Les ARNs H/ACA remplissent des fonctions variées dans la cellule. Ils servent d'ARNs<br />guides pour les conversions d'uridines en pseudouridines des ARNs ribosomiques mais<br />également des snARNs du spliceosome. Les ARNs H/ACA nucléolaires, les snoARNs,<br />guident les modifications des ARNr alors que ce sont des ARNs H/ACA qui s'accumulent<br />dans les Cajal bodies, les scaARNs, qui guident les modifications des snARNs du<br />spliceosome transcrits par l'ARN polymérase II. Nous avons montré par une large analyse<br />mutationnelle d'un ARN chimérique artificiel que la localisation des scaARNs dans les Cajal<br />bodies ne dépendait que d'un court motif de quatre nucléotides situé au niveau des boucles<br />terminales 5' et 3' du domaine H/ACA et appelé « boîte CAB ». La boîte CAB est conservée<br />chez de nombreux organismes et est nécessaire et suffisante à la localisation des scaARNs<br />dans les Cajal bodies. De façon plus inattendue, l'ARN de la télomérase, hTR, responsable de<br />l'élongation des télomères lorsqu'il est associé à la reverse transcriptase hTERT, comporte<br />également un domaine scaARN dans sa partie 3'. Ce domaine H/ACA possède en effet une<br />boîte CAB, située au niveau de la tige boucle 3' du domaine H/ACA, qui est responsable de la<br />localisation de hTR dans les Cajal bodies. Nous avons voulu comprendre la signification<br />biologique de cette accumulation dans les Cajal bodies tout au long du cycle cellulaire par une<br />approche d'hybridation in situ et d'immunofluorescence. L'étude de la dynamique<br />intranucléaire de hTR par microscopie à fluorescence nous a permis de mettre en évidence un<br />rôle de hTR, associé aux Cajal bodies, dans la régulation de l'élongation des télomères. Les<br />Cajal bodies pourraient en effet délivrer hTR, potentiellement associé à hTERT, directement<br />au niveau des télomères.<br />Nous nous sommes intéressés dans un deuxième temps, à l'expression et à la maturation des<br />sno/scaARNs H/ACA introniques. Alors que plusieurs travaux mettent en évidence<br />l'existence d'une synergie entre la machinerie d'épissage et la machinerie d'assemblage des<br />snoRNPs C/D, nos résultats montrent qu'au contraire, l'épissage et l'assemblage de la<br />particule H/ACA chez l'homme sont deux évènements indépendants. Nous apportons<br />également l'évidence que l'expression correcte des ARNs H/ACA nécessite une transcription<br />par l'ARN polymérase II et que la particule H/ACA s'associe très précocement au niveau du<br />pré-ARNm.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:CCSD/oai:tel.archives-ouvertes.fr:tel-00088989 |
| Date | 16 June 2006 |
| Creators | Richard, Patricia |
| Publisher | Université Paul Sabatier - Toulouse III |
| Source Sets | CCSD theses-EN-ligne, France |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | PhD thesis |
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