Doctor en farmacología / En
la
depresión
mayor,
la
remisión
de
los
síntomas
depresivos
mediante
el
uso
de
fármacos
antidepresivos
(FADs)
requiere
de
la
administración
prolongada
de
éstos.
El
retardo
necesario
para
observar
el
efecto
terapéutico
sugiere
que
necesariamente
deben
inducirse
procesos
neuroadaptativos
de
curso
temporal
lento.
Diversos
antecedentes
muestran
que
en
pacientes
deprimidos
y
en
modelos
animales
de
esta
enfermedad,
que
se
basan
en
la
exposición
repetitiva
a
estrés,
se
alteran
las
neuronas
y
sinapsis
glutamatérgicas.
Estos
cambios
deberían
ser
revertidos
por
FADs
como
fluoxetina
(flx),
un
inhibidor
específico
de
la
recaptación
de
serotonina,
o
reboxetina
(rbx),
un
inhibidor
específico
de
la
recaptación
de
noradrenalina.
Por
ello,
la
hipótesis
de
esta
tesis
fue
que
“La
administración
prolongada
de
FADs
en
ratas
sometidas
a
estrés
repetido
revierte
los
síntomas
depresivos
e
induce
cambios
morfológicos
y
moleculares
en
neuronas
y
sinapsis
glutamatérgicas
del
telencéfalo”.
Para
evaluar
esta
hipótesis,
se
indujo
estrés
por
reducción
de
movimiento
empleando
dos
protocolos
semejantes,
la
restricción
en
pequeñas
cajas
o
la
inmovilización
en
bolsas
durante
dos
horas
diarias
por
10
días.
En
ambos
casos,
se
observaron
conductas
tipo
depresivas.
Luego,
se
administró
durante
4
semanas
dos
diferentes
dosis
de
flx
o
rbx,
continuando
el
protocolo
de
estrés
durante
este
período.
Las
conductas
depresivas
evaluadas
fueron
ansiedad
y
desesperanza
aprendida.
A
pesar
de
que
ambos
protocolos
de
estrés
indujeron
un
aumento
de
los
síntomas,
éstos
fueron
revertidos
diferencialmente:
flx
revierte
preferencialmente
los
síntomas
depresivos
inducidos
por
restricción,
mientras
rbx
revierte
los
síntomas
depresivos
inducidos
por
inmovilización.
Interesantemente,
este
efecto
se
observó
sólo
a
las
concentraciones
menores
utilizadas
de ambos
fármacos.
Adicionalmente,
se
observó
que
la
administración
de
flx
a
ratas
naïve
indujo
una
disminución
de
la
desesperanza.
Para
estudiar
los
cambios
plásticos
inducidos
por
flx
que
podrían
dar
cuenta
de
este
efecto
antidepresivo,
estudiamos
las
sinapsis
glutamatérgicas
en
ratas
naïve
tratadas
con
flx
0,7
mg/kg
por
4
semanas.
Se
evaluó
mediante
tinción
de
Golgi
la
morfología
de
las
dendritas,
la
densidad
y
la
forma
de
las
espinas
dendríticas,
y
mediante
inmunohistoquímica
el
número
de
células
positivas
para
las
subunidades
de
receptores
glutamatérgicos:
GluA1
y
GluA2
del
R-‐AMPA
y
GluN1,
GluN2A
y
GluN2B
del
R-‐NMDA
en
las
siguientes
áreas
telencefálicas:
la
corteza
retroesplenial
(RSGb),
corteza
Prelímbica
(PrL)
y
la
corteza
motora
secundaria
(M2)
y
el
hipocampo.
Flx
indujo
retracción
del
árbol
dendrítico
y
aumento
de
la
densidad
y
del
porcentaje
de
espinas
más
grandes.
Una
de
las
áreas
más
afectadas
por
flx
fue
la
corteza
retroesplenial,
un
área
cortical
implicada
en
memoria
espacial.
A
través
de
las
mediciones
de
permeabilidad
al
calcio
a
través
del
R-‐AMPA
en
el
hipocampo
observamos
que
flx
aumentó
la
presencia
de
R-‐AMPA
impermeables
al
catión,
constituidos
por
la
subunidad
GluA2.
Estos
hallazgos
reflejan
que
flx
favorece
la
presencia
de
contactos
sinápticos
más
maduros
que
deberían
limitar
la
plasticidad
de
los
circuitos
corticales
afectados.
Para
evaluar
las
consecuencias
funcionales
de
los
cambios
plásticos
en
las
sinapsis
gluatamatérgicas
inducidos
por
flx,
realizamos
pruebas
de
memoria
dependiente
del
hipocampos
(Prueba
del
Laberinto
de
Morris)
y
parcialmente
dependiente
de
esta
estructura
(Prueba
de
Reconocimiento
de
Objetos).
En
ambas
pruebas,
flx
indujo
un
deterioro
significativo
en
la
consolidación
de
la
memoria,
no
así
en
la
adquisición.
Sin embargo,
no
se
encontró
alteración
en
memorias
que
dependen
de
otras
estructuras,
como
la
amígdala.
Los
resultados
mostrados
en
esta
tesis
nos
permiten
concluir
que
los
mecanismos
neurobiológicos
que
se
inducen
por
diferentes
modelos
de
estrés
repetido
son
particulares
y
por
lo
tanto,
son
diferencialmente
sensibles
a
FADs
que
pertenecen
a
diferentes
familias
de
fármacos.
Esto
sugiere
que
pacientes
con
sub-‐tipos
de
depresión
podrían
responder
diferencialmente
a
FADs
serotoninérgicos
o
noradrenérgicos.
