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SANTOS, Suelen Silva.pdf: 1691440 bytes, checksum: 372b85d7abfab49a255d471a150110b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-17T20:09:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1
SANTOS, Suelen Silva.pdf: 1691440 bytes, checksum: 372b85d7abfab49a255d471a150110b1 (MD5) / As toxinas de animais são fontes de recursos naturais para estudos farmacológicos. O veneno
da Crotalus durissus cascavella (CDC), pode ser uma fonte na bioprospecção de novos
agentes anti-hipertensivos. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito vascular e cardíaco
do veneno da CDC em ratos normotensos (Wistar). Foram realizados estudos in vitro com
artéria mesentérica isolada de ratos, células endoteliais aórticas isoladas e átrio isolado. A
administração cumulativa do veneno da CDC (0,001 – 30 µg/ml) em anéis pré-contraídos com
Phe (10 µM), induziu um vasorrelaxamento dependente de concentração com Emax = 47,9 ± 5,0
% n=8 na presença do endotélio vascular, sendo seu efeito praticamente abolido na ausência
do endotélio Emax = 5,8 ± 2,4% n=5 (***p < 0,001). Em tônus basal, os anéis vasculares
apresentaram contração significante (*p<0,05) após adição do veneno; a viabilidade tecidual foi
mantida, pois não houve diferença na capacidade contrátil dos anéis após administração do
veneno. O efeito vasorrelaxante do veneno sobre contrações induzidas por KCl 80 mM, foi
abolido ( Emax = 6,4 ± 0,9% n= 5) (***p < 0,001). No entanto, em contrações induzidas por
PGF2α, o efeito do veneno foi atenuado de forma significante (***p < 0,001) (PGF2α Emax = 18,7 ±
1,3% e CE50 = 15,22 (8,3 - 27,7). Avaliando a participação dos fatores de relaxamento
derivados do endotélio, foi observado que a inibição não seletiva da COX com indometacina
(10 µM) apresentou uma atenuação significante (*p<0,05) sobre efeito vasorrelaxante, a partir
das duas últimas concentrações testadas. Investigando a participação do NO liberado pelo
endotélio, foi demonstrada uma redução significante do efeito vasorrelaxante do veneno em
anéis tratados com L-NAME (100 µM)(Emax para 17,5 ± 2,2% n= 6 (**p<0,01). Resultados
semelhantes foram observados na presença de ODQ (10 µM), um inibidor da guanilil ciclase
solúvel (Emax = 11,2 ± 3,5%, n= 6). Adicionalmente, o veneno induziu liberação de NO por
células endoteliais aórticas isoladas através de estudos de amperimetria. Avaliando a
participação dos canais de K+
na resposta vasodilatadora do veneno foi demonstrado uma
redução significante (***p<0,001) deste efeito na presença de solução de tyrode com 20 mM
de KCl (Emax = 21,3 ± 8, %, n=7). O bloqueio dos BKCa com TEA (1mM) não apresentou
alteração significante sobre o efeito vasorrelaxante (Emax = 40,0 ± 6, %, n=5). A presença do
bloqueador dos canais para K+
retificadores de entrada (BaCl2 30 µM), ou do bloqueador dos
canais para K+
retificador retardado (4-aminopiridina 1 mM), induziu uma diminuição
significante do efeito vasorrelaxante do veneno da CDC (Emax = 21,7 ± 8, %, n= 5.,*p<0,05 e
Emax = 9,5 ± 1,3, %, n=5, ***p<0,001; respectivamente). Por fim, o veneno promoveu efeito
inotrópico negativo em átrio isolado de rato demonstrando uma importante ação cardíaca
direta. Portanto, esses resultados sugerem que o veneno da CDC induz vasorrelaxamento em
anéis da artéria mesentérica superior de ratos normotensos de maneira dependente do
endotélio, possivelmente através de fatores de relaxamento derivados do endotélio,
principalmente o NO, além da participação de canais para K+
. Alem disso, apresenta atividade
cardíaca direta, tornando-se uma importante fonte de moléculas com atividade cardiovascular. / Animal toxins are sources of natural resources for pharmacological studies. The poison of
