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Resistencia a ácido e identificación de aislados clínicos de Lactobacillus spp. de la cavidad oral de niños de 7 a 11 años sin experiencia de caries versus con caries dentinarias profundas

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / La caries dental es una de las enfermedades crónicas infecciosas más prevalentes
en el mundo. Las lesiones de caries se desarrollan al producirse la pérdida del
equilibrio entre los procesos de desmineralización y remineralización del esmalte y
dentina, debido a disminuciones en el pH ambiental, que alcanzan el nivel crítico
de desmineralización del esmalte (pH 5,5). Esta disminución en el pH se produce
debido a la presencia de una biopelícula bacteriana en la superficie dental,
compuesta por bacterias acidogénicas (capaces de producir ácidos) y acidúricas
(capaces de sobrevivir en un ambiente ácido y seguir produciendo ácido), que
producen ácidos orgánicos como producto de la fermentación de carbohidratos de
la dieta.
Una de las especies dominantes en la biopelícula bacteriana dental corresponde a
Lactobacillus, uno de los géneros más grandes y diversos de bacterias
productoras de ácido láctico, las que han sido consideradas por décadas como
agentes etiológicos de la caries dental, siendo aisladas desde sitios activos de
caries y asociadas sistemáticamente con la presencia y progresión de esta
patología.
Mientras que la habilidad para producir ácido vía fermentación de azúcares es
considerada como una característica innata de las distintas especies de
Lactobacillus, su habilidad para sobrevivir y funcionar en ambientes ácidos
(aciduria) es una característica fundamental para su supervivencia. En lesiones
activas de caries podemos encontrar valores de pH cercanos a 4,5 y si
consideramos el microambiente que rodea a cada célula bacteriana en la placa
dental podemos alcanzar valores menores a 3. Además se ha descrito que las
especies de Lactobacillus aisladas desde sujetos con alta experiencia de caries
son más acidogénicas, por lo que es posible suponer que estas especies también
estarían expuestas a ambientes más ácidos, por lo que poseerían una mayor
capacidad para resistir estas condiciones ambientales.

Por todos estos antecedentes, en este estudio se buscó determinar si las especies
de Lactobacillus aisladas desde sitios de caries dentinaria profunda poseían una
mayor resistencia a ácido y diferían de las especies aisladas desde saliva de
individuos con o sin caries. Además, se propuso que las especies de Lactobacillus
encontradas en cada sitio serian diferentes.
Para esto se analizaron muestras provenientes de saliva y lesiones de caries de
17 niños de 7-11 años, 8 sin experiencia de caries y 9 con al menos una caries en
dentina, a fin de determinar las diferentes especies de Lactobacillus presentes en
cada condición y la resistencia a ácido de cada una de éstas. Para esto, cada
muestra se sembró y cultivó en placas de medio MRS a pH 6,2 y pH 4,2, y luego
se identificaron las especies presentes, mediante el uso de reacción en cadena de
la polimerasa (PCR) y secuenciación.
Los resultados obtenidos indican que las muestras obtenidas desde sitios de
caries poseen Lactobacillus spp. más resistentes a ácido que las muestras de
saliva de los mismos niños con caries (p=0,084).
Si bien las especies de Lactobacillus aisladas desde diferentes sitios no difieren
entre sí, pudimos observar que L. fermentum y L. rhamnosus, se encontrarían
significativamente asociadas a saliva de niños sin caries (p=0,0007 y p=0,002) y
especies como L. salivarius y L. johnsonii / L. gasseri se encontrarían asociadas a
saliva de niños con caries (p<0,0001 y p=0,0391). Del mismo modo, L. casei / L.
paracasei se encontraría significativamente asociada a las muestras de caries
(p=0,0005).
Por lo tanto, se concluye que las especies de Lactobacillus aisladas desde sitios
de caries de niños de 7-11 años de edad, poseen una mayor resistencia a ácido
que las obtenidas desde muestras de saliva de los mismos niños con caries,
además, estos niños presentan mayor diversidad de especies de Lactobacillus en
boca, que los niños sin lesiones de caries para el mismo rango de edad. Y que
existen especies de Lactobacillus (L. fermentum y L. casei / L. paracasei) que
poseerían mayor resistencia ácido y que se encontrarían principalmente habitando
sitios de caries.

También, se concluye que existen especies de Lactobacillus relacionadas a la
ausencia de caries (L. fermentum y L. rhamnosus) y otras relacionadas a la
presencia de caries, específicamente a saliva (L. salivarius y L. johnsonii / L.
gasseri) o a sitios de caries (L. casei / L. paracasei). / Adscrito a Proyecto U-inicia difarp 40/13, VID, U. de Chile.

Identiferoai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/142508
Date January 2016
CreatorsLuzanto Tapia, Claudia Alejandra
ContributorsLefimil Puente, Claudia, Celis Sersen, Andrés, Gajardo Ramírez, Marta
PublisherUniversidad de Chile
Source SetsUniversidad de Chile
LanguageSpanish
Detected LanguageSpanish
TypeTesis
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/

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