<p>Salmonele su najčešći prouzrokovači.crevnih<br />infekcija kod ljudi i životinja Široko su<br />rasprostranjene u prirodi a mogu kolonizovati<br />različite domaćine Poebno su značajne one<br />životinje čije se meso koristi za ishranu ljudi, a<br />koje su i glavni izvor infekcije ljudi. Inficirane<br />životinje ne ispoljavaju simptome i terapija se<br />sprovodi nalazom salmonela prilikom rutinske<br />kontrole zdravstvenog stanja. Posebno, kod ljudi i<br />životinja salmoneloze su značajne i zbog<br />kliconoštva koje može trajati veoma dugo zavisno<br />od starosti inficiranog organizma. Čest su uzrok<br />alimentarnih toksiinfekcija kod ljudi. Duž čitavog<br />lanca ishrane moguća je i sekundarna<br />kontaminacija salmonelama. Pored rutinskih<br />mikrobioloških analiza u otkrivanju izvora i<br />puteva širenja infekcije koriste se i molekularne<br />metode koje daju precizne podatke o klonalnom<br />poreklu bakterija izolovanih iz obolelih ljudi,<br />namirnica i životinja. Međunarodnom trgovinom<br />hrane isti tipovi bakterija mogu se pojaviti na<br />geografski udaljenim lokacijama. Molekularna<br />karakterizacija Salmonella je značajna zbog<br />određivanja raznolikosti sojeva. Potrebno je da se<br />izolati tipiziraju ne samo do nivoa vrste i serotipa<br />nego i preciznije. Tipizacija je bitna za utvrđivanje<br />epidemiološke povezanosti izolata, a<br />genotipizacija podrazumeva direktnu analizu<br />DNK. Geni rezistencije koji se od saprofita mogu<br />preneti na patogene vrste imaju važnu ulogu u<br />pojavljivanju rezistentnih i multirezistentnih<br />sojeva. Međusobni odnos gena rezistencije i<br />upotrebe antimikrobnih sredstava određuje<br />jednačinu rezistencije na antimikrobna sredstva.<br />Rezistencija predstavlja problem iako je<br />salmoneloza samolimitirajuća infekcija zbog čega<br />se terapija antibioticima primenjuje samo kod<br />dece, starijih ljudi i u slučajevima sistemskih<br />infekcija. Navedena problematika je aktuelna i u<br />Crnoj Gori jer ne postoji stalan monitoring<br />primene antimikrobnih sredstava kod domaćih<br />životinja. Iz navedenih razloga cilj ove doktorske<br />disertacije bilo je utvrđivanje prisustva Salmonella<br />vrsta na farmama živine sa tri lokaliteta u Crnoj<br />Gori, izolacija i identifikacija primenom standardnih<br />mikrobioloških metoda, serotipizacija pomoću<br />aglutinacije na predmetnom staklu (slide<br />agglutination) uz primenu anti-O i anti-H seruma<br />.(Staten Serum Institute, Danska). Primenom<br />standardnih mikrobioloških metoda utvrđeno je<br />prisustvo serovarijeteta Salmonella Enteritidis i<br />Salmonella Tiphymurium. Serovarijeteti<br />Salmonella .Gallinarum biotip Gallinarum i<br />Salmonella Gallinarum biotip Pullorum nisu bile<br />serološki tipizirane. Identifikacija navedenih<br />serovarijeteta je potvrđena metodom multipleks<br />PCR detekcijom amplifikovanih DNK fragmenata<br />u agaroznom gelu.. Nakon digestije 50 izolata<br />Salmonella enterica podvrste enterica odabranih<br />prema lokalitetima i zastupljenosti pomoću SpeI<br />restrikcionog enzma i njihovom analizom<br />primenom PFGE utvrđeno je 5 različitih SpeI<br />pulsotipova. Kod 10% ispitivanih sojeva<br />ustanovljena je rezistencija na tetraciklin i<br />streptomicin. Svi ispitivani serovarijeteti<br />salmonela bili su osetljivi na amoksicilin sa<br />klavulanskom kiselinom, enrofloksacin,<br />ciprofloksacin, sulfametoksazol-trimetoprim,<br />cefuroksim, ceftriakson i norfloksacin. Vrednosti<br />MIK (minimalnih inhibitornih koncentracija)<br />određenih antibiotika za odabrane sojeve<br />serovarijeteta Salmonella Enteritidis primenom<br />aparata VITEK 2 iznosile su za: piperacilin ≤ 4 –<br />64 μg/ml (S – R) , cefuroksim 4 – 32 μg/ml (S -<br />R), cefuroksim aksetil 4 –32 μg/ml (S– R),<br />cefiksim ≤ 0,25 – 2 μg/ml (S - I), ceftriakson ≤ 1 –<br />2 μg/ml (S - I) i minociklin ≤ 1 – 4 μg/ml (S),<br />tetraciklin ≤ 1 μg/ml (S), tigeciklin ≤ 0,5 – 1 μg/ml<br />(S), hloramfenikol ≤ 2 – 8 μg/ml (S), kolistin ≤<br />0,5–1 μg/ml (S) i sulfametoksazol/trimetoprim ≤<br />0,5 μg/ml (S).</p> / <p>Salmonella is the most common cause of alimentary<br />toxic infections among humans. They have been<br />adapted to a number of warm-blooded animals. The<br />infected animals do not exhibit symptoms and the<br />treatment performs by finding of salmonella in routine<br />health check. The secondary contamination by<br />salmonella ois possible in during entire food chain.<br />Apart from the routine microbiological analysis in<br />detection of sources and pathways of spreading the<br />infection, there are also used the molecular methods<br />that provide accurate information about the clonal<br />origin of bacteria isolated from diseased humans, food<br />and animals. During international trade of food, the<br />same types of bacteria can occur in geographically<br />remote locations. Molecular characterization of<br />Salmonella is important in determination of diversity of<br />strains. It is necessary isolates to be typified not only to<br />the level of species and serotypes but also more<br />precisely. Typification is essential to determine the<br />epidemiological connection of isolates. Genotyping<br />includes a direct analysis of DNA. The resistance genes<br />that can be transferred from saprophytes to pathogenic<br />microorganisms play an important role in the<br />emergence of resistant and multiresistant strains. The<br />above mentoned is also a current issue in our country<br />because there is a constant monitoring of using of<br />antimicrobials drugs to farm animals. For these reasons,<br />the aim of this dissertation is to examine the serovars of<br />Salmonella in Montenegro, their molecular<br />characterization using biomolecular methods based on<br />isolation of DNA and subsequent amplification of<br />serovar-specific genes.(multiplex PCR method and<br />PFGE), and testing sensitivity, or resistance to<br />antimicrobial drugs used in clinic vet practice.</p>
| Identifer | oai:union.ndltd.org:uns.ac.rs/oai:CRISUNS:(BISIS)101522 |
| Date | 15 September 2016 |
| Creators | Mijatović Irina |
| Contributors | Potkonjak Aleksandar, Stojanović Dragica, Valhner Maja, Mišić Dušan |
| Publisher | Univerzitet u Novom Sadu, Poljoprivredni fakultet u Novom Sadu, University of Novi Sad, Faculty of Agriculture at Novi Sad |
| Source Sets | University of Novi Sad |
| Language | Serbian |
| Detected Language | Unknown |
| Type | PhD thesis |
Page generated in 0.009 seconds