Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / INTRODUCCIÓN: La cavidad oral posee una microbiota residente característica, la
cual, en un estado de equilibrio, coexiste en armonía con el hospedero y es
beneficiosa para el mismo. Esta homeostasis bacteriana puede verse alterada al
ser perturbado el hábitat, provocando un desequilibrio de la microbiota residente,
lo que induce al desarrollo de patógenos oportunistas que facilitan el progreso de
la caries dental, que corresponde a un proceso patológico mediado por bacterias,
de origen multifactorial, altamente prevalente y costoso de tratar. Entre estos
patógenos, han sido descritas ciertas especies del género Bifidobacterium, las
cuales corresponden a bacterias Gram positivo, anaerobias, con propiedades
acidogénicas y acidúricas, polimórficamente ramificadas, no móviles y no
formadoras de esporas. A la fecha no existen estudios publicados sobre la
diversidad de especies y genotipos de Bifidobacterium spp. en la cavidad oral de
niños, ni de su asociación con caries.
OBJETIVO: Analizar las diversidad de especies y genotipos de Bifidobacterium,
en saliva y caries dentinaria de niños chilenos de 7 a 11 años de edad con caries y
en saliva de niños libres de caries.
MATERIAL Y MÉTODOS: Protocolo aprobado por el Comité de Ética de la
Facultad de Odontología. Previo consentimiento de los padres, se tomaron
muestras de saliva y caries a niños Chilenos de 7-11 años (9 sin caries y 9 con
caries), en la Clínica Odontológica, Universidad de Chile. Las muestras fueron
sembradas en el medio de cultivo Triptona - Fitona - Extracto de Levadura
modificado (MTPY), selectivo para Bifidobacteriaceae, e incubadas 72 hrs a 37°C
en anaerobiosis. De las colonias crecidas, se seleccionaron 16 al azar desde cada
muestra, para aislamiento de ADN. A través de la realización de reacción en
cadena de la polimerasa (PCR) con oligonucleótidos específicos para
Bifidobacteriaceae y oligonucleótidos específicos para amplificación de un
fragmento de ADN del gen de 16S rRNA bacteriano, en los casos que no
amplificaron con oligonucleótidos específicos para Bifidobacteriaceae. El producto
de PCR fue purificado y posteriormente se secuenciaron e identificaron las
especies. Finalmente se diferenciaron los genotipos de las especies
pertenecientes a la familia Bifidobacteriaceae, mediante PCR basado en
secuencias repetitivas (REP-PCR) y se realizaron análisis estadísticos de los
resultados.
RESULTADOS: No se detectaron Bifidobacterium spp. en la cavidad oral de los
sujetos de estudio, sin embargo se aislaron otras especies a partir del medio de
cultivo MTPY. Actinomyces odontolyticus fue asociado a la saliva de los niños,
independiente de su experiencia de caries. Rothia mucilaginosa se vio asociada a
la cavidad oral de los sujetos libres de caries. Lactobacillus spp. se vio asociado a
la cavidad oral de sujetos con experiencia de caries. Parascardovia denticolens
estuvo fuertemente asociada a sitios de caries.
CONCLUSIONES: No se logró validar ni refutar la hipótesis de trabajo del
presente estudio, debido a que no fue posible aislar Bifidobacterium spp, desde las
muestras de los sujetos participantes. Se encontró asociación entre algunas de las
especies aisladas en este estudio, con la experiencia de caries de los sujetos y el
tipo de muestra. Los aislados de Parascardovia denticolens presentaron una
amplia variedad de genotipos, pero con un mismo origen filogenético. / Adscrito a Proyecto U-inicia Difarp 40/13, VID, U. de Chile
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/141803 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Carrasco Leiva, Carolina Andrea |
| Contributors | Lefimil Puente, Claudia, Lozano Moraga, Carla, Celis Sersen, Andrés |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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