Candida albicans est un champignon pouvant être pathogène pour l’humain. Il peut passer de la forme levure à la forme mycélienne selon son environnement. Cette capacité au dimorphisme a été démontrée chez l’animal comme étant un facteur de virulence important. En utilisant la technique du differential display, nous avons déterminé un certain nombre de gènes exprimés préférentiellement dans la forme mycélienne. Un de ceux-ci a été cloné et l’analyse de sa séquence a révélé une homologie de 70% avec le gène PHO89 de Saccharomyces cerevisiae, codant pour un transporteur de phosphate. Pour vérifier le fonctionnement de CaPHO89, le cadre de lecture ouvert a été cloné dans un vecteur d’expression de S. cerevisiae et transformé dans un mutant de S. cerevisiae délétant pour PHO89. La capacité de ce transformant à transporter le phosphate a été évaluée en utilisant du [32P]-orthophosphate. Les résultats obtenus ont montré que CaPHO89 peut rétablir le phénotype sauvage de S. cerevisiae, suggérant que CaPHO89 encode un transporteur de phosphate fonctionnel. / Candida albicans is a human fungal pathogen which can switch from yeast-like growth to filamentous growth depending upon its environment. The ability to grow in the filamentous form has been shown to be important for virulence in animal models. Using the differential display technique, we have identified a number of genes preferentially expressed in filamentous cells. One of them was cloned and sequence analysis revealed 70% homology with Pho89 from Saccharomyces cerevisiae, a gene encoding a phosphate transporter. To verify the function of CaPHO89, the open reading frame was cloned into an expression vector and transformed into a S. cerevisiae pho89 null mutant strain. Phosphate transport in the transformants was evaluated using [32P]-orthophosphate. The results obtained showed that CaPHO89 could restore the wild-type phenotype in S. cerevisiae, suggesting that CaPHO89 encodes a functional phosphate transporter.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/18062 |
| Date | 11 April 2018 |
| Creators | Martineau, Philippe |
| Contributors | Giasson, Luc |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | mémoire de maîtrise, COAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrise |
| Format | application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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