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Cloning and characterization of a novel «gpa-16» mutant in «C. elegans»

Meiosis is a specialized cell division, producing unique daughter cells containing half the chromosome number of the parental cell. In the hermaphroditic nematode C. elegans, meiotic mutants can be recognized by embryonic lethality (Emb) and high incidence of males (Him) phenotypes due to chromosome missegregation. In search of new meiotic mutants, we isolated vv33 in an EMS-based "Green eggs and Him" screen (Kelly et al. 2000; Tom Nolis, unpublished data). DAPI stainings of vv33 mutant gonads reveal unusually large nuclei and micronuclei throughout the germline. Characterization suggests that defects in cell division and chromosome segregation in mitotic germ cells are transmitted through the meiotic cell cycle, resulting in 80% Emb and 7% Him. Cloning of vv33 identified it as a novel allele of gpa-16, a Gα protein with known functions in mitosis in the early embryo (Gonczy 2002). Based on our observations, we hypothesize that there is a germline-specific requirement for GPA-16. / La méiose est une division cellulaire spécialisée qui produit des cellules filles haploides à partir de cellules parentales diploides. Chez le nématode hermaphrodite C. elegans, des anomalies de ségrégation des chromosomes lors de la méiose donnent lieu à des phénotypes de létalité embryonnaire (Emb) et d'augmentation du nombre de males (Him). Lors d'un crible génétique basé sur la recherche de nouveaux mutants him (Tom Nolis, non publié), nous avons isolé l'allèle vv33. Une analyse cytologique par coloration DAPI des gonades du mutant vv33 à révélé la présence de noyaux de tailles irrégulières. De plus, des études ont mis en évidence des défauts de ségrégation des chromosomes dans les cellules mitotiques de la lignée germinale. Les anomalies chromosomiques sont ensuite héritées par les cellules méiotiques et génèrent 80% de létalité embryonnaire. Le clonage de vv33 à permit d'identifier une mutation dans le gene gpa-16, qui code une sous-unité alpha d'une protéine G précédemment décrite pour son rôle dans la mitose embryonnaire (Gonczy 2002). Nos résultats nous permettent donc d'envisager une nouvelle fonction spécifique pour GPA-16 dans la lignée germinale.

Identiferoai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.86846
Date January 2010
CreatorsQuan, Ton-Yee
ContributorsMonique Zetka (Supervisor)
PublisherMcGill University
Source SetsLibrary and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada
LanguageEnglish
Detected LanguageFrench
TypeElectronic Thesis or Dissertation
Formatapplication/pdf
CoverageMaster of Science (Department of Biology)
RightsAll items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated.
RelationElectronically-submitted theses.

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