nÃo hà / O Clostridium difficile à reconhecido por ser uma bactÃria nosocomial, levando a intensa inflamaÃÃo intestinal, quebra da barreira epitelial e diarreia. A produÃÃo de adenosina està aumenta durante eventos inflamatÃrios. O receptor de adenosina A2B (A2BR) à o mais expresso no intestino de humanos e camundongos. NÃs investigamos o efeito de exposiÃÃo Ãs TcdA e TcdB, a curto e longo prazo, em cÃlulas HCT-8 e cÃlulas epiteliais intestinais isoladas do ceco. CÃlulas HCT-8 foram expostas a TcdA ou TcdB (10 ng/ml) por 2, 6 e 24h. Foi usado o modelo de alÃa cecal e de infecÃÃo pelo bacilo em murinos para avaliar os efeitos da TcdA e da infecÃÃo pelo C. difficile, respectivamente. Foi demonstrado que HCT-8 e cÃlulas epiteliais intestinais isoladas do ceco naturalmente expressam altos nÃveis do receptor A2BR. TcdA e TcdB alteraram a morfologia celular, viabilidade e proliferaÃÃo e causaram aumento da expressÃo gÃnica de todos os subtipos de receptores de adenosina e das citocinas IL-6 e IL-8 em HCT-8. Em cÃlulas epiteliais intestinais isoladas do ceco, a TcdA significativamente causou um aumento do peso e volume/comprimento da alÃa cecal, escores histolÃgicos e infiltrado neutrofÃlico, medido por MPO, e tambÃm causou alteraÃÃes da expressÃo gÃnicas dos receptores de adenosina, tanto no modelo de alÃa cecal quanto na infecÃÃo pelo bacilo. O tratamento com PSB603, um antagonista do receptor A2BR, foi capaz de reverter os efeitos causados pelas toxinas do C. difficile. Nossos dados suportam a hipÃtese que as toxinas do C. difficile alteram a expressÃo dos receptores de adenosina e isso pode estar relacionado com os severos efeitos inflamatÃrios. NÃs concluimos que os receptores de adenosina tenham um papel importante na regulaÃÃo da inflamaÃÃo em cÃlulas epiteliais intestinais na infecÃÃo pelo C. difficile. / Clostridium difficile is recognized to be a nosocomial pathogen that causes intense intestinal inflammation, epithelial barrier disruption and diarrhea. Adenosine production is increased under inflammatory situations. The adenosine receptor A2B is the most expressed receptor in the human and mice intestine. We investigated the effect of short- and long-term exposure to TcdA and TcdB in HCT-8 cells and isolated cecum epithelial cells. HCT-8 cells were exposed to TcdA or TcdB (10 ng/ml) for 2, 6 and 24h. We used a murine cecal loop model and murine infection model to evaluate the effects of TcdA and C. difficile infection, respectively. We demonstrated that HCT-8 and isolated intestinal cecum epithelial cells naturally express high levels of A2BR receptors. TcdA or TcdB alters the cell morphology, viability and proliferation pattern and caused gene expression increase of all AR subtypes in HCT-8. In isolated cecum epithelial cells, TcdA significantly (p<0.05) increased volume/length, weight/length, histopathology scores, neutrophil infiltration, as measured by MPO content, and induced an altered gene expression increase of all AR subtypes. PSB603 (10 nM) treatment significantly (p<0.05) reduced TcdA-induced tissue damage. Our findings support the hypothesis that Clostridium difficile toxins affect adenosine receptor expression and this action may be related to their severe inflammatory effect. We concluded that adenosine receptors may play a crucial role in regulating the inflammatory system in intestinal epithelium during C. difficile infection.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:10466 |
| Date | 01 December 2014 |
| Creators | Danielle Abreu Foschetti |
| Contributors | Gerly Anne de Castro Brito, Geanne Matos de Andrade, Marcus Raimundo Vale, Ilana Teruszkin Balassiano, Alexander Henning Ulrich |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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