Crotalus durissus cascavella (CDC) may be a source in the bio-prospecting of new antihypertensive
agents. The aim of this study was to investigate vascular and cardiac effects of the
poison of CDC in normotensive rats (Wistar). In vitro studies were performed using isolated
mesenteric artery of rats, besides aortic endothelial cells and isolated atrium. The cumulative
administration of the poison of CDC (0,001 – 30 µg/ml) in Phe (10 µM) precontracted rings
induced a concentration-dependent vasorelaxation with Emax = 47,9 ± 5,0 % n=8 in the presence
of vascular endothelium, and its effect was nearly abolished in the absence of endothelium
Emax = 5,8 ± 2,4% n=5 (***p < 0,001). In basal tonus, the vascular rings showed significant
contraction (*p<0,05) after addition of poison; the tissue feasibility was kept because there was
no difference in the contractile capacity of rings after administration of poison. The vasorelaxant
effect of poison over contractions induced by KCl 80 mM was abolished ( Emax = 6,4 ± 0,9% n=
5) (
***p < 0,001). However, in contractions induced by PGF2α, the effect of poison was mitigated
in a significant way (
***p < 0,001) (PGF2α Emax = 18,7 ± 1,3% and CE50 = 15,22 (8,3 -
27,7). When assessing the participation of endothelium-derived relaxing factors, it was noted
that the COX non-selective inhibition with indomethacin (10 µM) showed a significant mitigation
(*p<0.05) over the vasorelaxant effect, from the last two tested concentrations. When
investigating the participation of NO released by endothelium, there was a significant reduction
of the vasorelaxant effect of poison in rings treated with L-NAME (100 µM)(Emax for 17,5 ± 2,2%
n= 6 (**p<0,01). Similar results were noted in the presence of ODQ (10 µM), which is an
inhibitor of soluble guanylyl cyclase (Emax = 11,2 ± 3,5%, n= 6). Moreover, the poison induced
the release of NO by isolated aortic endothelial cells through amperometric studies. When
assessing the participation of K+
channels in the vasodilatory response of poison, it was shown
a significant reduction (***p<0,001) of this effect in the presence of tyrode solution with 20 mM
of KCl ((Emax = 21,3 ± 8, %, n=7). The blocking of BKCa block with TEA (1mM) did not show
significant alteration in the vasorelaxant effect (Emax = 40,0 ± 6, %, n=5). The presence of the
blocker of inward rectifier K+ channels (BaCl2 30 µM), or of the blocker of delayed rectifier K
+
channels (4-amynopiridine 1 mM), induced a significant reduction of the vasorelaxant effect of
the poison of CDC (Emax = 21,7 ± 8, %, n= 5.,*p<0,05 and Emax = 9,5 ± 1,3, %, n=5, ***p<0,001;
respectively). Lastly, the poison promoted a negative inotropic effect in isolated atrium of rat,
thereby showing an important direct cardiac action. Therefore, these results suggest that the
poison of CDC induces vasorelaxation in superior mesenteric artery rings of normotensive rats
in an endothelium-dependent way, which possibly occurs through endothelium-derived relaxing
factors, especially the NO, besides the participation of K
+
channels. Furthermore, it shows direct
cardiac activity, thereby becoming an important source of molecules with cardiovascular activity.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/17948 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Santos, Suelen Silva |
| Contributors | Vasconcelos, Darizy Flávia Silva Amorim de, Silva, Luciana Lyra Casais e, Vasconcelos, Darizy Flávia Silva Amorim de, Velozo, Eudes da Silva, Veras, Robson Cavalcante |
| Publisher | Instituto de Ciências da Saúde, Processos Interativos dos Órgãos e Sistemas, ICS, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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