En la presente Tesis Doctoral se han abordado dos objetivos: el estudio de la contribución de la enzima convertidora (ECA) frente a la quimasa mastocitaria en la acumulación leucocitaria inducida por la síntesis endógena de Ang-II in vivo, y el estudio del papel de fractalquina (FRK) en la inflamación sistémica inducida por el extracto de humo de tabaco (EHT).
La enzima convertidora de la angiotensina (ECA) es la principal enzima implicada en la formación de Ang-II a partir de Ang-I. Sin embargo, estudios realizados in vitro sugieren que la quimasa mastocitaria es más importante que la ECA en la síntesis de Ang-II en el sistema cardiovascular. Nosotros hemos demostrado que Ang-I induce interacciones leucocito-endotelio en la microcirculación cremastérica de ratón a través de la síntesis de Ang-II mediada por la ECA. El compuesto 48/80 (CMP48/80), desgranulador mastocitario, parece también generar Ang-II pero a través de la liberación de quimasa mastocitaria. Al administrar Ang-I+CMP48/80, se observa aumento de las interacciones leucocito-endotelio superior a la observada con los estímulos por separado, de la expresión del receptor AT1B y de quimasa alrededor de la pared del vaso. Estos resultados junto con la utilización de inhibidores selectivos así como ratones deficientes en mastocitos, sugieren que ambas vías contribuyen a la formación de Ang-II in vivo. Por tanto parece que el empleo de antagonistas de receptores AT1 de Ang-II sea la aproximación clínica más adecuada para inhibir el proceso inflamatorio inducido por Ang-II cuando ambas vías están activadas.
El humo de tabaco (HT) ha sido implicado en el desarrollo de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) caracterizada por inflamación pulmonar y sistémica. La FRK (CX3CL1), podría estar relacionada con la acumulación de leucocitos mononucleares en tejidos distantes del pulmón en pacientes con EPOC. La exposición aguda de ratones a HT produjo una moderada inflamación pulmonar e indujo un claro aumento de la adhesión leucocitaria en las vénulas y arteriolas cremastéricas del ratón. La expresión de FRK manifestó un claro papel funcional en arteriolas. En células humanas, la expresión de FRK aumentó en HUAEC pero no en HUVEC expuestas a extracto de HT la cual fue acompañada de acumulación de leucocitos mononucleares, indicando diferencias funcionales entre ambos endotelios. Estos efectos parecen estar mediados por la activación de la NADPH oxidasa y otras vías de señalización redox-sensibles así como por la liberación de TNFalfa. Por tanto, el HT induce expresión de FRK y tanto FRK como su receptor parecen jugar un papel importante en la inflamación sistémica asociada a EPOC. / Angiotensin converting enzyme (ACE) is the main enzyme implicated in generation of Ang-II from Ang-I. In vitro studies suggest that mast cell chymase (MCP) is more important than ACE for generating angiotensin-II (Ang-II) within the cardiovascular system. We investigated in vivo the relative contributions of ACE and MCP to leukocyte recruitment induced by endogenously generated Ang-II. We have demonstrated that Ang-I induces leukocyte-endothelium interactions in the cremasteric microcirculation through ACE-mediated Ang-II generation. CMP48/80 also generates Ang-II but it is mediated by MCP release. When Ang-I+CMP48/80 were co-administered, the leukocyte-endothelium interactions were higher than those observed when each stimulus was administered separately. In addition, AT1B receptor expression was increased and MCP-4 was found surrounding the vessel wall but ACE was detected in the endothelium. These results, together with the results obtained using selective inhibitors and knockout mice, suggest that both pathways contribute to Ang-II generation in vivo. Thus, AT1 receptor antagonists may be more effective than ACE inhibitors for treating on-going Ang-II-mediated vascular inflammation when both pathways are activated.
Cigarette smoke (CS) has been implicated in the development of Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD), which is characterized by pulmonary and systemic inflammation. Fraktalquine (FRK) or CX3CL1, could be related to mononuclear leukocyte recruitment in distant tissues from lungs in COPD patients. Acute CS exposure in mice caused moderate pulmonary inflammation and induced an increase in leukocyte arterial and venular adhesion in the cremasteric microcirculation of mice. FRK expression showed a clear functional role in arterioles. FRK expression was accompanied by an increase of mononuclear leukocytes in Human Umbilical Endothelial Cells from arterioles (HUAEC), but not in cells from venules (HUVEC). This suggests functional differences between the two endothelia types. These effects appeared to be mediated through the activation of NADPH oxidase and other redox-sensitive signalling pathways such as p38 MAPK, ERK1/2 and NFқB and the release of TNFalfa. Therefore, CS induces FRK expression and FRK and its receptor appear to play an important role in systemic inflammation associated to COPD.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UV/oai:www.tdx.cat:10803/79012 |
| Date | 12 May 2011 |
| Creators | Company de la Calle, Chantal |
| Contributors | Sanz Ferrando, Mª Jesús, Universitat de València. Departament de Farmacologia |
| Publisher | Universitat de València |
| Source Sets | Universitat de València |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 202 p., application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess, ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs. |
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