Les subtélomères forment la transition entre les séquences spécifiques des chromosomes et les répétitions télomériques terminales. Ils semblent capables d’influencer les fonctions télomériques mais les connaissances sur les mécanismes mis en jeu sont encore limitées. Les subtélomères sont pourtant associés à de nombreuses pathologies comme la myopathie facio-scapulo-humérale (FSHD), une dystrophie musculaire secondaire à la contraction de répétitions macrosatellites D4Z4 dans la région subtélomérique 4q35. Afin d’étudier les propriétés de la séquence subtélomérique D4Z4, nous avons créé des constructions reproduisant l’organisation génomique au locus 4q35. Nous avons montré que D4Z4 est capable d’adresser un télomère à la périphérie du noyau. Cette activité est couplée à une activité insulatrice au niveau d’une séquence proximale de 80 pb et est dépendante de CTCF et des Lamines A. De plus, la relocalisation périphérique d’un télomère par D4Z4 s’accompagne d’une réplication plus tardive de celui-ci. Par ailleurs, la recherche de séquences capables de s’opposer à l’effet de position télomérique (TPE) a identifié un élément de 30 pb contenant un site CTCF dans la séquence insulatrice proximale de D4Z4. De même, l’introduction d’un signal de poly-adénylation entre un gène rapporteur et les répétitions télomériques interfère avec le TPE et est accompagnée d’une diminution d’un transcrit hybride contenant le gène rapporteur et des répétitions télomériques, suggérant un rôle des transcrits télomériques TERRAs dans la régulation du TPE. En conclusion, ce travail a permis de caractériser l’implication de séquences subtélomériques, et notamment D4Z4, dans la régulation des télomères, leur compartimentalisation nucléaire, la réplication ou l’effet de position télomérique. De plus, il apporte un éclairage nouveau sur la physiopathologie de la FSHD et ouvre des perspectives dans la compréhension d’autres pathologies liées aux subtélomères. / Subtelomeres form the transition between chromosome specific sequences and terminal telomeric repeats. They might influence telomeric functions but underlying mechanisms are still unclear. Nevertheless, subtelomeres are associated with a number of human pathologies such as facioscapulohumeral muscular dystrophy (FSHD), an autosomal dominant disease secondary to the contraction of an array of D4Z4 macrosatellite repeats in the subtelomeric region 4q35. In order to study the biological function of the D4Z4 sequence, we created contructs that mimic the genomic organization of the 4q35 locus. We showed that D4Z4 is able to localize a telomere at the nuclear periphery. This perinuclear activity was dependant on interactions with CTCF and A type lamins and lied within a 80 bp proximal sequence that harbors an insulator activity. Moreover, the peripheral positionning of a telomere by D4Z4 is accompanied by a late replication timing of the telomere. We also searched for sequences able to counteract telomeric position effect (TPE) and identified a 30 bp element containing a CTCF binding site in the proximal region of D4Z4. In another construct, the introduction of a poly-adenylation signal between a reporter gene and telomeric repeats counteracted TPE. This effect is accompanied by the production of a hybrid transcript encompassing the reporter gene and telomeric repeats, suggesting a role for the TERRAs telomeric transcripts in TPE regulation. This work contibuted to characterize the role of subtelomeric sequences, especially the D4Z4 macrosatellite, in telomere regulation, their nuclear compartimentalization, their replication or the telomeric position effect. We will discuss the implications in the understanding of the pathophysiology of FSHD and other subtelomeric diseases.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:theses.fr/2011ENSL0623 |
| Date | 30 May 2011 |
| Creators | Schluth-Bolard, Caroline |
| Contributors | Lyon, École normale supérieure, Gilson, Éric |
| Source Sets | Dépôt national des thèses électroniques françaises |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation, Text |
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