Drosophila Lasp is the only member of the nebulin family in Drosophila. Lasp has an amino-terminal LIM domain, two actin-binding nebulin repeats and a carboxyl-terminal SH3 domain and exhibits very high homology to human Lasp. To assess Lasp function in vivo, we generated a null mutant in Drosophila Lasp, named Lasp1. Lasp1 mutants are homozygous viable, but male sterile. Lasp localizes to cyst cells, early germ cells, hub cells and actin cones. In Lasp1 mutants, the stem cell niche is no longer anchored to the apical tip of the testis, and actin cone migration is perturbed resulting in improper spermatid individualization. Lasp colocalizes with βPS integrin and genetically interact with βPS integrin resulting in complete hub cell mislocalization, which indicates that Lasp modulates integrin adhesion in this context. Lasp1 mutant larvae and flies also have impaired crawling, climbing and flying ability. Lasp localizes to Z lines of third instar larval body wall muscles. In Lasp1 mutant indirect flight muscle, thin filament and sarcomere length is reduced while sarcomere ultrastructure is not significantly affected. The same applies to larval body wall muscles, where we observe a misregulation of sarcomere length in both absence and overexpression of Lasp. This phenotype is very similar to nebulin mutant knock-out mice indicating that Lasp plays a role in regulating thin filament lengths, but with only two nebulin repeats. / Chez la drosophile, Lasp est la seule protéine représentante de la famille des Nébuline. Lasp contient un domaine LIM, deux répétitions de type Nébuline et un domaine SH3, et présente une forte homologie avec la famille Lasp des mammifères. Afin identifier le rôle de Lasp, nous avons généré une mutation nulle, nommée Lasp1. Les mutants Lasp1 sont homozygotes viables, mais les mâles stériles. Lasp se localise dans cellules kyste, dans les cellules germinales, les cellules hub et au niveau des cônes d'actine. Chez les mutants Lasp1, les cellules souches ne sont plus ancré à l'extrémité apicale du testicule, et la migration des cônes d'actine est perturbée, conduisant à une individualisation irrégulière des spermatides. Lasp est colocalisée avec l'intégrine βPS et interagit génétiquement avec l'intégrine βPS, amenant une délocalization des cellules hub, indiquant que Lasp module adhésion intégrine dans ce contexte. Les larves mutantes pour Lasp se déplacent avec difficulté et les adultes ont avec une capacité d'escalade et de vols réduite. Lasp se localise aux lignes Z dans les muscles des larves du troisième stade. Chez les adultes Lasp1, les muscles des ailes présentent une longueur réduite des filaments minces ainsi que des sarcomères, alors que l'ultrastructure du sarcomère ne semble pas être significativement affectée. Les muscles larvaires présentent le phenotype. De plus, on observe un dérèglement de la longueur du sarcomère en surexprimant Lasp dans un contexte sauvage. Ce phénotype est très similaire à celui des souris mutantes pour la nébuline, indiquant que Lasp joue un rôle dans la régulation de la longueur du filament mince, mais avec seulement deux répétitions nébuline.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.95064 |
| Date | January 2010 |
| Creators | Zhou, Lili |
| Contributors | Frieder Schöck (Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Biology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
Page generated in 0.0014 seconds