Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Previamente hemos demostrado que el sistema Cu2+/ascorbato puede
inhibir la actividad enzimática de algunas proteínas tiólicas a través de dos
mecanismos: oxidación inducida por ROS y unión inespecífica de Cu2+ a dichas
proteínas. Así por ejemplo, la actividad GSH-transferásica citosólica total fue
inhibida por Cu2+ 50 μM ya sea en ausencia o presencia de ascorbato. Al igual
que el cobre, el hierro es un metal de transición y sus iones generan ROS a
través de las reacciones de Haber Wiess y/o Fenton. Por lo tanto, los iones Fe3+
podrían por un lado oxidar grupos tiólicos de proteínas como también unirse a
ellos inespecíficamente, inhibiendo así su actividad biológica.
En este trabajo describimos la inhibición de la actividad GSH-transferásica
total citosólica de hígado de rata inducida por Fe3+/ascorbato. Esta actividad
enzimática fue inhibida por concentraciones micromolares de Fe3+ en presencia
de ascorbato, efecto que fue revertido por DTT y cisteína de una forma
concentración-respuesta. Este efecto inhibitorio se describe en función de los
parámetros cinéticos aparentes de la GST-transferasa. Por otra parte,
Fe3+/ascorbato redujo el contenido de tioles microsómicos. Sin embargo,
concentraciones micromolares de Fe3+ en ausencia de ascorbato, no alteraron
la actividad control de la GSH-transferásica, a pesar de que se ensayaron concentraciones hasta 500 μM. Cabe señalar además, que en nuestras
condiciones de ensayo, la capacidad redox de los iones Fe3+ fue menor que la
de Cu2+, ya que se necesitaron mayores concentraciones de estos iones para
obtener efectos lipoperoxidativos microsómicos similares (Fe3+ 250 μM vs Cu2+
250 ηM). Los mecanismos que pueden explicar las diferencias observadas
entre los iones cobre e hierro, se discuten al final de este manuscrito / We previously reported that Cu2+/ascorbate may change some enzymatic
activities of thiol proteins through two mechanisms: ROS-induced oxidation and
unspecific Cu2+ binding to it. Thus, total cytosolic GST activity was inhibited by
50 or more μM Cu2+ concentrations in either absence or presence of ascorbate.
Similar to copper, iron is also a transition metal and the iron ions also generate
ROS through Haber Weiss and/or Fenton reactions. Thus, iron ions may alter
the biological activity of thiol proteins through ROS-induced oxidation and also
by Fe3+-binding to protein’s thiol groups. The present work describes the
inhibition of total cytosolic GST activity from rat liver by Fe3+/ascorbate.
Micromolar Fe3+ in the presence of ascorbate inhibited the total cytosolic GST
activity, inhibition which was prevented by DTT and cysteine as a concentrationdependent
manner. We further described this inhibition effect in terms of GST
apparent kinetic parameters. In the similar assay conditions Fe3+/ascorbate
reduced the microsomal thiol content. Interestingly, μM Fe3+ in the absence of
ascorbate did not affect GST activity, although until 500 μM Fe3+ was used.
Moreover, to develop similar microsomal lipoperoxidative effects, a greater iron
ions concentration (250 μM Fe3+/ascorbate) than of copper (250 ηM
Cu2+/ascorbate) was needed. Finally, we discuss the mechanisms which could
explain the differences between copper and iron ions observed
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/105645 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Cortés Troncoso, Juan |
| Contributors | Letelier Muñoz, María Eugenia, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas, Departamento de Química Farmacológica y Toxicológica |
| Publisher | Universidad de Chile, Programa Cybertesis |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Cortés Troncoso, Juan Francisco, Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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