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Previous issue date: 2013 / A análise da morfologia celular é um aspecto crucial da neurobiologia, pois a relação entre forma e função pode definir os processos fisiológicos na saúde e na
doença. Um dos principais métodos para avaliar a morfologia celular é por meio da
fotooxidação de marcadores fluorescentes intracelulares, dentre os quais se tem o
percloreto de 1,1’-dioctadecil-3,3,3’,3’-tetrametil-indocarbocianina (DiI), uma
carbocianina lipofílica que pode marcar células vivas ou fixadas. O DiI foi escolhido
para este trabalho devido, dentre outros fatores, à sua importante utilização para
estudos de morfologia celular. Como modelo para avaliar a qualidade da fotooxidação
do aparelho construído para essa finalidade, elegeu-se as células horizontais da retina
humana com o intuito de prosseguir com estudo morfométrico posterior dessas
células, tendo em vista a escassez de trabalhos com essa abordagem em retina
humana. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar a qualidade do método de
fotooxidação do DiI através de LED e utilizando como modelo células horizontais da
retina humana. O material foi obtido do Banco de Olhos do Hospital Ophir Loyola e,
em sequência dissecado, marcado com cristais de DiI e fotooxidado com o aparelho
de LED. As imagens que resultaram do novo método de iluminação para fotooxidação
de traçador fluorescente apresentou elevada qualidade de detalhes da morfologia
neuronal, similares aos resultados obtidos em reações de fotoconversão convencional
com microscópio, o que permite concluir que o aparelho mantém a eficiência da
fotooxidação por revelar detalhes finos da morfologia celular, inclusive com as
vantagens de processar áreas maiores de tecido e considerável redução de custo por
dispensar o emprego de microscópio para o processo. / The analysis of cell morphology is a crucial aspect of neurobiology, since the
relationship between form and function can define the physiological processes in
health and disease. One of the main methods to evaluate cell morphology is through
photooxidation of intracellular fluorescent markers, among which is the perchlorate of
1,1 '-dioctadecyl-3, 3,3', 3'-tetramethyl-indocarbocianina (DiI) a lipophilic
carbocyanine that can make living or fixed cells. The DiI was chosen for this work
because, among other factors, it is used for important studies of cell morphology. As a
model for evaluating the quality of photooxidation of the apparatus constructed for
this purpose, horizontal cells of human retina were elected in order to proceed with
morphometric study these cells further, in view of the lack of studies with this
approach in human retina. This study evaluated the quality of the DiI method
photooxidation via LED and used the horizontal cells of the human retina as a model.
The material was obtained from the Eye Bank of Ophir Loyola Hospital and sequence
dissected, labeled with DiI crystals and photooxided with the LED device. The
images resulting from the new method of lighting fluorescent tracer showed
photooxidation of high-quality detailed neuronal morphology, similar to the results
obtained in reactions of convencional photoconversion with a microscope, which
indicates that the device maintains the efficiency of the photooxidation for revealing
fine details of cellular morphology, including the advantages of larger areas of tissue
processing and a considerable cost reduction for the use of microscopy dispensed into
the process.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpa.br:2011/4650 |
| Date | 25 November 2013 |
| Creators | FARIAS, Flávia Moura Gaia |
| Contributors | SILVA FILHO, Manoel da |
| Publisher | Universidade Federal do Pará, Programa de Pós-Graduação em Neurociências e Biologia Celular, UFPA, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPA, instname:Universidade Federal do Pará, instacron:UFPA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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