Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Many studies have been developed to characterize the function of angiotensin-renin system
(ARS) in the female reproductive organs. Evidences from the literature have pointed a
relevant role of angiotensin II (Ang II) in mammals, through its type 2 receptor (AT2) in
oocyte maturation as in ovulation. Nevertheless, the participation of Ang II in other important
reproductive features such as steroidogenesis has not been fully clarified. Therefore, the main
objective of this work was to detect in vitro the steroidogenic effects of Ang II in theca cells.
For that, bovine theca cells were obtained from follicles (larger than 8mm of diameter)
collected from a local abattoir and submitted to different treatments in a sequence of
experiments. In Experiment 1, Ang II was added to LH-treated (10 ng/ml) theca cells.
Experiment 2 employed Ang II, in different concentrations, in addition to insulin (100 ng ̸ml)
and LH (100 ng ̸ml). Experiment 3 explored the effects of an Ang II antagonist (saralasin) in
theca cells co-stimulated by insulin and LH (both at 100 ng ̸ml). After 24 hours, culture media
were collected and evaluated for testosterone and androstenedione levels measured by high
performance liquid chromatography (HPLC). In parallel, gene expression of key
steroidogenic enzymes and proteins, respectively, HSD3B2, CYP11A1 e CYP17A1 and
STAR were accessed by qRT-PCR, with exception of experiment 1, in which only CYP17A1
was evaluated. Overall, absence of Ang II action was observed in all Ang II doses evaluated.
Despite the difference in gene expression for CYP17A1 against controls in experiment 1,
neither an increase in androgens levels nor a negative impact of saralasin were detected.
Although very important for oocyte maturation and the ovulation, Ang II seems not influence
androgen production by theca cells in vitro. In conclusion our results do not support the role
for Ang II in thecal steroidogenesis, at least in bovine, as the primary hypothesis of the study. / Diversos estudos vêm sendo desenvolvidos para caracterizar o sistema renina
angiotensina (RAS) no aparelho reprodutivo feminino. Evidências da literatura apontam um
importante papel da angiotensina II (Ang II), via receptor tipo 2 (AT2), tanto na maturação
dos oócitos quanto na ovulação em mamíferos. No entanto, a participação da Ang II em
outros aspectos reprodutivos importantes, como a esteroidogênese, ainda não foi
completamente elucidada. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi verificar o efeito in vitro
da Ang II nas células da teca cultivadas. Para isso, células da teca bovina foram obtidas de
folículos com mais de 8mm de diâmetro de ovários oriundos de abatedouro local e submetidas
a diferentes tratamentos em uma sequência de experimentos. No experimento 1, Ang II foi
adicionada a células da teca tratadas com LH na dose de 10 ng/ml. No experimento 2, foi
utilizada Ang II em diferentes concentrações em adição ao tratamento com insulina (100
ng ̸ml) e LH (100 ng ̸ml). O experimento 3, explorou o possível efeito de um antagonista da
Ang II (saralasina) em células da teca co-estimuladas com insulina e LH (ambos em 100
ng ̸ml). Após 24 horas, o meio de cultura foi coletado e avaliado para verificação dos níveis
de testosterona e androstenediona aferidos pela técnica de cromatografia líquida de alta
performance (HPLC). Em paralelo, a expressão gênica de enzimas e proteínas chaves na
esteroidogênese, respectivamente, HSD3B2, CYP11A1 e CYP17A1 e STAR, foram avaliadas
por qRT-PCR, com exceção do experimento 1 onde somente a CYP17A1 foi estudada. De
maneira geral, não foi observada uma ação da Ang II nas doses utilizadas. Apesar de uma
diferença na expressão de CYP17A1 ter sido verificada em relação aos controles, nem o
aumento dos níveis de androgênios ou um impacto negativo pelo uso de saralasina foram
detectados. Embora reconhecida como muito importante para maturação oocitária e ovulação,
a Ang II parece não influenciar a produção de androgênios in vitro. Em conclusão, nossos
resultados não demonstraram um papel da Ang II na esteroidogênese tecal, pelo menos na
espécie bovina, ao contrário da hipótese original deste estudo.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/10169 |
| Date | 17 February 2014 |
| Creators | Rigo, Melânia Lazzari |
| Contributors | Gonçalves, Paulo Bayard Dias, Antoniazzi, Alfredo Quites, Nóbrega Junior, Jandui Escarião da |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, UFSM, BR, Medicina Veterinária |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 500500000007, 400, 500, 300, 500, 300, fcd33ccc-f08d-428c-b7da-9d3757cf0a96, 3586b907-51c2-4bdf-8f7c-76dad977d09c, 07e69e9e-c8e4-460c-91dd-f3b5aa4e560a, bb6b97fa-71f6-4d96-814c-dbb7385c3d37 |
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