Alimentos minimamente processados refrigerados prontos para o consumo podem veicular a bactéria Listeria monocytogenes, causadora de infecções graves principalmente em pessoas imunocomprometidas e mulheres grávidas. A aplicação de tratamentos combinados em alimentos é uma alternativa promissora para inibição efetiva de L. monocytogenes e, neste sentido, no presente trabalho foi estudado efeito inibitório de preparações de alecrim pimenta e de bactérias láticas. Foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) de preparações líquidas e secas de alecrim pimenta, em diferentes temperaturas, combinadas ou não com linhagens da bactéria lática C. maltaromaticum (C2, A9b- e A9b+). O uso combinado de culturas de C. maltaromaticum produtoras (C2, A9b+) e não produtora de bacteriocina (A9b-) com ou sem EAP (extrato hidroalcoólico de alecrim pimenta) frente a L. monocytogenes também foi determinado em sistemas de pescado (caldo de peixe modelo, caldo de surubim e homogeneizado de surubim) mantidos a 5ºC por 35 dias. Os resultados de CIM de EAP frente a L. monocytogenes foram de 1,34µl/ml e 0,89µl/ml, respectivamente a 37°C e 5°C, mostrando que houve sinergismo entre EAP e temperatura de refrigeração. Dentre as preparações de alecrim pimenta testadas, EAP apresentou a maior atividade antilisteriana, mas também inibiu as carnobactérias. Não ocorreu sinergismo de EAP combinado com a bacteriocina de C. maltaromaticum C2. Em experimentos de co-inoculação em modelos de pescados, as monoculturas de L. monocytogenes e de C. maltaromaticum (C2, A9b+ e A9b-) alcançaram populações finais entre 106-108 UFC/ml. Em caldo de peixe modelo, EAP sozinho e combinado com culturas de C. maltaromaticum (C2 ou A9b- ou A9b+) apresentou efeito inibitório frente L. monocytogenes. Contudo, C. maltaromaticum (C2 ou A9b- ou A9b+) sem EAP causou pequena inibição de L. monocytogenes. Em caldo de surubim, C. maltaromaticum C2 foi a bactéria lática mais eficiente para inibir L. monocytogenes e houve produção de bacteriocina. Em homogeneizado de surubim com alto nível de inoculação, EAP sozinho e combinado com culturas de C. maltaromaticum (A9b- ou A9b+) apresentou maior efeito inibitório frente L. monocytogenes, enquanto que C. maltaromaticum C2 com EAP inibiu transitoriamente L. monocytogenes, que atingiu população final de aproximadamente 106 UFC/ml. C. maltaromaticum C2 ou A9b- inoculados em homogeneizado de surubim com alto nível de inoculação e sem EAP reduziram 3 log de UFC/ml de L. monocytogenes, mas na mesma condição foi observada a inibição de apenas 1 log de UFC/ml para C. maltaromaticum A9b+. Em homogeneizado de surubim com baixas populações iniciais de L. monocytogenes (<10 UFC/ml) foi observado que EAP sozinho e combinado com culturas de C. maltaromaticum (C2 ou A9b- ou A9b+) apresentou efeito anilisteriano. Entretanto, C. maltaromaticum (C2 ou A9b- ou A9b+) sem EAP não inibiu L. monocytogenes. Foi observado que o uso de EAP e de culturas de carnobactérias tem potencial para inibir L. monocytogenes em pescados e que as aplicações devem ser estudadas cuidadosamente, considerando a influência da matriz alimentícia. / Minimally processed ready-to-eat foods may be contaminated with Listeria monocytogenes, which causes severe infection mainly in immunocompromised persons and in pregnant women. The application of combined treatments in foods is a promising alternative for the effective inhibition of L. monocytogenes and, in this work, the inhibitory effect of alecrim pimenta (Lippia sidoides Cham.) and lactic acid bacteria was studied. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of liquid and dried preparations of alecrim pimenta was determined in different temperatures, combined or not with strains of Carnobacterium maltaromaticum (C2, A9b- and A9b+). The combined use of cultures of C. maltaromaticum bacteriocin-producing (C2 and A9b+).and non bacteriocin-producing (A9b-) with or without EAP (hydroalcoholic extract of alecrim pimenta) towards L. monocytogenes was also determined in model fish systems (fish model broth, surubim fish broth and surubim homogenate, at 5°C for 35 days. The results of MICs of EAP against L. monocytogenes were 1.34 µl/ml and 0.89 µl/ml, respectively at 37ºC and 5°C, indicating synergistic effect between EAP and low temperature. Among the preparations of alecrim pimenta tested, EAP showed the highest antilisterial activity, but it also inhibited carnobacteria. No synergistic effect of EAP combined with bacteriocin of C. maltaromaticum C2 was observed. In co-inoculation studies in model fish systems, monocultures of L. monocytogenes and C. maltaromaticum (C2, A9b+ and A9b-) reached final populations of 106-108 CFU/ml. In fish model broth, EAP alone and combined with cultures of C. maltaromaticum (C2- or A9b or A9b+) presented inhibitory effect against L. monocytogenes. However, C. maltaromaticum (C2 or A9b- or A9b+) without EAP caused weak inhibition of L. monocytogenes. In surubim fish broth, C. maltaromaticum C2 was the most efficient culture for inhibiting L. monocytogenes and bacteriocin was produced. In surubim homogenate with high inoculation level, EAP alone and combined with cultures of C. maltaromaticum (A9b- or A9b+) presented stronger inhibitory effect towards L. monocytogenes, while C. maltaromaticum C2 with EAP caused only initial inhibition of L. monocytogenes, that reached final population of ca. 106 CFU/ml. C. maltaromaticum C2 or A9b- inoculated in surubim homogenate with high inoculation level without EAP reduced 3 log of CFU/ml of L. monocytogenes, but in the same condition it was observed only the reduction of 1 log of CFU/ml for C. maltaromaticum A9b+. In surubim homogenate with low initial populations of L. monocytogenes (<10 CFU/ml) it was observed that EAP alone and combined with co-cultures of C. maltaromaticum (C2 or A9b- or A9b+) presented antilisterial effect. However, C. maltaromaticum (C2 or A9b- or A9b+) without EAP did not inhibit L. monocytogenes. It was observed that the use of EAP and cultures of carnobacteria have potential to inhibit L. monocytogenes in fish and that the applications should be carefully studied, considering the influence of food matrix.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:teses.usp.br:tde-28022010-202600 |
| Date | 26 February 2010 |
| Creators | Fernanda Barbosa dos Reis |
| Contributors | Elaine Cristina Pereira de Martinis, Juliana Pfrimer Falcão, Judite das Graças Lapa Guimarães |
| Publisher | Universidade de São Paulo, Biociências Aplicadas à Farmácia, USP, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP, instname:Universidade de São Paulo, instacron:USP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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