The ShcA adaptor protein is a key signaling molecule in the regulation of survival, angiogenesis, immune suppression and metastasis in breast cancer cells. The mammalian ShcA gene encodes three isoforms which are produced through alternative translation initiation (p46Shc, p52Shc) or different promoter usage (p66Shc). Although p46Shc and p52Shc are constitutively expressed and confer pro-tumorigenic signals, p66Shc levels vary in cancer cell lines. While activation of p66Shc through phosphorylation of its serine-36 (S36) is known to induce reactive oxygen species (ROS) formation, the role it plays in tumourigenesis is poorly understood. Our objective was to characterize the impact of p66Shc expression on mammary tumourigenesis both in vitro and in vivo. To this end, p66Shc-expressing vectors were stably transfected into two cell lines low in endogenous p66Shc; one driven by oncogenic ErbB2 activation (NIC-4360) and one lacking ErbB2 expression altogether (MDA-MB-231). These cells were characterized in vitro before being injected into the mammary fat pad (MFP) of immune-compromised mice for characterization in vivo. Our data revealed that while increased p66Shc expression promotes tumour initiation by way of increased angiogenesis, sustained p66Shc activation serves to decrease tumour cell proliferation. Our observation that p66Shc delayed tumour outgrowth in ErbB2-expressing cells also indicates a link between p66Shc activation and ErbB2 expression. The results of this study demonstrate that p66Shc confers both pro- and anti-tumourigenic properties, and that its role in mammary tumourigenesis is largely dependent on its ability to induce production of ROS. / La protéine adaptatrice ShcA est une molécule clé dans la régulation de la survie, de l'angiogénèse, de la suppression tumorale et des métastases des cellules cancéreuses du sein. Le gène ShcA, chez les mammifères, encode trois isoformes qui sont produites par site d'initiation alternatif pour la transcription (p46Shc, p52Shc) ou l'utilisation d'un différent promoteur (p66Shc). Malgré le fait que p46Shc et p52Shc soient constitutivement exprimés et confèrent un signal bénéfique aux tumeurs, les niveaux de p66Shc varient dans les lignées cellulaires cancéreuses. L'activation de p66Shc via la phosphorylation de Sérine36 (S36) est connue pour induire la formation de dérivés réactifs de l'oxygène (ROS), toutefois le rôle que cela joue dans la tumorigénèse est mal compris. Notre objectif était de caractériser l'impact de l'expression de p66Shc sur la tumorigénèse mammaire, à la fois in vitro et in vivo. À cette fin, des vecteurs exprimant p66Shc ont été transfectés, de façon stable, dans deux lignées cellulaires ayant une expression endogène faible en p66Shc : une mû par l'activation de l'oncogène ErbB2 (NIC-4360), l'autre complètement exempte de ErbB2 (MDA-MB-231). Ces cellules ont été caractérisées in vitro avant leur injection dans les tissus graisseux mammaires de souris immunodéficientes pour la caractérisation in vivo. Nos données démontrent qu'une augmentation de l'expression de p66Shc promouvoit l'initiation tumorale via une augmentation de l'angiogénèse, toutefois une activation soutenue de p66Shc entraîne une diminution de la prolifération des cellules tumorales. Notre observation que p66Shc retarde la croissance tumorale dans les cellules exprimant ErbB2 dénote un lien entre l'activation de p66Shc et l'expression de ErbB2. Les résultats de cette étude démontrent que p66Shc confèrent des propriétés à la fois bénéfiques et néfastes pour les tumeurs, et que son rôle dans la tumorigénèse mammaire est largement dépendante de son habilité à induire la production de ROS.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.119690 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Podmore, Lauren |
| Contributors | Giuseppina Ursini-Siegel (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Medicine) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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