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Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O câncer cervical tem sido uma patologia grave no Brasil e no mundo com cerca de 18.680
mulheres infectadas anualmente. O Papilomavírus Humano (HPV) tem sido biologicamente
associado ao desenvolvimento de lesões cervicais, devido a sua capacidade de infectar
células epiteliais, e progressão ao câncer do colo de útero. O diagnóstico tardio pode
inviabilizar o tratamento e levar a óbito muitas mulheres. Este diagnóstico poderia ser
antecipado pelo uso de biossensores de DNA, que são dispositivos analíticos que resultam
da integração entre uma sonda seqüência específica e um sinal transdutor. Entre outras
técnicas eletroquímicas, os biossensores amperométricos têm sido descritos como atrativos
devido à sua simplicidade, baixos custos de instrumentação, possibilidade de realização em
tempo real e geralmente alta sensibilidade. Neste trabalho, foi desenvolvido um
genossensor para detecção de seqüências do vírus HPV usando azul de metileno (AM)
como mediador químico. Os sinais biológicos captados foram transduzidos por Voltametria
de Pulso Diferencial (VPD). Os eletrodos de trabalho e referência foram produzidos através
de técnica de impressão sob uma superfície de polivinil álcool. Os mesmos foram
constituídos de carbono e Ag\AgCl, respectivamente. O eletrodo de trabalho foi modificado
com quitosana para a imobilização de pequenas seqüências de DNA para hibridização com
uma seqüência alvo. A seqüência alvo usada para hibridização foi o gene E6 do HPV18,
uma cadeia extensa com 500 pares de bases disponíveis para anelamento com seqüências
de 20 bases. Análises de bioinformática foram realizados para verificar possíveis regiões de
anelamento destas seqüências curtas ao genoma viral. Os resultados demonstraram um
aumento no sinal do AM quando a hibridização ocorreu, evidenciado pelo aumento dos
picos de corrente de VPD analisados graficamente. As diferenças entre os sinais emitidos a
partir de um eletrodo contendo reações de hibridização e outro isento das mesmas, foi
usada para detectar seqüências de DNA viral obtidas de amostras clínicas. Os resultados
indicaram ser o método passível de aplicações em diagnósticos clínicos, e a técnica de
impressão, um instrumento viável para a construção dos biossensores de DNA utilizando o
azul de metileno como indicador de sinais de hibridização
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1401 |
| Date | 31 January 2008 |
| Creators | Manoella Leite dos Santos, Cinthya |
| Contributors | Luiz de Lima Filho, José |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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