STAT5 est impliqué dans le développement d'une multitude de cellules et de tissus, et potentiellement dans les cellules de Leydig où son rôle demeure inconnu. STAT5B est un effecteur de l 'hormone de croissance, hormone dont le rôle est mal connu au niveau des cellules de Leydig. Ce projet consistait à comprendre le mécanisme d'activation de la transcription des gènes Star et Cyp11a1 au sein des cellules de Leydig par STAT5B et l 'hormone de croissance. Dans un premier temps, j'ai caractérisé l'expression de Stat5a et Stat5b au niveau de l'ARNm dans différentes lignées immortalisées de cellules de Leydig. Par la suite, j'ai étudié l'effet de l'hormone de croissance sur les niveaux d' ARNm de Stat5 et sur les niveaux de la protéine STAT5 dans le noyau. Un parallèle a également été fait avec l'expression cytoplasmique de STAR. Ensuite, j'ai utilisé des constructions sauvages et mutantes (site STAT muté), d'environ lkb, des promoteurs proximaux murins Star et Cyp11a1 et analysé leur activité par des essais de transfections transitoires et/ou de stimulation à l 'hormone de croissance dans la lignée cellulaire de cellules de de cellules de Leydig MA-10. Par des analyses de retardement sur gel (EMSA), j'ai pu confirmer la liaison d'une protéine aux éléments GAS présents dans les promoteurs murins sauvages Star et Cyp11a1. Par des analyses de super-retardement sur gel, j'ai pu confirmer que la protéine se liant aux sites GAS identifiés est une protéine STAT5. Enfin, j'ai pu caractériser les niveaux d'expressions endogènes de Star et Cyp11a1, en réponse à une surexpression de STAT5B constitutivement actif, en quantifiant leur niveau d' ARNm.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/20677 |
| Date | 16 April 2018 |
| Creators | Hébert-Mercier, Pierre-Olivier |
| Contributors | Tremblay, Jacques J. |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | mémoire de maîtrise, COAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrise |
| Format | xii, 98 f., application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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