Per tal d'identificar nous membres de la família de receptors CD300L, es va fer una cerca a la base de dades genòmica utilitzant les seqüències d'IREM-1 (nou receptor inhibidor identificat en el nostre laboratori) i CMRF-35, i es va descriure un nou membre de la família anomenat "immune receptor expressed on myeloid cells" (IREM-2/CD300e). El gen localitzat en el cromosoma 17q25.1 codifica per una proteïna de 205 aminoàcids formada per una regió extracel·lular amb un domini immunoglobulina i una regió transmembrana amb un residu carregat positivament (Lys), el qual permet predir la seva possible associació a una molècula adaptadora. La interacció entre IREM-2 i DAP-12 es va confirmar en cèl·lules COS transfectades. Emprant els anticossos específics generats amb cèl·lules de sang perifèrica i del moll de l'os vàrem observar que l'expressió d'IREM-2 està restringida a cèl·lules hematopoètiques madures del llinatge mielomonocític. La diferenciació in vitro a macròfags o cèl·lules dendrítiques immadures provoca una disminució de l'expressió d'IREM-2. L'estimulació, amb els anticossos específics, d'IREM-2 en la línia cel·lular RBL (leucèmia basofílica de rata) juntament amb DAP-12 indueix l'activitat transcripcional d'NFAT i en absència de DAP-12 es requereix la presència d'un coestímul, el PMA, per produir activitat transcripcional. A més a més, l'estimulació d'IREM-2 en monòcits indueix la producció de TNF- i l'alliberació de calci intracel·lular. Com a conclusió, aquests resultats indiquen que IREM-2 és un nou receptor activador de la superfamilía de les immunoglobulines expressat en el llinatge mielomonocític. / Homology BLAST search was carried out using a sequence encoding for a novel inhibitory receptor (IREM-1) cloned in our laboratory and a previously described homologous sequence termed CMRF-35. Based on this information, we cloned a full-length cDNA corresponding to a novel member of this family, termed IREM-2. The gene, located in cr. 17q25.1, encodes for a protein of 205 amino acids that contains an extracellular region comprising an Ig-like domain and a transmembrane region with a positively charged amino acid residue (Lys), that predicted its putative association with an adapter molecule. Indeed, the interaction between IREM-2 and DAP-12 was confirmed in transfected COS-7 cells. By generating specific antibodies and using bone marrow and peripheral mononuclear cells we observed that IREM-2 expression appeared restricted to mature hematopoietic cells of the monocytic and myeloid dendritic cell lineages. In vitro differentiation to macrophages or immature dendritic cells down-regulated IREM-2 expression. Upon engagement with the specific mAbs, IREM-2 expressed in rat basophilic leukaemia (RBL) cells together with DAP-12, induced NFAT transcriptional activity; moreover IREM-2 engagement on monocytes induced TNF-alpha production. Taken together, our results indicate that IREM-2 is a novel activating receptor of the Ig-superfamily in the monocytic lineage.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UPF/oai:www.tdx.cat:10803/7096 |
| Date | 27 June 2006 |
| Creators | Aguilar Calafell, Helena |
| Contributors | Sayós Ortega, Juan, López-Botet, M. (Miguel), Universitat Pompeu Fabra. Departament de Ciències Experimentals i de la Salut |
| Publisher | Universitat Pompeu Fabra |
| Source Sets | Universitat Pompeu Fabra |
| Language | Catalan |
| Detected Language | Spanish |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs., info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0134 seconds