Una vez que las histonas son traducidas en los ribosomas, estas sufren una serie de modificaciones post-traduccionales antes de entrar al núcleo. En particular, se han descrito las modificaciones y los complejos que forman las histonas H3 y H4 con distintas chaperonas. En esta cascada de maduración, la primera modificación que se establece es H3K9me1, la cual se genera de manera cotraduccional mediante la metiltransferasa SetDB1 asociada al ribosoma. Sin embargo, sólo el 36% de H3 soluble presenta esta modificación, lo que sugiere la existencia de un mecanismo de regulación, el cual no ha sido descrito hasta la fecha. Utilizando células sincronizadas realizamos un análisis mediante Western Blot para evaluar la presencia de SetDB1, H3 y H3K9me1 en ribosomas provenientes de células enriquecidas en distintas fases del ciclo celular. Logramos determinar que hacia el final de la fase S, hay una mayor presencia de SetDB1 en los ribosomas. En cuanto a H3 y H3K9me1, observamos una acumulación de la proteína y la marca tanto al inicio como al final de la fase S. Por lo tanto, se concluye que existiría un mecanismo de regulación dependiente del ciclo celular para la generación de la marca H3K9me1. Futuros estudios se requerirán para identificar las bases moleculares y el mecanismo de regulación de este proceso / Once histones are translated in the ribosomes, they are post-translationally modified before entering in the nucleus. Previous studies characterized the maturation cascade involved in the establishment of modifications and folding of histones H3 and H4. On this maturation cascade, the first modification imposed is H3K9me1, which occurs cotranslationally by SetDB1, a methyltransferase associated to the ribosome. However, only 36% of the soluble H3 carries this modification, which suggests the existence of a regulation mechanism for the generation of this mark. Using synchronized cells, we performed a Western Blot analysis to assess the presence of SetDB1, H3, and H3K9me1 on ribosomes obtained from cells enriched in different phases of the cell cycle. We found that SetDB1 is enriched on ribosomes at late S phase. We observed an accumulation of H3 and H3K9me1 at early and late S phase. We concluded that there is a cell cycle dependent regulatory mechanism for the generation of H3K9me1. Future studies will be required to identify the molecular basis of this process.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/144610 |
| Date | 06 1900 |
| Creators | Marty Lombardi, Sebastian Fernando |
| Contributors | Loyola Pedevila, María Alejandra, Glavic Maurer, Alvaro |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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