Orientador: Wander José da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T22:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2012 / Resumo: Na cavidade oral, a colonização por Candida albicans em nichos com valores distintos de pH contribui para o desenvolvimento de candidose associada ao uso de prótese. O tratamento dessa infecção tem sido facilitado utilizando-se o fluconazol (FLZ). Entretanto, não está claro se o pH dos biofilmes de C. albicans interfere na susceptibilidade destes ao FLZ. Dessa forma, neste trabalho foi avaliada a influência do pH de biofilmes de C. albicans na susceptibilidade ao FLZ. Testes de susceptibilidade ao FLZ foram realizados em células planctônicas e em biofilmes em três condições de pH (4,0, 5,5 ou 7,0). Testes de concentração inibitória mínima, concentração fungicida mínima e tempo de morte celular foram realizados para avaliar a susceptibilidade ao FLZ de células planctônicas. Para a susceptibilidade de biofilmes, Candida albicans ATCC 90028 foi desenvolvida na superfície de discos de resina a base de poli (metilmetacrilato) por um período de 48 horas. Em seguida, 2,56 ?g/mL de FLZ foram adicionados aos grupos experimentais por 24 horas, e os biofilmes foram analisados quanto à quantificação celular, bioatividade, secreção de proteinases e fosfolipases e parâmetros estruturais, como bio-volume, espessura média e coeficiente de rugosidade. A quantificação celular foi determinada por diluição decimal seriada, e a bioatividade foi avaliada pelo ensaio de XTT. A secreção de enzimas foi determinada por métodos colorimétricos. Microscopia confocal de varredura a laser foi usada para avaliar bio-volume, espessura média e coeficiente de rugosidade dos biofilmes. Todos os dados foram analisados estatisticamente por meio de análise de variância com dois fatores, seguido do teste de Tukey (? = 0,05). Para as células planctônicas, aumento na susceptibilidade ao FLZ foi observado com o valor mais alto de pH. Biofilmes desenvolvidos em pH 5,5 mostraram menor susceptibilidade ao FLZ em relação à quantificação celular (p < 0,05). Células de C. albicans expostas ao FLZ apresentaram menor bioatividade (p < 0,001). Quanto à atividade enzimática, maior produção de proteinase foi observada em biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 (p < 0,001), enquanto houve valores aumentados de fosfolipase nos biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 e 7,0 (p < 0,05). Considerando os parâmetros estruturais, os biofilmes desenvolvidos em pH 5,5, sem exposição ao FLZ, mostraram maior bio-volume e espessura média (p < 0,05), enquanto os biofilmes expostos ao FLZ mostraram coeficiente maior de rugosidade (p < 0,001). Dentro das condições estudadas, conclui-se que o pH dos biofilmes de C. albicans modula a susceptibilidade destes ao FLZ / Abstract: In the oral cavity, a successful colonization by Candida albicans in sites with different pH values contributes to the development of Candida-associated denture stomatitis. The treatment of this infection has been facilitated using fluconazole (FLZ). However, it is not clear how the pH of C. albicans biofilms can interfere in the susceptibility of FLZ. Therefore, this study evaluated the influence of pH of C. albicans biofilms in the susceptibility to FLZ. Susceptibility tests to FLZ were performed in planktonic cells and biofilms under three different pH values (4.0, 5.5 or 7.0). Minimal inhibitory concentration, minimal fungicidal concentration and time kill tests were used to evaluate the susceptibility in planktonic cells. For biofilms susceptibility, Candida albicans ATCC 90028 was allowed to be developed on poly (methlymethacrylate) resin discs surfaces for a period of 48 hours. Then, 2.56 ?g/mL of FLZ was added to the experimental groups for 24 hours and biofilms were analyzed by cell quantification, bioactivity, secretion of proteinases and phospholipases and structural parameters of bio-volume, average thickness and roughness coefficient. Cell quantification was determined by serial dilution, and bioactivity was evaluated by XTT assay. Secretion of enzymes was determined by colorimetric methods. Confocal microscopy was used to evaluate the bio-volume, average thickness and roughness coefficient of biofilms. All data were statistically analyzed by two?way ANOVA, followed by Tukey test (? = 0.05). For planktonic cells, an increase in susceptibility to FLZ was observed at the highest pH value. Biofilms developed at pH 5.5 showed less susceptibility to FLZ with respect to cell quantification (p < 0.05). C. albicans cells exposed to FLZ showed lower bioactivity (p < 0.001). In relation to enzymatic activity, higher production of proteinase was observed in biofilms developed at pH 4.0 (p < 0.001), whereas there were increased levels of phospholipase in biofilms developed at pH 4.0 and 7.0 (p < 0.05). Considering the structural parameters, the biofilms developed at pH 5.5, without exposure to FLZ, showed higher bio-volume and average thickness (p < 0.05), while the biofilms exposed to FLZ showed higher roughness coefficient (p < 0.001). Within the conditions studied, it can be concluded that pH of Candida albicans biofilms modulates the susceptibility to FLZ / Mestrado / Protese Dental / Mestra em Clínica Odontológica
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/290232 |
| Date | 21 August 2018 |
| Creators | Vasconcellos, Andréa Araújo de, 1986- |
| Contributors | UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Silva, Wander José da, 1980-, Santiago, Sérgio Lima, Faot, Fernanda |
| Publisher | [s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Programa de Pós-Graduação em Clínica Odontológica |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Multilíngua |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 49 f. : il., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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