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Previous issue date: 2015-05-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / No presente trabalho a imunopatologia da infecção por Leishmania amazonensisfoi estudada em quatro linhagens de camundongos singênicos. Diferentes parâmetros como análise da expressão/produção de citocinas em diferentes órgãos e no soro, quantificação da carga parasitária, caracterização das populações celulares presentes no infiltrado inflamatório, assim como alterações histopatológicas e na matriz extracelular foram avaliados a fim de verificar as diferenças existentes na resposta imunopatológica entre as linhagens de camundongos utilizadas. A partir destas análises observamos que na fase inicial da infecção, tanto na lesão primária como no linfonodo, as células predominantemente encontradas foram eosinófilos e mastócitos em todas as linhagens de camundongos. A maior presença de células como linfócitos T\03B3\03B4, células B, plasmócitos, assim como altos níveis de anticorpos foi verificada nos camundongos sensíveis a infecção por L. amazonensissugerindo o papel destes na suscetibilidade a doença. Quanto à carga parasitária, as linhagens mais sensíveis (C57BL/10 e CBA) apresentaram maior densidade de amastigotas e maior destruição tecidual com lesões grandes, além de metástase e visceralização do parasito, enquanto os camundongos resistentes (C3H.He) apresentaram poucos parasitos, sem formação de úlceras ou visceralização
De acordo com nossas observações, a resposta imunológica à L. amazonensisdemonstra uma compartimentalização e consequente diferença na produção/expressão de citocinas nos diferentes órgãos estudados. As linhagens mais sensíveis apresentaram, na lesão primária, níveis mais elevados de expressão de citocinas próinflamatórias como IL-12, TNF-\03B1e IFN-\03B3, assim como a indução de iNOS, estando tais níveis associados a maior destruição tecidual observada, enquanto níveis elevados de TGF-\03B2 estariam associados a desativação do macrófago e consequente estabelecimento do parasito no início da infecção. A expressão de IL-4 foi mais evidente nos linfonodos dos camundongos sensíveis. Já no baço de camundongos C57BL/10 uma expressão concomitante de TNF-\03B1e IL-10, assim como IL-12, IFN-\03B3e iNOS estavam associadas a presença de parasitos.A expressão de citocinas proinflamatórias (INF-\03B3, TNF-\03B1e IL-12) no fígado de camundongos C57BL/10 foi observada na fase inicial da infecção,enquanto citocinas regulatórias (TGF-\03B2e IL-10) na fase tardia. Os camundongos resistentes àinfecção por L. amazonensis apresentaram baixos níveis de expressão de citocinas em todos os órgãos analisados
Apesar de não haver uma correlação direta na produção/expressão destas citocinas nestes órgãos, a infecção induz uma produção mista de citocinas que é independente da constituição genética do hospedeiro. Na análise da expressão de proteínasda matriz observamos uma associação entre o aumento na expressão fibronectina, colágenoI e III com a expressão de TGF-\03B2no fígado e linfonodo de C57BL/10 e C3H.He. Tal associação não foi observada na pata e no baço destes animais. A expressão de colágeno III napata, na fase tardia da infecção, estava relacionada à presença maciça de histiócitos parasitados. Altos níveis de expressão de laminina foram observados na pata de camundongos C57BL/10, 30 dias após a infecção, assim como o aumento de colágeno IV e fibronectina / In the present work
L. amazonensis
infection immunopathology was studied in four
inbred mouse strains. With the aim of evaluate the
differences in immunopathologic response
between all strains, different parameters such as:
cytokines analysis expression/production, in
different organs and serum, parasite quantification
, inflammatory infiltrate description, as well
as histopathological and extracellular matrix alter
ations were evaluated. The association of
these analyzes showed that in the early phase of in
fection, in both primary lesion and lymph
nodes, the cells predominantly found in all mouse s
trains were eosinophils and mast cells. A
highest presence of T
γδ
lymphocytes, B cells, plasma cells, as well as hig
h levels of
antibodies were observed in
L. amazonensis
susceptible mice, suggesting a role of this
parameters in disease susceptibility. In regard the
parasite load, the more susceptible strains
(C57BL/10 and CBA) showed a heavy parasite load, ma
ssive tissue destruction with large
lesions and metastasis, and parasite visceralizatio
n. The resistant mice (C3H.He) showed few
parasites and no scars or visceralization were obse
rved. According to our observations,
L.
amazonensis
immune response showed cytokines production/expres
sion
compartmentalization in different studied organs. T
he more susceptible strains showed an
increase of proinflammatory (IL-12, TNF-
α
and IFN-
γ
) cytokines expression, as well as the
iNOS induction, in the primary lesion. This enhance
ment of expression was associated with
tissue destruction, while high levels of TGF-
β
were associated with macrophages deactivation
and subsequent parasite establishment in the early
infection. The expression of IL-4 was more
evident in susceptible mice lymph nodes. In C57BL/1
0 mice spleen a concomitant expression
of TNF-
α
and IL-10, as well as IL-12, IFN-
γ
and iNOS, were associated with parasites
presence. Proinflammatory cytokines (IFN-
γ
, TNF-
α
and IL-12) expression in C57BL/10
mice liver was observed in the initial phase of inf
ection, whereas regulatory (TGF-
β
and IL-
10) cytokines were seen in the late phase. The resi
stant to
L. amazonensis
mice showed low
levels of cytokine expression in all examined organ
s. Although there is not a direct
association between cytokines production/expression
in these organs, the
L. amazonensis
infection induces a mixed cytokines production that
is independent of the host genetic
background. The analysis of extracellular matrix pr
oteins expression showed an association
between FN, collagen I and III expression increase
with the expression of TGF-
β
in the liver
and lymph nodes of C57BL/10 and C3H.He mice. This a
ssociation was not observed in the
footpad and spleen of these animals. The footpad ex
pression of collagen III in the late phase
of infection was associated with the massive presen
ce of parasitized histiocytes. A highest
level of laminin, as well as the increase of collag
en IV and fibronectin expression was
observed in C57BL/10 mice footpad, 30 days after in
fection.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/12188 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Cardoso, Flávia de Oliveira |
| Contributors | Mendonça, Sérgio Coutinho Furtado de, Pereira, Mirian Cláudia de Souza, Silva, Ana Lucia Abreu, Calabrese, Katia da Silva |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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