La fonction des gènes Hox est étroitement liée à leur expression durant le développement embryonnaire. Ainsi l'analyse de souris mutantes pour la fonction Hoxa5 a révélé que ce gène joue un rôle crucial dans la spécification du squelette ainsi que dans l'ontogénie de plusieurs organes. Par transgenèse, nous avons défini des séquences régulatrices incriminées dans le contrôle de l'expression spatio-temporelle développementale du gène Hoxa5. Un fragment de 2.1 kb situé en aval du gène Hoxa5 (nommé MES) possédant une activité "enhancer" dans les dérivés mésodermiques de la région cervicale avait précédemment été identifié. Par délétions successives de cette région, nous avons mis en évidence la présence de plusieurs éléments régulateurs. Parmi ces derniers, nous avons isolé deux séquences, les fragments AvEc-164 pb et PsHi-331 pb. Le fragment AvEc-164 pb apparaît essentiel au positionnement de la limite postérieure d'expression du gène Hoxa.5 au niveau de la dixième prévertèbre. Cette limite d'expression correspond à la limite postérieure de l'expression du transcrit fonctionnel de 1.8 kb du gène Hoxa5. Nous avons montré que la liaison spécifique de protéines Cdx et/ou Hox sur le fragment AvEc-164 pb était essentielle à son activité régulatrice. Contrairement au fragment AvEc-164 pb, le fragment PsHi-331 pb possède une activité "enhancer" et participe aux propriétés activatrices du MES. Des expériences de retard de migration (EMSA) montrent que des protéines présentes dans des extraits d'embryons de souris peuvent lier le fragment PsHi-331 pb. Les résultats de ces études sur la régulation du gène Hoxa5 et leur impact sur la régionalisation de l'expression du gène seront présentés. Enfin, dans le but de mieux appréhender les diverses fonctions du gène Hoxa5 tout au long du développement, nous avons généré un mutant conditionnel par recombinaison homologue dans des cellules ES. Les phénotypes associés aux différents variants alléliques obtenus ont été caractérisés et comparés à ceux préalablement décrits chez les individus Hoxa5~ '.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/18482 |
| Date | 11 April 2018 |
| Creators | Tabariès, Sébastien |
| Contributors | Jeannotte, Lucie |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | thèse de doctorat, COAR1_1::Texte::Thèse::Thèse de doctorat |
| Format | xi, 268 f., application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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