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Previous issue date: 2012-01-26 / CNPQ / Introdução: Estudos histoquímicos têm mostrado que alterações quantitativas e
qualitativas são observadas em glicoconjugados da superfície celular durante o
processo neoplásico. A histoquímica com lectinas é uma ferramenta que pode
auxiliar no diagnóstico do câncer ao analisar o conteúdo sacarídico do tecido
envolvido. A dificuldade em encontrar um método preciso para o diagnóstico do
câncer de mama tem conduzido pesquisas em busca deste objetivo. Criptatos de
európio são complexos com propriedades luminescentes que absorvem radiação
ultravioleta e emitem no comprimento de onda na faixa do visível. Biomoléculas
conjugadas aos criptatos podem funcionar como sondas luminescentes. Objetivos:
Este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial de novos macrociclos de
lantanídeos conjugados a lectinas como sondas luminescentes para o diagnóstico
e/ou prognóstico de tumores de mama empregando a histoquímica com lectinas.
Metodologia: As lectinas UEA-I (Ulex europeus agglutinin) e Con A (Concanavalina
A), ambas a 200 μg/mL e específicas para L-fucose e D-glicose/D-manose,
respectivamente, foram conjugadas ao criptato de Eu3+ (0,13 e 0,88 mg) por ligação
direta utilizando como solvente o tampão fosfato de sódio 10mM pH 7,2, contendo
NaCl 150mM (PBS). A caracterização dos conjugados foi realizada por meio da
atividade hemaglutinante (AH), dicroísmo circular e ensaios de luminescência. Vinte
e quarto biópsias de tecidos mamários (fibroadenoma - FIB, tumor benigno, n=10);
carcinoma ductal invasivo (CDI, tumor maligno, n=10) e tecido normal (controle, n=4)
foram incubadas por 2 h com os conjugados na histoquímica com lectinas. Lectinas
conjugadas com FITC também foram utilizadas. Por fim, os tecidos foram analisados
em espectrofluorímetro e a intensidade de emissão usada para comparação entre as
amostras. Resultados: As análises para caracterizar os conjugados mostraram que
o reconhecimento a carboidratos pelas lectinas e as propriedades luminescentes do
criptato de Eu3+ foram mantidas após a conjugação. Quanto à marcação em tecido,
não foi registrada emissão em amostras controles. FIB e CDI exibiram marcação
apenas quando marcadas com Con A-cript(Eu3+) (emissão média de 12x106 u.a em
FIB e 9,5 x 106 u.a. em CDI). Todos os tecidos foram positivos quando tratados com
lectinas conjugadas ao FITC, sendo o tecido normal marcado com maior intensidade
pela UEA-I e o CDI, pela lectina Con A. Conclusão: A intensidade de luminescência
das sondas mostrou padrões diferentes, refletindo a expressão de carboidratos nos
tecidos estudados. O conjugado Con A-crip(Eu3+) se destaca como sonda
luminescente potencial para a histoquímica com lectinas, uma vez que apresentou
marcações equivalentes aquelas resultantes do uso do FITC tornando-se útil como
ferramenta auxiliar para o diagnóstico.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/12517 |
| Date | 26 January 2012 |
| Creators | BRANDÃO, Juliana Mendes |
| Contributors | BELTRÃO, Eduardo Isidoro Carneiro, ALVES JÚNIOR, Severino |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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