Alterações nutricionais na gestação podem ter consequências no organismo materno e na prole, as quais podem ser esclarecidas por meio da análise dos componentes uterinos durante a gestação em modelos animais. Dentre estes componentes, podemos destacar as células Natural Killer uterinas (uNK) que representam 70% da população linfocitária no útero gestante de murinos e seres humanos. O presente trabalho teve o fito de avaliar os efeitos da alteração nutricional durante a gestação de camundongos por meio de estudo morfológico e comportamental. Foram utilizados camundongos prenhes os quais receberam a partir do 1º dia de gestação (ddg) ração controle (RC), hipercalórica (HC)- carboidrato 77,7%, hiperlipídica (HL)- gordura 32,5%, hiperproteíca (HP)- proteína 31,26% e foram submetidos a restrição alimentar (RA)- 4g de RC/dia. Todos os animais foram sacrificados no 10º ddg. Foram realizadas análises relacionadas à ingestão, comportamentais, morfológicas, citoquímicas, imunocitoquímicas, morfométricas e estereológicas com enfoque nas uNK. Os resultados mostraram que não ocorreu alteração na ingestão e na glicemia dos grupos experimentais, embora tenha ocorrido aumento do peso de animais HL e diminuição em RA. Na análise comportamental o grupo RA apresentou um estado ansiolítico, já HL exibiu estado semelhante à apatia. Parte das fêmeas RA e HC apresentaram falha gestacional, e em RA foram identificados sítios de implantação (SI) em reabsorção. As análises por meio da citoquímica de lectina DBA, estereológica e imunocitoquímica demonstraram que as rações HL e HC foram capazes de causar as alterações mais marcantes nas uNK, diminuindo a expressão de N-acetil-D-galactosamina (Nac-D-Gal) na superfície e grânulos das uNK, o que possibilitou a observação de um subtipo alterado destas células (uNKa), com grânulos menos reativos à perforina em seus interiores. No endométrio, ocorreu aumento da reatividade para Casp-3 e diminuição na expressão de α-actina da musculatura de seus vasos. Em animais HP e RA as alterações foram menos proeminentes com relação às uNK. Em HP ocorreram menor número de células uNKa, aumento dos subtipos morfologicamente senescentes, pequena identificação de casp-3, e grande expressão de α-actina
vascular. À semelhança dos animais controle, em RA, as uNKa eram raras e não houve alteração na expressão de perforina e α-actina dos vasos, no entanto, parece ter ocorrido atraso na diferenciação das células uNK e aumento na presença de casp-3. Tais resultados demonstraram, pela primeira vez, que alterações na dieta de camundongos, até o 10º ddg, são capazes de desencadear a resposta das uNK DBA reativas no microambiente uterino. / Nutritional changes during pregnancy can be harmful to the mother's body and have direct effects in offspring, which can be clarified by uterine components analyses during pregnancy in animal models. Among these components, we can highlight the uterine natural killer cells (uNK), which representing 70% of the lymphocyte population in the murine and humans pregnant uterus. This work aims to evaluate the effects of nutritional changes during mice pregnancy through morphological and behavioral studies. Pregnant mice have received from 1st gestation day (gd) control diet (CD), high- carbohydrate (HC) carbohydrate- 77.7%, high-fat (HF) - 32.5% fat, high-protein (HP) - protein 31.26% and were exposed to food restriction (FR) – 4g CD/day. The animals are killed at 10th gd. Intake, behavior, morphology, cytochemistry, immunocytochemistry, morphometry and stereological Analyzes was undertaken by focusing on uNK. Our data showed that food intake and blood glucose levels of all experimental groups didn’t change, although the weight increased in the HF and decreased in the FR animals. Behavioral analysis in the FR group showed an anxiolytic state, since HF exhibited similar apathy state. Part of the female FR and HC had gestational failure, and implantation sites (SI) resorption were identified in the FR. Analyses by DBA lectin cytochemistry, immunocytochemistry and stereological studies showed HF and HC diets were able to cause marked changes in uNK, decreasing the expression of uNK surface and granules Gal-D-NAc, which enabled the observation of an DBA-lectin altered kind of uterine NK cell (uNKa), with less reactivity to the perforin in their granules. In the endometrium, there was an increased reactivity for Casp-3 and a decreased expression of the α-actin vessels. The changes were less prominent in the uNK from HP and RA animals. HP uNKa were smaller in number than in HF and HC, and had increased morphological senescent uNK subtype, weak casp-3 reaction and strong blood vessels α-actin expression. Similarly to the control animals, in FR, the uNKa were rare, and there was not changes in the perforin or actin vessels expression. However, the FR animals showed a apparently delay in the uNK differentiation as large presence of casp-3. These results showed for the first time different diets could triggering uNK
DBA-reactive response as can change mouse uterine microenvironment up to 10th gd. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/469 |
| Date | 18 August 2014 |
| Creators | SALLES, Évila da Silva Lopes |
| Contributors | PAFFARO JUNIOR, Valdemar Antonio, http://lattes.cnpq.br/4193402330362099, SILVA, Luciano Bruno de Carvalho, YAMADA, Áureo Tatsumi, BIZINOTTO, Márcia Cristina |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Instituto de Ciências Biomédicas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa de Pós-Graduação em Biociências Aplicada à Saúde |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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