We reported that transgenic mice constitutively expressing the B7.2 (CD86) T cell costimulatory ligand on microglia spontaneously develop a T cell-mediated demyelinating disease. We have shown that CD8+ T cells are the primary effector T cell-subset that initiates the pathological process. This demyelinating disease appears to be initiated by the activation antigen-specific CD8+ T cells within the central nervous system (CNS) and shows a complete dependence on IFN-gamma receptor signalling. To further understand the pathological process that occurs in this animal model, we characterized the phenotypic and functional status of the CD8+ T cells that accumulate/expand in the CNS. Our data indicate that the CNS CD8+ T cells have unusual phenotypic and functional characteristics resembling effector-memory CD8+ T cells in an activated state. The CD8+ T cells in the CNS have a homogenous phenotype that closely resembles effector-memory CD8+ T cells. They are CD44high, CD62-Llow, CCR7low/neg, CD127high and Ly6Chigh when compared to the spleen of control and Line 31 mice. They also express cell surface markers characteristics of acutely activated cells (CD69, CD25, an isoform of CD43 recognized by the monoclonal antibody 1B11 and NKG2D). However, the CD8+ T cells that accumulate in the CNS of L31 mice differ from typical effector-memory CD8+ T cells by their low level of CD122 expression, the beta chain for the IL-2 and IL-15 receptor. We also show both at the mRNA and protein levels that they are well equipped to kill target cells through various cytotoxic pathways. After short restimulation (4 hours), the majority of the CD8+ T cells produced IFN-gamma and TNF-alpha and some cells produced IL-2. On a per cell basis, the production of TNF-alpha was much higher by the CNS than the splenic CD8+ T cells. CNS CD8+ T cells also produced the cytotoxic molecules perforin and granzyme B after short restimulation and were able to kill target cells in a cytotoxic assay. / Nous avions rapporté que les souris transgéniques (Line 31) qui expriment constitutivement le ligand de costimulation des lymphocytes T, B7-2 (CD86), dans les microglies, développent spontanément une maladie de démyelination induite par les lymphocytes T. Nous avions montré que les lymphocytes T CD8+ étaient les principales cellules effectrices dans cette pathologie. Cette maladie de démyelination semble être initiée par l'activation des lymphocytes CD8+ spécifiques pour un antigène présent dans le système nerveux central (SNC) et son développement est strictement dépendant de la signalisation par le récepteur d'IFN-gamma. Afin de mieux comprendre le procédé pathologique observé chez ces animaux, nous avons caractérisé le phénotype et le statut fonctionnel des lymphocytes CD8+ qui s'accumulent dans le SNC. Nos résultats indiquent que les lymphocytes CD8+ du SNC ont des caractéristiques phénotypiques et fonctionnelles inhabituelles semblables aux lymphocytes CD8+ effecteurs/mémoires dans un état activé. Les lymphocytes CD8+ du SNC ont un phénotype homogène similaire aux cellules effectrices/mémoires. Ils sont CD44haut, CD62-Lbas, CCR7bas/neg, CD127haut et Ly6Chaut comparés aux lymphocytes CD8+ de la rate des souris contrôles et des souris Line 31. Ils expriment aussi des marqueurs de surface caractéristiques de cellules activées (CD69, CD25, un isoforme of CD43 reconnu par l'anticorps monoclonal 1B11 et NKG2D). Cependant, les lymphocytes CD8+ du SNC sont différents des cellules effectrices/mémoires typiques par leur basse expression de CD122, la chaîne beta du récepteur de IL-2 et IL-15. Nous avons aussi montré, tant au niveau des protéines que de l'ARN messager, que ces cellules sont bien équipées pour tuer des cellules cibles via plusieurs processus cytotoxiques. Après une courte restimulation, la plupart des lymphocytes CD8+ du SNC produisent de l'IFN-gamma et du TNF-alpha. Certaines cellules sont aussi capables de$
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.86578 |
| Date | January 2010 |
| Creators | Ndiaye, Marie Monique |
| Contributors | Sylvie Fournier (Internal/Supervisor) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Master of Science (Department of Microbiology and Immunology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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