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Fungos anemófilos em ambientes climatizados: prevalência, produção de enzimas e atividade antibacteriana

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Previous issue date: 2016-07-12 / Fungos anemófilos são os principais contaminantes no ar de ambientes climatizados
podendo promover agravos à saúde. Alguns produzem enzimas de interesse industrial e
metabólitos à biotecnologia. O objetivo do trabalho foi avaliar a microbiota fúngica do ar de
ambientes climatizados do Centro Acadêmico de Vitória/Universidade Federal de
Pernambuco (CAV/UFPE) e seu potencial biotecnológico para produção enzimática e
antimicrobiana. A amostra foi constituída por 82 ambientes climatizados e coletadas da área
central dos ambientes através da técnica de sedimentação passiva sobre meios de cultura
Ágar Extrato de Malte acrescido de Cloranfenicol e Ágar Aspergillus Flavus e Parasiticus
para calcular a relação entre o ar interno e externo (I/E), quantificar colônias fúngicas e
avaliar presença de cepas aflatoxigênicas confrontamento a legislação vigente da ANVISA.
As colônias foram purificadas, identificada as espécies, preservadas e depositadas no
acervo da Coleção de Culturas Micoteca URM da UFPE. Na determinação da atividade
enzimática, discos de micélio puros foram repicados para a área central da placa de Petri
contendo meios de cultura específicos para as enzimas lipase, amilase e protease e as
reações foram constatadas respectivamente pela presença de cristais de sal de cálcio do
ácido láurico, utilização de solução de iodo 0,1N e reação química, formando halo
translúcido que determinou o potencial enzimático das colônias. Para realizar a atividade
antimicrobiana 05 líquidos metabólicos foram testados para determinar a Concentrações
Mínimas Inibitórias Bactericidas e Bacteriostáticas, os discos de micélios foram sepados do
líquido metabólito para realização dos testes, utilizanddo cepas de bactérias Gram positivas
e negativas, seguindo o método de diluição em caldo da norma técnica da ANVISA M7-A6 e
revelados com cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio. Foi observado crescimento fúngico e
diversidade em todos os ambientes, a sala de aula apresentou o menor quantitativo de
UFC/m3 (14) enquanto que o espaço farmácia viva, sala da CIPA e o gabinete docente,
apresentaram a maior quantidade (290 UFC/m3). A relação I/E dos ambientes atendeu a
legislação da ANVISA para qualidade do ar de ambientes climatizados (≤ 1,5), variando de
0,1 a 1,5, uma vez que a quantificação do ar externo foi de 188 UFC/m3 e nenhum ambiente
apresentou fungos aflatoxigênicos. A frequência dos gêneros fúngicos identificados foram:
Aspergillus (50%), Penicillium (21%), Talaromyces (14%), Curvularia e Paecilomyces (7%
cada) e as espécies identificadas foram: Paecilomyces variotti, Penicillium fellutanum,
Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus sydowii, Talaromyces purpurogenus,
Aspergillus japonicus, Penicillium oxalicum, Penicullium chrysogenum e Curvularia luneta.
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Dentre as espécies testadas para atividade enzimática, Aspergillus sydowii apresentou
melhor resultado para produção de amilase (6 mm), lipase (14 mm) e protease (5 mm).
