One of the most serious and economically important defects caused by clostridia in milk products is the late blowing of semi-hard cheeses. Clostridia occur naturally in soil and can contaminate milk through crops contaminated by dung and soil followed by a less successful silage process, that give them opportunity to grow unaerobically. When anaerobic conditions occur, such as storage of semi-hard cheese, they ferment lactic acid to butyric acid and the gases CO2 and H2. At the fusion of Arla and MD Foods, a series of changes were conducted on the MPN method for lactic acid fermentation for clostridia in milk. These changes resulted in an increased accuracy due to an increased number of test tubes and the change of media from MRCM to BBB, Bryant & Burkey Broth, that was thought to be more selective for Cl. tyrobutyricum, the organism mostly found in hard cheese. When the number of dairy farmers that were given quality reduction fines increased, the new method was suspected and a validation was conducted. The validation included inoculation of different clostridia and bacillus strains into BBB substrate and enzymatic testing of positive samples with Rapid ID 32A. The inoculation result showed that almost all tested different clostridia strains could grow in BBB substrate. Test on BBB positive tubes with Rapid ID 32A resulted in 95% clostridia of which 70% was Cl. tyrobutyricum. These results correlated well with earlier studies on MRCM substrate and the increase in quality reduction fines probably depended on the larger number of test tubes used in the new method rather than the change of substrate. / Clostridier eller främst Cl. tyrobutyricum är den art som i de flesta fall orsakar feljästa ellersönderjästa ostar, vilket är ett välkänt problem inom mejeriindustrin. Clostridiesporer finns naturligt i jord och hamnar i mjölkråvaran via gröda som kontaminerats med gödsel och jord och som tillsammans med en mindre lyckad ensileringsprocess gör att clostridierna växer till. När anaeroba förhållanden uppstår, såsom vid lagring av hårdost, förjäser clostridierna laktat och smörsyra varvid vätgas och koldioxid bildas. I samband med fusionen av Arla/MD Foods, genomfördes metodförändringar för MPN-metoden för laktatjäsande clostridier i mjölk, som används inom mjölkbedömningen. Dessa förändringar innebar en skärpning i noggrannheten genom att man ökade antal rör, samt ett substratbyte från MRCM till BBB, Bryant & Burkey Broth, som ansågs mer gynnsamt för Cl. tyrobutyricum. Då antalet mjölkproducenter som fick kvalitetsavdrag ökade, riktades misstankar mot den nya metoden och en validering genomfördes. Resultatet av valideringen, som innebar ympning av renkulturer, utodling av positiva rör med efterföljande typning, visade att de flesta av de tillsatta stammarna av clostridier hade förmågan att ge ett positivt utslag vid tillsats av renkulturer. Utodling och typning av positiva rör visade att ca 70 % av de positiva utslagen innehöll Cl. tyrobutyricum och hela 95 % någon clostridieart. Dessa resultat korrelerar med tidigare studier på MRCM-substrat och ökningen av positiva utslag berodde troligtvis på det ökade antalet rör som den nya metoden innebar.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:uu-109248 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Flodin, Jessica |
| Publisher | Uppsala universitet, Institutionen för medicinsk biokemi och mikrobiologi |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | Swedish |
| Detected Language | English |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0026 seconds