BST-2 (tetherin/CD317/HM1.24) is an interferon-inducible cellular factor that is able to retain fully formed viral particles at the cell surface. This effectively prevents the release of a wide range of viruses including HIV-1 and SIV. Viruses in turn have evolved mechanisms to overcome this restriction, for example, HIV-1 uses Vpu to promote viral release and SIV uses Nef and/or Env. These evasion mechanisms are not fully understood and elucidating these mechanisms may lead to the development of therapies to combat AIDS and other viral infections. Our study focuses on two aspects of BST-2 antagonism: 1) mechanism employed by SIV to overcome BST-2 and 2) mapping the interaction site between BST-2 and Vpu. In part one, we demonstrate that SIV infection of COS-7 cells can downregulate simian BST-2 at the mRNA level in a species-specific manner. Further experiments indicate that this may be part of a broadly neutralizing mechanism to silence not only BST-2, but also other interferon-induced antiviral factors. In the second part of our study we use a bioluminescence energy transfer (BRET) technique to identify essential residues that contribute to the interaction between Vpu and BST-2, and viral release. Overall, this study provides important insight into mechanisms employed by viruses to evade BST-2 restriction. / BST-2 (tetherin/CD317/HM1.24) est un facteur cellulaire dont l'expression peut être induite par l'interféron et qui a la propriété de retenir les particules virales à la surface de la cellule. BST-2 est capable d'empêcher la relâche de particules virales matures et infectieuses d'un large groupe de virus incluant le VIH-1 et le VIS. Par conséquent, les virus se sont adaptés en développant leur propre mécanisme pour combattre cette restriction. Par exemple, le VIH-1 utilise la protéine virale u (Vpu). Une meilleure connaissance de ces mécanismes d'évasion est indispensable afin de permettre le développement de nouveaux médicaments pour combattre le SIDA et les autres infections virales. Cette étude est centrée sur deux aspects de l'antagonisme de BST-2: 1) les mécanismes utilisés par le VIS pour combattre BST-2 et 2) l'interaction entre BST-2 et Vpu. Dans la première partie, on démontre que l'infection des cellules COS-7 par le VIS réduit l'expression de BST-2 au niveau de l'ARNm. De plus, ce mécanisme ne semble être qu'une partie d'un mécanisme général ciblant les gènes stimulés par l'interféron (ISGs). Dans la deuxième partie de l'étude, on utilise une technique de transfert d'énergie bioluminescent (BRET) pour déterminer les résidus responsables de l'interaction entre BST-2 et Vpu. Dans son ensemble, cette étude apporte à une meilleure compréhension des mécanismes utilisés par les virus pour échapper à la restriction par BST-2.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.103595 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Cheng, Vicky |
| Contributors | Chen Liang (Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Microbiology & Immunology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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