Por
otra
parte,
en
ratas
naϊve
tratadas
con
flx,
los
circuitos
glutamatérgicos
presentan
signos
de
mayor
madurez
y
menor
plasticidad
frente
a
un
estímulo
posterior.
Esta
menor
plasticidad
se
acompaña
por
un
deterioro
en
la
consolidación
o
almacenamiento
de
la
memoria.
Esta
tesis
significa
un
avance
importante
para
el
conocimiento
de
sub-‐tipos
de
depresión,
los
efectos
de
la
administración
prolongada
de
flx
sobre
sinapsis
glutamatérgicas
y
sus
posibles
efectos
negativos
sobre
la
memoria
en
sujetos
sanos.
Estos
estudios
permitirán
plantear,
en
el
futuro,
el
uso
de
biomarcadores
para
el
diagnóstico
objetivo
de
subtipos
de
depresión
e
intervenciones
terapéuticas
para
su
tratamiento. / The
remission
of
depressive
symptoms
in
major
depression
needs
long-‐term
antidepressant
drugs
(ADDs)
administration.
The
delay
required
to
obtain
the
therapeutic
effect
suggests
that
neuroadaptive
processes,
occuring
with
a
slow
time
course,
are
necessary.
Several
reports
show
that
in
depressed
patients
and
animal
models
of
the
disease,
based
on
repeated
exposure
to
stress,
glutamatergic
neurons
and
synapses
are
modified.
These
changes
should
be
reverted
by
ADDs
such
as
fluoxetine
(flx),
a
specific
serotonin
re-‐uptake
inhibitor,
or
reboxetine
(rbx),
a
specific
noradrenaline
re-‐uptake
inhibitor.
Therefore,
the
hypothesis
of
the
present
thesis
work
is:
Long-‐term
administration
of
ADDs
(flx
or
rbx)
to
rats
subjected
to
repetitive
stress
revert
depressive
symptoms
and
morphological
and
molecular
changes
in
glutamatergic
neurons
of
forebrain
areas.
To
test
this
hypothesis,
stress
was
induced
by
restraint
stress
in
wire
mesh
cages
or
by
immobilization
in
plastic
bags
for
10
days
to
observe
depressive
symptoms.
Then,
flx
or
rbx
were
administered
at
two
different
doses
daily
for
28
days
during
which
the
stress
protocol
was
continued.
Depressive-‐like
symptoms
such
as
learned
helplessness
and
anxiety
were
assessed
by
behavioral
tests.
Both
stress
models
induced
depressive
symptoms
such
as
increased
anxiety
and
learned
helplessness,
which
were
differentially
reversed:
flx
preferentially
reversed
depressive
symptoms
induced
by
restriction,
while
rbx
reversed
depressive
symptoms
induced
by
immobilization.
To
study
plastic
changes
induced
at
glutamatergic
synapses,
naϊve
rats
were
treated
with
0.7
mg/kg
of
flx
for
28
days.
The dendritic
length,
spine
density
and
morphology
were
studied
by
the
Golgi
silver
staining
method
whereas
levels
of
AMPA-‐R
subunits
(GluA1
and
GluA2)
and
NMDA-‐R
subunits
(GluN1,
GluN2A
and
GluN2B)
were
assessed
by
immunohistochemistry
in
the
following
forebrain
areas:
Prelimbic
cortex
(PrL),
Retrosplenial
cortex
(RSGb)
and
Secondary
Motor
cortex
(M2)
and
in
the
hippocampus.
Flx
induced
dendritic
retraction
and
increases
in
dendritic
spine
density
and
in
large
spines.
The
most
affected
area
was
RSGb,
a
cortical
area
involved
in
spatial
memory.
Through
the
measurements
of
calcium
permeability
through
AMPA-‐Rs
in
hippocampal
slices,
we
observed
that
flx
increased
the
levels
of
GluA2-‐lacking
AMPA-‐R.
These
findings
indicate
that
flx
induced
a
maturation
or
potentiation
of
synaptic
contacts
that
should
limit
the
plasticity
of
the
affected
cortical
circuits.
To
evaluate
plasticity,
we
performed
tests
of
hippocampal
memory
(Morris
Water
Maze)
as
well
as
of
partially
hippocampus-‐dependent
memory
(novel
object
recognition
test).
In
both,
flx
induced
a
significant
impairment
in
memory
consolidation,
but
not
in
acquisition.
Our
findings
show
that
the
neurobiological
mechanisms
that
are
induced
by
repeated
stress
models
are
unique
to
the
used
stress
protocol
and
interestingly,
they
are
differentially
sensitive
to
ADDs
belonging
to
different
drug
families.
This
suggests
that
sub-‐
types
of
depression
in
human
subjects
should
respond
preferentially
to
serotoninergic
or
noradrenergic
ADDs.
Moreover,
naϊve
glutamatergic
synapses
are
characterized
by
more
mature
and
less
plastic
synaptic
contacts.
Their
putative
lower
plasticity
is
associated
with
impairment
in
memory
consolidation
or
storage.
This
thesis
represents
a
significant
advance
in
understanding
of
sub-‐types
of
depression
and
the
deleterious
effects
of
long-‐
term
flx
treatment
in
healthy
subjects.
Moreover,
the
molecular
adaptations
at glutamatergic
synapses
described
in
this
work
allow
the
proposal
of
new
therapeutic
strategies
for
the
treatment
of
depression. / Conicyt
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/113582 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Ampuero Llanos, Estíbaliz Mariela |
| Contributors | Wyneken Hempel, Inge Úrsula, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
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