In Saccharomyces cerevisiae, zinc cluster proteins constitute the major family of transcriptional regulators for a variety of metabolic processes, yet the function of many are currently unknown. Previous studies have characterized Rds2 as a zinc cluster transcription factor that plays a role in antifungal drug resistance, but an exact mechanism is undefined. However, it has been established that Rds2 is a major regulator of gluconeogenesis. In this study, we aim to further mechanistically characterize the role of Rds2 in antifungal drug resistance. Microarray-based expression profiling of both wild type and ∆rds2 strains treated with ketoconazole indicates a greater than 2-fold decreased expression of genes involved in gluconeogenesis and the glyoxylate cycle, such as PCK1, YIG1, and MLS1, in cells lacking Rds2. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) confirmed our microarray data. Furthermore, deletion of these metabolic genes confers azole hypersensitivity. Our preliminary results show that Rds2's role as a regulator of gluconeogenesis and the glyoxylate cycle is linked to its role in antifungal drug resistance. / Les protéines à grappes de zinc constituent le groupe principal de régulateurs de la transcription pour plusieurs processus métaboliques chez la levure Saccharomyces cerevisiae. La fonction de plusieurs de ces protéines reste pourtant inconnue. Plusieurs études ont démontré que la protéine à grappe de zinc Rds2 joue un rôle dans la résistance aux médicaments antifongiques, mais la mécanisme exact reste indéfini. Par contre, il a été clairement démontré que Rds2 est un important régulateur de la gluconéogénèse. Dans cette étude, nous voulons définir davantage la mécanisme de Rds2 dans la résistance aux médicaments antifongiques. Une analyse d'expression par micropuces d'ADN de la souche sauvage et de la souche ∆rds2 exposées au kétoconazole a démontré chez la souche ∆rds2 un niveau d'expression deux fois plus bas des gènes impliqués dans la gluconéogénèse et dans le cycle du glyoxylate, tels que PCK1, YIG1 et MLS1. Une analyse par PCR quantitatif a confirmé les résultats des micropuces d'ADN. De plus, la déletion de ces gènes métaboliques cause une hypersensibilité à l'azole. Nos résultats préliminaires montrent que la fonction de Rds2 en tant que régulateur de la gluconéogénèse et du cycle du glyoxylate est lié à sa fonction dans la résistance aux médicaments antifongiques.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.103756 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Mitra, Shuvadeep |
| Contributors | Bernard Turcotte (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Microbiology & Immunology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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