We have identified PrimPol, a yet uncharacterized protein that can act in vitro as a low
processivity polymerase able to bypasses thymine dimers in DNA. PrimPol localizes to both
the nucleus and mitochondria. In order to investigate functional role of this enzyme we have
generated genetrap mice and knock out mice where PrimPol expression is abolished. In cells
lacking PrimPol, we can see increased genomic instability even in the absence of damage,
indicating that it may suppress expression of common fragile sites. Upon UV damage and
aphidicolin treatment, there was a significant increase in chromosomal aberrations. In
genetrap embryos e14.5, PrimPol expression pattern was ectoderm and eye specific. This
was confirmed in the skin of adult where PrimPol was most highly expressed in the skin
compared to other tissues. PrimPol-/- UV damaged skin showed marked epidermal
hyperplasia compared to WT. We have also observed in aged PrimPol-/- mice, and in young
mice damaged by UV, upregulation of mitochondrial DNA copy number across different
tissues, implying that PrimPol may be dealing with the repair of oxidative damage as well. In
accordance with these findings, we hypothesize that PrimPol acts as a translesion polymerase
that can bypass bulky lesions generated by UV and reactive oxygen to promote the integrity
of nuclear and mitochondrial DNA and promote normal aging. / Hemos identificado PrimPol, una proteína no caracterizada que actua in vitro como una
polimerasa de bajo procesamiento que es capaz de evitar los dímeros de timina del ADN y
que se localiza en el núcleo y en las mitocondrias. Para poder investigar la función de este
enzima, hemos generado ratones genetrap y knock out en los cuales se ha abolido la expression
de PrimPol. En las células que no expresan PrimPol podemos observar un aumento de la
inestabilidad genómica incluso en ausencia de daño, indicando que podría suprimir la
expression de sitios frágiles comunes. Tras inducir daño mediante radiación ultravioleta y
tratamiento con afidicolina se observó un aumento significativo de aberraciones
cromosómicas. En embriones y ratones adultos mediante tinción de LacZ y pudimos ver que
PrimPol está altamente expresado en piel y en los ojos en comparación con otros tejidos. La
piel dañada con UV en ratones PrimPol-/- mostró una marcada hiperplasia epidérmica en
comparación con los ratones salvajes. También hemos observado que en ratones PrimPol-/-
de edad avanzada y en ratones jóvenes con lesiones por UV hay un aumento del número de
copias de ADN mitocondrial en diferentes tejidos, lo que sugiere que PrimPol podría estar
también implicada en la reparación del daño oxidativo. De acuerdo con estos
descubrimientos nos planteamos la hipótesis de que PrimPol pueda actuar como una
translesion polimerasa que puede saltarse grandes lesiones inducidas por UV y especies
reactivas de oxígeno y así promover la integridad del ADN nuclear y mitocondrial además de
un normal envejecimiento.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UPF/oai:www.tdx.cat:10803/293265 |
| Date | 04 December 2013 |
| Creators | Stevanović, Irena, 1980- |
| Contributors | Stracker, Travis, Universitat Pompeu Fabra. Departament de Ciències Experimentals i de la Salut |
| Publisher | Universitat Pompeu Fabra |
| Source Sets | Universitat Pompeu Fabra |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 185 p., application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs., info:eu-repo/semantics/openAccess |
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