The objective of this research was to study the antioxidant activity of soybean protein hydrolysates (SPH) and chickpea protein hydrolysates (CPH) at different concentrations, and to measure the antioxidant activity of fractions collected from the RP-HPLC analysis of SPH and CPH. Protein hydrolysates were prepared by the proteolytic enzyme trypsin. The hydrolysates obtained were subjected to DPPH (1, 1-diphenyl-2 picrylhydrazyl) radical scavenging assay. The SPH and CPH at concentration of 2.5-10 mg/ml showed antioxidant activity of 16.5-32 % and 3.4-26.8 %. SPH and CPH were fractionated by using RP-HPLC on C18 column. The antioxidant activity of four SPH and CPH fractions (F I, F II, F III, and F IV) was measured by using DPPH radical scavenging assay. For SPH, antioxidant activity of F III (47.7 %) was higher than other fractions at protein concentration of 1 mg/mL and for CPH; F II showed maximum antioxidant activity 27.9 % at protein concentration 1 mg/mL. The results from the SDS-PAGE confirmed the hydrolysis of protein samples. The second part of the study was to measure the impact of high pressure processing (HPP) on the degree of hydrolysis and antioxidant activity of proteins. High pressure processing (HPP) of isolated soybean protein (ISP) and isolated chickpea protein (ICP) was done at 400 MPa and 600 MPa for 5 min and 10 min. The degree of hydrolysis of isolated soybean protein and isolated chickpea protein treated with high pressure processing and with trypsin hydrolysis showed continuous increase from 12.4 to 24.9 % for SPH and 13.6 to 26.2 % for CPH. The DPPH radical scavenging assay showed a more than two fold increase in antioxidant activity of SPH and CPH: 67 % as compared to the 32 % of SPH without HPP and 56.6 % as compared to the 26.8 % of CPH without HPP at concentration 10 mg/mL. These results show that HPP increased the degree of hydrolysis and antioxidant activity of protein hydrolysates. / Le but principal de cette recherche constituait l'analyse du potentiel antioxydant, à diverses concentrations, d'hydrolysats de protéine de soya (HPS) et d'hydrolysats de protéine de pois chiche (HPP). Les hydrolysats de protéine ont été isolés à l'aide de l'enzyme protéolytique trypsine. Les HPS et HPP démontraient respectivement un potentiel antioxydant de 16.5 à 32% et 3.4 à 26.8 % lorsque présents à des concentrations de 2.5 à 10 mg/mL. L'utilisation d'une colonne C18 a permis de séparer, par CLHP-PI, les HPS et HPP en quatre fractions (F I, F II, F III, et F IV) qui furent dosées avec du DPPH (1,1-diphényl-2-picrylhydrazyle) afin de comparer leur pouvoir de scavenging sur les radicaux. Pour les HPS, le potentiel antioxydant de F III (47.7 %) était supérieur à celui des autres échantillons alors que pour les HPP, 27.9 % (F II) était le seuil maximal. Dans les deux cas, les hydrolysats étaient concentrés à 1mg/mL. L'hydrolyse des échantillons de protéine a été confirmée par SDS-page. La deuxième partie de l'étude visait à mesurer l'impact de la pascalisation sur le degré d'hydrolyse et le potentiel antioxydant des protéines. Des isolats de protéine de soya (IPS) et de protéine de pois chiche (IPP) ont été traités à haute pression (400 MPa et 600 MPa) pendant 5 et 10 min. Le degré d'hydrolyse des IPS et IPP soumis à la pascalisation et à la trypsin ont démontré une augmentation constante allant de 12.4 à 24.9 % pour les isolats de protéine de soya et de 13.6 à 26.2 % pour les isolats de protéine de pois chiche. L'analyse au DPPH du pouvoir d'épuration des radicaux a montré que le potentiel antioxydant des hydrolysats a plus que doublé, passant de 32 à 67 % pour les HPS et de 26.8 à 56.6 % pour les HPP, lorsqu'ils étaient traités par hautes pressions. Cela démontre que la pascalisation améliore le degré d'hydrolyse et le potentiel antioxydant des hydrolysats de protéines.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.104895 |
| Date | January 2011 |
| Creators | Singh, Prabhjot |
| Contributors | Inteaz Alli (Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Food Science and Agricultural Chemistry) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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