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Previous issue date: 2017-02-17 / Capes / The objective of this study was to determine method to the rescue of vegetative material of adult plants of P. willdenovii and evaluate the spread of this material, via tissue culture. The work was conducted with 20 P. willdenovii matrices located in Urupema / SC (28°17'38 ''S, 49°55'54''W). In the vegetative rescue, the following techniques were tested: trunk annealing (100%), semianelation at 75% of the trunk circumference, semianelation at 50% trunk and the induction of shoots from pruned branches. The shoots were harvested at 90, 120, 150, 180, 210 and 240 days after application of the treatments. Sprouts were used in the in vitro culture technique. In the establishment of shoots, asepsis methods were tested: 15 and 20 minutes of contact with sodium hypochlorite (NaClO) (2% v v-1) and the presence / absence of the PPM® biocide (1,5mL L-1) In the culture medium. For in vitro multiplication, two culture media (MS and WPM) and BAP concentration (0, 2, 4 and 6 mg L-1) were tested. Also, the induction of calogenesis by foliar explant was tested in the treatments: position of contact of the foliar face with the culture medium (up and down) and the combination of the BAP and ANA phytoregulators in different concentrations (0 to 12 mg L-1). All vegetative material rescue techniques emitted new shoots, with emphasis on the pruned branches method, which presented the best results for sprouting percentage, number and length of shoots. In vitro culture, asepsis of explants with NaClO for 20 minutes and addition of PPM® in the medium resulted in lower rates of fungal (50%), bacterial (5%), oxidation (23%) and higher survival (76%) of the explants. In vitro multiplication, explants in MS medium had higher oxidation (48%) and lower survival (52%) when compared to WPM medium (26% and 74%, respectively). For the average number of shoots and leaves, the concentration of 3 mg L-1 BAP reached the highest technical efficiency (MET) (1.22 and 1.75 mg L-1, respectively). Foliar segments were not responsive in inducing calogenesis after 120 days of in vitro culture. In this way, it is indicated for the vegetative rescue of P. willdenovii the method of pruned branches. While for in vitro propagation, the use of NaClO (2% v v-1) for 20 minutes and the PPM® biocide (1.5 ml L-1) in the culture medium is recommended in the establishment phase and The use of WPM medium plus 3 mg L-1 of BAP in the multiplication phase. / O objetivo deste trabalho foi determinar método para o resgate de material vegetativo de plantas adultas de P. willdenovii e avaliar a propagação deste material, via cultura de tecidos. Foram utilizadas 20 árvores matrizes de P. willdenovii localizadas no município de Urupema/SC (28°17'38''S; 49°55'54''W). No resgate vegetativo, foram testadas as seguintes técnicas: anelamento do tronco, semianelamento em 75% da circunferência do tronco, semianelamento em 50% e galhos podados. As coletas das brotações foram realizadas aos 90, 120, 150, 180, 210 e 240 dias após a aplicação dos tratamentos. As brotações foram utilizadas na técnica de cultivo in vitro. No estabelecimento testaram-se métodos de assepsia: 15 e 20 minutos de contato com hipoclorito de sódio (NaClO) (2% v v-1) e a presença/ausência do biocida PPM® (1,5mL L-1) no meio de cultura. Para a multiplicação in vitro, foram testados meios de cultura (MS e WPM) e doses de BAP (0, 2, 4 e 6 mg L-1). Também, foi testada a indução de calogênese via explante foliar, nos tratamentos: posição de contato da face foliar com o meio de cultivo (abaxial e adaxial) e a combinação dos fitorreguladores BAP e ANA em diferentes concentrações (de 0 a 12 mg L-1). Todas as técnicas de resgate de material vegetativo emitiram novos brotos, com destaque para o método via galhos podados que apresentou os melhores resultados para porcentagem de brotação, número e comprimento de brotos. No cultivo in vitro, a assepsia dos explantes com NaClO por 20 minutos e a adição do PPM® no meio resultou em menores índices de contaminação fúngica (50%), bacteriana (5%), oxidação (23%) e maior sobrevivência (76%) dos explantes. Na multiplicação in vitro, os explantes em meio MS tiveram maior oxidação (48%) e menor sobrevivência (52%) quando comparado ao meio WPM (26% e 74%, respectivamente). Para o número médio de brotos e de folhas, a concentração de 3 mg L-1 BAP atingiu a máxima eficiência técnica (MET) (1,22 e 1,75 mg L-1, respectivamente). Os segmentos foliares não foram responsivos na indução de calogênese após 120 dias de cultivo in vitro. Desta forma, indica-se para o resgate vegetativo de P. willdenovii o método de galhos podados. Enquanto que, para a propagação in vitro, recomenda-se o uso de NaClO (2% v v-1) durante 20 minutos e do biocida PPM® (1,5 ml L-1) no meio de cultura na fase de estabelecimento e a utilização do meio WPM acrescido de 3 mg L-1 de BAP na fase de multiplicação
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.udesc.br #179.97.105.11:handle/2339 |
| Date | 17 February 2017 |
| Creators | Meneguzzi, Aline |
| Contributors | Navroski, Marcio Carlos |
| Publisher | Universidade do Estado de Santa Catarina, Mestrado, UDESC, Brasil, UDESC::CAV |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UDESC, instname:Universidade do Estado de Santa Catarina, instacron:UDESC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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