Outras duas espécies produziram as três enzimas (A. parasiticus e Penicillium fellutanum),
porém com menor atividade. Apenas três isolados pertencentes a três espécies foram
negativos para as 3 enzimas simultaneamente, a saber: Paecilomyces variotii, A. parasiticus
lunata e Curvularia lunata. Em relação aos testes de atividade antibacteriana, três líquidos
metabólicos apresentaram atividade contra todas as bactérias testadas (Paecilomyces
variotii, Talaromyces purpurogenus e A. parasiticus). O líquido metabólico de Curvularia
lunata não apresentou atividade antibacteriana contra as bactérias testadas e a espécie
Talaromyces purpurogenus apresentou melhor atividade antibacteriana contra todas as
bactérias testadas, chegando à concentração mínima inibitória de 125 μL/mL. Contudo,
nenhum líquido metabólico apresentou ação bactericida, apenas bacteriostática. Concluindo
que todos os ambientes apresentam biodiversidade de espécies fúngica e não foi
encontrado nenhum fungo toxigênico ou patogênico ao homem, atendendo à legislação da
ANVISA para ambientes climatizados, o maior potencial enzimático foi a lipolítica alcançada
pelas espécies Aspergillus sydowii e Aspergillus parasiticus e os líquidos metabólicos das
espécies Paecilomyces variotti, Talaromyces purpurogenus e Aspergillus parasiticus
apresentaram atividade antimicrobiana contra todas as bactérias desafiadas, sendo a
espécie Talaromyces purpurogenus a que obteve melhor resultado. Os fungos filamentosos
do ar apresentam potencial para atividade enzimática e antimicrobiana. / Airborne fungi are the main contaminants in the air-conditioned environments can promote
health problems. Some produce enzymes of industrial interest and metabolites
biotechnology. The objective was to evaluate the fungal microbiota of the air-conditioned
rooms of the Academic Center of Vitória/Federal University of Pernambuco (CAV/UFPE) and
its biotechnological potential for enzyme and antimicrobial production. The sample consisted
of 82 air-conditioned rooms and collected the central area of the environment through
passive sedimentation technique on culture media Agar Malt Extract plus chloramphenicol
and agar Aspergillus Flavus and parasiticus to calculate the relationship between indoor air
and outdoor (I/E), quantify fungal colonies and evaluate the presence of aflatoxigênicas
confrontation strains current legislation ANVISA. The colonies were purified, identified the
species, preserved and deposited in the collection of the Culture Collection URM Culture
Collection of the UFPE. In the determination of enzymatic activity, pure mycelial discs were
transferred to the central area of the Petri plate containing specific culture media for lipase,
amylase and protease and the reactions were detected respectively by the presence of
calcium salt crystals of lauric acid, iodine solution using 0.1N and chemical reaction, forming
translucent halo that determined the enzyme potential of the colonies. To achieve the
antimicrobial activity 05 metabolic liquids were tested for minimal inhibitory concentrations
bactericides and bacteriostatic the mycelial discs were sepados liquid metabolite for carrying
out the tests, utilizanddo strains of positive and Gram negative bacteria, following the dilution
method in bouillon the technical standard of ANVISA M7-A6 and stained with 2,3,5-
triphenyltetrazolium. Growth was observed fungal and diversity in all environments, the
classroom had the lowest quantity of UFC/m3 (14) while the space living pharmacy, CIPA
room and the teacher's office, had the highest number (290 UFC/m3). The I/E ratio of
environments picked ANVISA legislation for air quality in conditioned environment (≤ 1.5),
ranging from 0.1 to 1.5, since the quantification of outdoor air was 188 UFC/m3 and no
environment presented aflatoxigenic fungi. The frequency of the identified fungal genera are
Aspergillus (50%), Penicillium (21%), Talaromyces (14%), Curvularia and Paecilomyces (7%
each) and the identified species were Paecilomyces variotti, Penicillium fellutanum,
Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus sydowii, Talaromyces purpurogenus,
Aspergillus japonicus, Penicillium oxalicum, Penicullium chrysogenum and Curvularia
spyglass. Among the species tested for enzymatic activity, Aspergillus sydowii showed better
results for amylase production (6 mm), lipase (14 mm) and protease (5 mm). Two other
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species produced the three enzymes (A. parasiticus and Penicillium fellutanum), but with
less activity. Only three isolates belonging to three species were negative for the 3 enzymes
simultaneously, namely Paecilomyces variotii, A. parasiticus lunata and Curvularia lunata.
Regarding the antibacterial activity tests three metabolic liquid showed activity against all
tested bacteria (Paecilomyces variotii, Talaromyces purpurogenus and A. parasiticus).
Metabolic liquid Curvularia lunata showed no antibacterial activity against bacteria tested and
Talaromyces purpurogenus species showed better antibacterial activity against all bacteria
tested, reaching the minimum inhibitory concentration of 125 μL/mL. However, no metabolic
liquid showed bactericidal action, only bacteriostatic. Concluding that all environments
present biodiversity of fungal species and not found any toxigenic or pathogenic fungus to
man, given the ANVISA legislation for climate-controlled environments, the highest enzyme
potential was lipolytic achieved by the species Aspergillus sydowii and Aspergillus
parasiticus and metabolic liquids species Paecilomyces variotti, Talaromyces purpurogenus
and Aspergillus parasiticus presented antimicrobial activity against all challenged bacteria,
Talaromyces purpurogenus species being that obtained better results. Filamentous fungi air
show potential for enzyme and antimicrobial activity.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/17989
Date12 July 2016
CreatorsSOBRAL, Laureana de Vasconcelos
Contributorshttp://lattes.cnpq.br/5131850918162406, OLIVEIRA, Idjane Santana de, SILVA, Lidiane Roberta Cruz da
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Saude Humana e Meio Ambiente, UFPE, Brasil
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguageBreton
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess

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