Measles-associated morbidity and mortality can be decreased in response to treatment with vitamin A. However, the mechanism underlying this beneficial effect is unknown. In this work, we investigate the molecular interaction between measles virus (MeV) and retinoids in vitro. Our first goal was to assess whether retinoids influence the in vitro replication of MeV. We found all-trans retinoic acid (ATRA), as well as other natural and synthetic retinoids, inhibited MeV replication in primary cells and a range of cell lines. This inhibitory effect was mediated through retinoid nuclear receptor signaling, and retinoic acid receptor alpha (RARalpha) in particular. Next, we sought to determine the role of type I interferon (IFN), since both MeV and retinoids can modulate IFN signaling. Type I IFN blocking antibodies abrogated the inhibitory effects of ATRA on MeV replication. IFN-stimulated genes (ISG) were upregulated by ATRA in MeV-infected cell cultures when compared to either treatment or infection alone. Using a transwell system, we determined that this increased gene expression occurred in initially uninfected bystander cells. The ATRA-treated bystander cells did not support substantial viral replication when subsequently challenged with MeV. Finally, we identified retinoid-induced gene I (RIG-I) as a link between the RARalpha - and IFN-dependent mechanism of MeV inhibition by retinoids. We found that RIG-I can be transcriptionally regulated by ATRA. Furthermore, RARalpha function was necessary for the induction of RIG-I by MeV and ATRA, and could bind to the RIG-I promoter. A retinoic acid response element (RARE) in the RIG-I promoter region was identified, and RIG-I promoter constructs were shown to produce luciferase in response to ATRA. Finally, we showed that functional RIG-I was necessary for ATRA to inhibit MeV replication. In summary, we have demonstrated that transcriptional regulation of RIG-I / Les taux de morbidité et de mortalité associés à la rougeole peuvent diminuer à la suite d'un traitement à la vitamine A ; or, le mécanisme à l'origine de cet effet bénéfique est encore inconnu. Par ce travail, nous avons voulu étudier les mécanismes résultant de l'interaction du virus de la rougeole (MeV) et des rétinoïdes in vitro. Nous avions d'abord comme objectif de déterminer si les rétinoïdes avaient un impact sur la réplication du MeV in vitro . Nous avons démontré que le ligand spécifique, l'acide tout-trans rétinoïque (ATRA), ainsi que d'autres rétinoïdes naturels et synthétiques inhibent la réplication du MeV chez des cellules primaires de même que chez un grand nombre de lignées cellulaires. Nous avons aussi démontré que la signalisation par les récepteurs nucléaires des rétinoïdes, en particulier le récepteur alpha de l'acide rétinoïque (RARalpha), était responsable de l'effet inhibiteur observé. Nous avons ensuite voulu déterminer le rôle de l'interféron de type I (IFN) puisqu'il est connu que MeV et les rétinoïdes peuvent moduler la signalisation de cet IFN de différentes façons. Nos recherches ont permis de démontrer que des anticorps bloquant la signalisation par l'IFN de type I renversent les effets inhibiteurs de l'ATRA sur la réplication du MeV, démontrant ainsi l'importance de la signalisation par cet IFN. En outre, l'ATRA augmente l'expression des gènes stimulés par l'IFN de type I (ISG) chez des cellules en culture infectées par le MeV comparativement aux cellules uniquement traitées à l'ATRA ou uniquement infectées par le MeV. L'utilisation d'un système Transwell a aussi permis de déterminer que l'augmentation de l'expression de ces gènes survient chez des cellules de voisinage non-infectées initialement par le MeV. Lorsque ces cellules, traitées à l'ATRA, étaient par la suite infectées au MeV, on n'y observait pas d
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LACETR/oai:collectionscanada.gc.ca:QMM.66744 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Trottier, Claire |
| Contributors | Brian Ward (Internal/Supervisor), Wilson H Miller (Internal/Cosupervisor2) |
| Publisher | McGill University |
| Source Sets | Library and Archives Canada ETDs Repository / Centre d'archives des thèses électroniques de Bibliothèque et Archives Canada |
| Language | English |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation |
| Format | application/pdf |
| Coverage | Doctor of Philosophy (Department of Microbiology & Immunology) |
| Rights | All items in eScholarship@McGill are protected by copyright with all rights reserved unless otherwise indicated. |
| Relation | Electronically-submitted theses. |
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