The main objective of this thesis is the elucidation of the mechanism of demetallation of haemin by L-chain apoferritins by different techniques: Crystallographic studies can give us information about the nature of the porphyrin binding sites. In order to attain maximum occupation of these sites we have used 24 haemin /apoferritin molecules. In contrast, for the EPR studies, which allow us to distinguish between haem and non-haem iron, we have used less than saturating values, typically 8 haemin / apoferritin. For the mass spectrometry studies, which give us information on the molecular weight of the bound porphyrin derivative, we have chosen, after preliminary experiments to use 12 haemin / apoferritin. The same conditions were employed for the EXAFS studies, which give us information concerning the ligand environment of the metal ion. We have analysed the wild type L-chain apoferritin (rHoLF) and its three mutants ( rHoLF E53,56,57,60Q; rHoLF R59M and rHoLF E53,56,57,60Q + R59M) incubated with haemin in acidic and basic conditions and after different times of incubation.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCL/oai:ucl.ac.be:ETDUCL:BelnUcetd-10152007-144548 |
| Date | 19 October 2007 |
| Creators | de Val Alda, Natalia |
| Publisher | Universite catholique de Louvain |
| Source Sets | UCL |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | text |
| Format | application/pdf |
| Source | http://edoc.bib.ucl.ac.be:81/ETD-db/collection/available/BelnUcetd-10152007-144548/ |
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