| Creators | Amanda de Menezes Mota |
| Contributors | RomÃlia Pinheiro GonÃalves Lemes, Luzia Kalyne Almeida Moreira Leal, ArlÃndia Cristina Lima Nobre de Morais, Maria Jania Teixeira |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Patologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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