Background Primary brain tumors remain the most intractable form of childhood cancer. Pediatric glioblastomas (pGBM), WHO grade IV astrocytomas, are rare but devastating neoplasms in children, accounting for 15% of all brain tumors and yielding a dismal three-year survival of less than 20%, despite aggressive treatments. While considerable information is available on adult GBM (aGBM), substantially fewer genetic/molecular data exist for pGBM. We previously established that pGBM are molecularly distinct from aGBM and showed that overexpression of Y-Box binding protein 1 (YB-1) may help drive oncogenesis in this tumor. YB-1 is broadly expressed throughout development and is mandated for late embryonic development. Its expression level correlates with the cell proliferation state and is turned down in quiescent cells including in normal brain. This protein is a major structural component of messenger ribonucleoprotein complexes in the cytoplasm where it acts as a translational regulator. Several studies proposed that Akt-dependent phosphorylation of YB-1 at Ser102 may induce nuclear translocation in the presence of functional p53 and the transcription of genes including EGFR. Nuclear YB-1 in turn interacts with p53 inhibiting p53-induced cell death and has been involved in the oncogenesis of several epithelial cancers but our study is the first that associates it with brain cancer. We hypothesize that dysregulated YB-1 expression is driving oncogenesis in a subset of pGBM. The objectives of this thesis are to further define the role of YB-1 dysregulated expression in pGBM oncogenesis in vitro and in vivo. Methods (i) We stably overexpressed HA-tagged wild type (WT) and mutant S102A YB-1 (preventing nuclear shuttling) in pGBM (SF188) and aGBM (U251) cell lines. In parallel, we stably knocked-down YB-1 expression using shRNA in these cell lines. We investigated the effects of overexpression and silencing of YB-1 on cell signalling (Ras and Akt pathways) and EGFR lev / Les tumeurs cérébrales primaires demeurent la forme de cancer la plus incurable de l'enfance. Les glioblastomes pédiatriques (pGBM), astrocytes de grade IV selon l'OMS, sont des néoplasmes rares mais dévastateurs. Ils représentent 15% de toutes les tumeurs cérébrales et ont un taux de survie à 3 ans de seulement 20%. Contrairement aux GBM de l'adulte (aGBM), peu de données sont disponibles concernant les pGBM. Nous avons précédemment établi que les pGBM sont distincts du point de vue moléculaire des aGBM et avons montré que la surexpression de Y-Box binding protein 1 (YB-1) pourrait contribuer à leur oncogénèse. YB-1 est largement exprimée au cours du développement, son expression est requise pour le développement tardif de l'embryon. Son niveau d'expression est corrélé à l'état de prolifération cellulaire, s'éteignant dans les cellules au repos. Cette protéine est un composant structural majeur des complexes ribonucléoprotéiques messagers dans le cytoplasme où elle agit comme régulateur de transcription. Plusieurs études ont proposé que la phosphorylation de YB-1 sur le résidu sérine 102, dépendante d'Akt, pourrait induire la translocation nucléaire de YB-1, en présence d'un p53 fonctionnel, et la transcription de différents gènes, dont EGFR. YB-1 nucléaire interagit avec p53, inhibant la mort cellulaire induite par p53, et a été impliquée dans l'oncogénèse de plusieurs cancers épitheliaux; toutefois notre étude est la première à associer cette protéine et les GBM. Notre hypothèse est que la dérégulation de l'expression de YB-1 actionne l'oncogénèse dans un sous-ensemble de pGBM. Les objectifs de mon mémoire sont de mieux définir le rôle de la dérégulation de l'expression de YB-1 dans l'oncogénèse des pGBM in vitro et in vivo. Pour cela, nous avons (i) surexprimé de facon stable la protéine YB-1 wild type et mutée S102A (mutation empêchant la translocation nucléaire de YB-1) dans des lignées c
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.22035 |
| Date | January 2008 |
| Creators | Sollier, Caroline |
| Contributors | Nada Jabado (Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Human Genetics) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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